目的觀察誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSCs)定向分化為毛囊干細(xì)胞(HFSCs)的潛能。方法通過4個(gè)轉(zhuǎn)錄因子(OCT4、SOX2、KLF4和c-Myc)重編程健康人尿液細(xì)胞為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSCs)。通過調(diào)控維甲酸(RA)、骨形態(tài)發(fā)生蛋白4(BMP-4)、表皮細(xì)胞生長因子(EGF)信號(hào)通路,將iPSCs誘導(dǎo)為毛囊干細(xì)胞(HFSCs),并對iPSCs來源的毛囊干細(xì)胞(iPS-HFSCs)進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)分析、RT-qPCR。結(jié)果人尿液細(xì)胞來源的iPSCs具有胚胎干細(xì)胞(ESCs)類似的細(xì)胞形態(tài)、基因表達(dá)。通過調(diào)控RA、BMP-4及EGF信號(hào)通路,iPSCs定向分化為具有類似毛囊干細(xì)胞形態(tài)、基因表達(dá)和表型的細(xì)胞。結(jié)論通過4個(gè)轉(zhuǎn)錄因子,尿液細(xì)胞成功重編程為全能性的iPSCs。iPSCs具有毛囊干細(xì)胞類似特性,為構(gòu)建基于iPSCs的組織工程皮膚提供參考。

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【部分圖文】：

圖1尿液細(xì)胞來源iPSCs鑒定

iPSCs團(tuán)塊懸浮培養(yǎng)1～2d,可見擬胚體形成(圖2A),接種到3T3飼養(yǎng)層2d后,可見細(xì)胞從擬胚體邊緣爬出(圖2B)。分化11d,爬出的細(xì)胞呈緊密的多角形,與iPSCs具有顯著差異(圖2C),分化18d細(xì)胞呈現(xiàn)表皮干細(xì)胞特異性的鋪路石形態(tài)(圖2D)。圖2iPSCs分化....

圖2iPSCs分化為毛囊干細(xì)胞

圖1尿液細(xì)胞來源iPSCs鑒定免疫熒光檢測細(xì)胞中毛囊干細(xì)胞特異性標(biāo)記(CD200、ITGA6、KRT15和KRT19)的陽性表達(dá)(圖3A)。iPSC-HFSCs的RT-qPCR分析顯示人毛囊干細(xì)胞特異性基因(CD200、KRT15、KRT19和ITGA6)高表達(dá)(圖3B),而....

圖3iPSCs來源毛囊干細(xì)胞鑒定

iPSCs的分化受多種生長因子調(diào)控,骨形態(tài)發(fā)生蛋白4(BMP-4)能夠誘導(dǎo)多能干細(xì)胞上皮分化,并通過Smad信號(hào)通路阻斷神經(jīng)分化,BMP-4誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化為角質(zhì)細(xì)胞[9]。而維甲酸(retinoicacid,RA)和表皮細(xì)胞生長因子(epidermalgrowthfac....

本文編號(hào)：3976080