基質(zhì)金屬蛋白酶(Matrix metalloproteinases,MMPs)是一類鋅離子依賴的肽鏈內(nèi)切酶,可以引起炎癥組織的破壞,是慢性炎癥性疾病的標(biāo)志物,而且能夠降解基質(zhì)膜和膠原,促進(jìn)癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。但是當(dāng)MMPs抑制劑類藥物應(yīng)用于癌癥臨床試驗(yàn)時(shí)會(huì)引起了很多副作用,這揭示了MMPs在炎癥性疾病和癌癥進(jìn)程中具有新的生物學(xué)功能。MMP-26(Matrix metalloproteinase-26,MMP-26,或者M(jìn)atrilysin-2)是MMPs家族最小的成員,與其他MMPs家族成員相比,盡管在結(jié)構(gòu)上具有高度的相似性,但因其具有獨(dú)特的種屬和組織表達(dá)特異性、獨(dú)特的細(xì)胞內(nèi)定位以及獨(dú)特的自激活機(jī)制等等,使得MMP-26在細(xì)胞內(nèi)行使與其他MMPs家族成員不同的功能。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是真核細(xì)胞中重要的細(xì)胞器,是蛋白質(zhì)合成、翻譯后修飾、脂質(zhì)合成、鈣離子儲(chǔ)存和維持鈣離子穩(wěn)態(tài)的重要場(chǎng)所。當(dāng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的功能和需求之間出現(xiàn)紊亂時(shí)會(huì)產(chǎn)生內(nèi)質(zhì)網(wǎng)壓力,并啟動(dòng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)壓力應(yīng)激。許多生理和病理進(jìn)程都伴隨著內(nèi)質(zhì)網(wǎng)壓力的產(chǎn)生,而內(nèi)質(zhì)網(wǎng)壓力本身也可以導(dǎo)致和促進(jìn)疾病的發(fā)生發(fā)展。在實(shí)驗(yàn)室的前期工作中,我們發(fā)現(xiàn)MMP-26特異性地定位于細(xì)胞...

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖1.2鼠源MMPs和它們的有益特性[28]

第一章緒論9圖1.2鼠源MMPs和它們的有益特性[28]其他重要的凋亡調(diào)控器也會(huì)受到MMP的調(diào)控。這些調(diào)控器包括BH3相互作用域死亡拮抗劑（BID）、凋亡相關(guān)基因-2相互作用蛋白X（ALIX或程序性細(xì)胞死亡蛋白6）和細(xì)胞色素c。常見(jiàn)的凋亡前底物和抑制劑，在早期凋亡階段中的MMP

圖3.1構(gòu)建了穩(wěn)定表達(dá)GFP或MMP-26-GFP的HeLa細(xì)胞A.MMP-26-GFP表達(dá)細(xì)胞的明場(chǎng)及熒光成像，右下角顯示的是單個(gè)細(xì)胞的

44蛋白，當(dāng)壓力產(chǎn)生時(shí)，ATF-6轉(zhuǎn)移到Golgi體被分解成一個(gè)50kD的ATF-6N端片段[136]，在圖3.2B中顯示含有ATF-6N片段的密度梯度組分中不含有MMP-26，綜合以上結(jié)果證明MMP-26主要位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。圖3.1構(gòu)建了穩(wěn)定表達(dá)GFP或MMP-26-GFP的HeL....

圖3.2MMP-26定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)A.MMP-26-GFP表達(dá)細(xì)胞，利用anti-GRP78抗體染色，共聚焦熒光顯微鏡成像；B.

第三章實(shí)驗(yàn)結(jié)果45Ca2+-ATPase抑制劑，通過(guò)抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)Ca2+-ATPase釋放鈣離子，導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)壓力以及細(xì)胞凋亡；A23187(Ca2+離子載體)，能夠刪除內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的鈣離子，細(xì)胞內(nèi)鈣離子的流出造成細(xì)胞內(nèi)環(huán)境紊亂導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)壓力；DTT(二硫蘇糖醇，Dithiothrei....

圖3.3MMP-26在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)壓力下內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位發(fā)生改變A.MMP-26-GFP在穩(wěn)態(tài)下的細(xì)胞內(nèi)定位；B.MMP-26-GFP在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)壓力誘導(dǎo)劑TM（5

46有文獻(xiàn)報(bào)道當(dāng)糖基化蛋白質(zhì)的糖基化被抑制后本應(yīng)該分泌到細(xì)胞外的蛋白質(zhì)會(huì)由于糖基化不能正常進(jìn)行而滯留在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，推測(cè)MMP-26-GFP由于糖基化被抑制導(dǎo)致并未發(fā)生定位的改變(圖3.3B)。為了驗(yàn)證MMP-26-GFP是一個(gè)糖基化的蛋白質(zhì)這種假設(shè)，利用糖基化抑制劑TM加藥24h后檢....

本文編號(hào)：3940747