第一部分人副流感病毒3型F蛋白HRB連接區(qū)結(jié)構(gòu)與功能研究研究背景:人副流感病毒3型(human parainfluenza virus type3,HPIV3)為副粘病毒科(Paramyxoviridae)副粘病毒屬(Paramyxovirus)病毒家族中的一種重要病毒,可引起5歲以下嬰幼兒下呼吸道感染,導(dǎo)致支氣管炎和肺炎。在病毒性呼吸道感染患者中,HPIV3的臨床陽(yáng)性檢出率僅次于呼吸道合胞病毒(respiratorysyncytial virus,RSV)。HPIV3為包膜病毒,其遺傳物質(zhì)為不分節(jié)段的單負(fù)鏈RNA(-ssRNA)。HPIV3病毒包膜上錨定有兩種與病毒毒力密切相關(guān)的蛋白,血凝素-神經(jīng)氨酸酶(hemagglutinin-neuraminidase,HN)和融合蛋白(fusionprotein,F)。HPIV3 的病毒包膜與宿主細(xì)胞膜的融合是病毒感染宿主細(xì)胞的關(guān)鍵步驟,該過(guò)程由HN蛋白協(xié)助,在F蛋白的介導(dǎo)下完成。HN蛋白與宿主細(xì)胞膜上唾液酸(sialic acid,SA)受體結(jié)合后,HN蛋白激活F蛋白,繼而F蛋白發(fā)生一系列不可逆構(gòu)象改變,由融合前構(gòu)象轉(zhuǎn)變?yōu)槿诤虾髽?gòu)象,在這個(gè)...

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圖２?ＨＰＩＶ３?Ｆ?ＨＲＢ連接區(qū)突變的染料轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)結(jié)果??（Ａ）染料轉(zhuǎn)移的代表性圖像

?山東大學(xué)博士學(xué)位論文???細(xì)胞中也未觀察到染料轉(zhuǎn)移事件。而在同源ＨＮ與ＨＰＩＶ３?ｗｔ?Ｆ或Ｃｈ－ＨＰＩＶｌ－Ｌ３??共轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中觀察到明顯的Ｒ１８染料的轉(zhuǎn)移，熒光染料呈現(xiàn)出明亮的紅色云??霧狀擴(kuò)散現(xiàn)象。但是，與轉(zhuǎn)染ＨＰＩＶ３ｗｔＦ的細(xì)胞相比，Ｃｈ－ＨＰＩＶｌ－Ｌ３轉(zhuǎn)染的細(xì)?....

圖３丨丨ＰＩＶ３?Ｆ?ＨＲＢ連接區(qū)突變體內(nèi)容物混合實(shí)驗(yàn)結(jié)果??

?山東大學(xué)博士學(xué)位論文???Ｚ??＾?１２０－１??％??？?１００－?國(guó)??１?８０－?■??６。－?■??ｉ：１?．ｌｉｉｉｊ－??５?＃夕Ｘ＃?ｘ戶戶＃?Ｘ＃??ＷＸ，??Ｍｕｔａｎｔｓ??圖３丨丨ＰＩＶ３?Ｆ?ＨＲＢ連接區(qū)突變體內(nèi)容物混合實(shí)驗(yàn)結(jié)果??突變Ｆ蛋白與ＨＰＩＶ３....

圖４?ＨＰＩＶ３?Ｆ?ＨＲＢ連接區(qū)突變體合胞體形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果??（Ａ）合胞體形成的代表性圖像

?山東大學(xué)博士學(xué)位論文???明突變體Ｃｈ－ＨＰｌＶＩ－Ｌ３對(duì)最終合胞體的形成能力基本無(wú)影響。但是，其他三個(gè)??突變體則完全喪失合胞體形成能力。圖４Ｂ合胞體形成的量化圖示表示為，在共??表達(dá)ＨＰＩＶ３?ＨＮ的條件下，突變組合胞體形成程度占ｗｔ?Ｆ合胞體形成程度的百??分比。當(dāng)與ＨＰ....

圖５?ＨＰＩＶ３?Ｆ?ＨＲＢ連接區(qū)突變體間接免疫熒光結(jié)果??（Ａ）嵌合和缺失突變蛋白的間接免疫熒光測(cè)定（ＩＩＦＡ）

?山東大學(xué)博士學(xué)位論文???ｍｍｍ??ｐＢＳＫ＋?ＨＰＩＶ３?ｗｔ?Ｆ?Ｃｈ－ＮＤＶ－Ｌ３??■■■??Ｃｈ－ＭＶ－Ｌ３?Ｃｈ－ＨＰＩＶ１－Ｌ３?Ｄｅ－Ｌ３??■■ＨＩ??ｐＢＳＫ＋?ＨＰＩＶ３?ｗｔ?Ｆ－Ｈｉｓ?Ｃｈ－ＮＤＶ－Ｌ３－Ｈｉｓ??■■Ｈ??Ｃｈ－ＭＶ－Ｌ３－Ｈｉｓ?....

本文編號(hào)：3903013