目的:在生命進(jìn)程中,細(xì)胞穩(wěn)態(tài)時(shí)刻承受著來自機(jī)體內(nèi)外有害因素、遺傳因素和病理因素的威脅,從而引發(fā)DNA損傷,導(dǎo)致基因組完整性和穩(wěn)定性“平衡失調(diào)”。生命個(gè)體在發(fā)展進(jìn)程中獲得了一系列包括DNA損傷修復(fù)反應(yīng)(DNA damage response,DDR)、細(xì)胞周期檢查點(diǎn)、細(xì)胞凋亡與壞死、細(xì)胞衰老與細(xì)胞自噬等細(xì)胞穩(wěn)態(tài)維護(hù)機(jī)制,承擔(dān)著維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的重要使命。DNA損傷修復(fù)反應(yīng)體系的“動(dòng)態(tài)平衡”是維系基因組完整性和穩(wěn)定性的重要保障,其“平衡失調(diào)”將導(dǎo)致疾病的發(fā)生。近年研究發(fā)現(xiàn),蛋白質(zhì)的翻譯后修飾能夠調(diào)控DNA損傷修復(fù)反應(yīng)從而影響基因組的完整性和穩(wěn)定性。蛋白質(zhì)的翻譯后修飾有多種方式,主要包括甲基化、糖基化、乙酰化、磷酸化等。探索蛋白質(zhì)的翻譯后修飾對DNA損傷修復(fù)反應(yīng)的調(diào)控是該領(lǐng)域目前研究的熱點(diǎn)。SAMHD1基因最初在人樹突狀細(xì)胞的cDNA文庫中被發(fā)現(xiàn),其蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)包括SAM結(jié)構(gòu)域和HD結(jié)構(gòu)域。近幾年關(guān)于SAMHD1研究的熱點(diǎn)主要在其抗病毒感染功能上。SAMHD1是目前在真核細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的第一個(gè)脫氧核糖核苷三磷酸水解酶(dNTPase),可將細(xì)胞內(nèi)的脫氧核糖核苷三磷酸(dNTP)水解為核苷和三磷酸,在調(diào)...

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1前言
2 材料與方法
    2.1 主要試劑和儀器
        2.1.1 細(xì)胞及相關(guān)質(zhì)粒
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及培養(yǎng)基
        2.1.3 常用抗體
        2.1.4 設(shè)備及儀器
    2.2 主要實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 重組質(zhì)粒構(gòu)建
        2.2.2 突變質(zhì)粒構(gòu)建
        2.2.3 脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法轉(zhuǎn)染
        2.2.4 穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系構(gòu)建
        2.2.5 蛋白質(zhì)免疫印跡
        2.2.6 免疫共沉淀
        2.2.7 蛋白質(zhì)體外結(jié)合實(shí)驗(yàn)
        2.2.8 免疫熒光實(shí)驗(yàn)
3 結(jié)果
    3.1 SAMHD1是可以被乙�；揎椀�,其乙酰基轉(zhuǎn)移酶是GCN
        3.1.1 SAMHD1蛋白可被乙�；揎�
        3.1.2 SAMHD1 的乙�；D(zhuǎn)移酶是GCN
        3.1.3 DNA損傷壓力下,SAMHD1 的乙酰化修飾水平降低
    3.2 SAMHD1蛋白的乙�；揎椨绊懫淞姿峄揎椉癉NA損傷修復(fù)
        3.2.1 HDAC抑制劑影響SAMHD1的磷酸化修飾
        3.2.2 SAMHD1的乙�；稽c(diǎn)突變影響其磷酸化修飾和DNA損傷修復(fù)
    3.3 去乙酰化酶SIRT2調(diào)控SAMHD1蛋白的乙�；揎�
        3.3.1 體內(nèi)SIRT2與SAMHD1結(jié)合
        3.3.2 體外SIRT2與SAMHD1直接結(jié)合
        3.3.3 DNA損傷壓力下,SIRT2與SAMHD1 結(jié)合增強(qiáng)
        3.3.4 SIRT2 特異性抑制劑AGK2 影響SAMHD1 的磷酸化修飾
        3.3.5 DNA損傷壓力下,沉默SIRT2 抑制DNA損傷修復(fù)
        3.3.6 DNA損傷壓力下,過表達(dá)SIRT2 促進(jìn)DNA損傷修復(fù)
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性自我評價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡歷



本文編號：3844406