目的探究低氧環(huán)境下纖維生長因子2對人牙髓干細(xì)胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)增殖及分化的影響。方法收集hDPSCs并對其表面標(biāo)記進(jìn)行鑒定后,分別在常氧(21%O₂)和低氧(3%O₂)環(huán)境下,加或不加成纖維細(xì)胞生長因子2(fibroblast growth factor 2,FGF2)培養(yǎng),MTT法分別檢測各組細(xì)胞的增殖能力。對各組細(xì)胞進(jìn)行成骨及成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)21 d,觀察低氧環(huán)境下纖維生長因子2對hDPSCs多向分化能力的影響。結(jié)果 MTT結(jié)果顯示,低氧+FGF2組hDPSCs在第2 d、3 d的增殖活性高于其余三組,低氧組及FGF2組次之,均高于常氧組;成骨誘導(dǎo)結(jié)果顯示,低氧+FGF2組礦化結(jié)節(jié)最多,常氧組礦化結(jié)節(jié)最少;成脂誘導(dǎo)結(jié)果顯示,低氧+FGF2組形成脂滴最多,常氧組形成脂滴最少。結(jié)論低氧環(huán)境下使用FGF2預(yù)處理培養(yǎng)能夠提高h(yuǎn)DPSCs的增殖能力表達(dá),并可促進(jìn)hDPSCs的分化。

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圖1原代培養(yǎng)hDPSCs形態(tài)×100

組織塊酶消化法獲得的組織培養(yǎng)5～7天后可見部分組織塊有游離細(xì)胞游出,傳代培養(yǎng)后hDPSCs貼壁生長,呈長梭形,形態(tài)均一(圖1)。2.2hDPSCs表面標(biāo)記表達(dá)情況

圖2流式細(xì)胞儀分別檢測四種細(xì)胞表面標(biāo)記物的總數(shù)

流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表面標(biāo)記物CD44、CD29、CD45、CD31,結(jié)果顯示CD44、CD29即間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)記物呈現(xiàn)高表達(dá),陽性率為98.77%、98.66%;造血干細(xì)胞表面標(biāo)記物CD45和內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記物CD31低表達(dá),陽性率分別為0.09%和0.03%(圖2)。2.3低....

圖3各組hDPSCs成骨礦化情況茜素紅染色×100

四組成脂誘導(dǎo)組鏡下可見細(xì)胞體積增大,細(xì)胞內(nèi)可見大小不一的小泡聚集,油紅O染色后,鏡下觀察到鮮紅染色的脂滴,其中低氧+FGF2組形成脂滴最多,常氧組形成脂滴最少(圖4)。圖4各組hDPSCs成脂誘導(dǎo)情況油紅O染色×100

圖4各組hDPSCs成脂誘導(dǎo)情況油紅O染色×100

圖3各組hDPSCs成骨礦化情況茜素紅染色×1002.4低氧及FGF2對hDPSCs增殖的影響

本文編號：3977727