高等植物種子積累大量的儲(chǔ)藏蛋白質(zhì),為種子萌發(fā)提供氮源。在種子成熟過(guò)程中,種子儲(chǔ)藏蛋白質(zhì)(SSP)以前體形式在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(rER)大量合成,通過(guò)囊泡運(yùn)輸轉(zhuǎn)運(yùn)到蛋白質(zhì)儲(chǔ)藏型液泡(PSV)中,在PSV中被加工成成熟形式儲(chǔ)存起來(lái)。我們前期研究發(fā)現(xiàn),擬南芥MAG2復(fù)合體定位在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上,在高爾基體到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)逆向運(yùn)輸過(guò)程中運(yùn)輸囊泡在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的拴留步驟發(fā)揮重要功能。MAG2復(fù)合體包含四個(gè)亞基,MAG2、MIP1、MIP2和MIP3。這些亞基的缺失突變體種子細(xì)胞的囊泡運(yùn)輸受阻,導(dǎo)致ER腔內(nèi)積累大量的SSP前體,并引起ER stress。種子發(fā)育過(guò)程中,ABA信號(hào)通路和其他轉(zhuǎn)錄因子起關(guān)鍵調(diào)控作用。本研究以MAG2復(fù)合體亞基缺失突變體mip2-1、mag2-1、mip3-1單突變體和mag2-lmip3-1、mip2-1mip3-1雙突變體以及ABA信號(hào)通路缺陷突變體abi5-7、pyl112458、snrk2.2/23/2.6、aba2-1為實(shí)驗(yàn)材料,初步探討了種子成熟、休眠和萌發(fā)過(guò)程中ER-Golgi間囊泡運(yùn)輸與ABA信號(hào)通路之間的相關(guān)性。首先,通過(guò)對(duì)MAG2復(fù)合體亞基缺失單、雙突變體生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程的表型...

【文章頁(yè)數(shù)】：59 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 囊泡運(yùn)輸途徑
        1.1.1 種子儲(chǔ)藏蛋白質(zhì)的運(yùn)輸途徑
    1.2 ABA代謝途徑
        1.2.1 ABA信號(hào)通路
    1.3 種子成熟和儲(chǔ)藏物質(zhì)調(diào)控機(jī)制
        1.3.1 種子成熟的調(diào)控
        1.3.2 儲(chǔ)藏物質(zhì)的調(diào)控
    1.4 種子休眠的調(diào)控
    1.5 種子萌發(fā)的調(diào)控
    1.6 研究目的與意義
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 抗體
    2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)試劑
    2.4 擬南芥植株雜交
    2.5 純合雙突變體突變體篩選
        2.5.1 葉片基因組DNA的提取
        2.5.2 PCR擴(kuò)增檢測(cè)
        2.5.3 凝膠電泳
    2.6 表型觀察
        2.6.1 突變體初期生長(zhǎng)情況觀察
        2.6.2 突變體生長(zhǎng)發(fā)育情況
        2.6.3 突變體種子表型
    2.7 突變體萌發(fā)率統(tǒng)計(jì)
        2.7.1 不同儲(chǔ)存時(shí)間突變體種子的萌發(fā)率
        2.7.2 ABA和NaCl處理下突變體種子的萌發(fā)率
    2.8 Western Blot
        2.8.1 Western Blot實(shí)驗(yàn)步驟
        2.8.2 考馬斯亮藍(lán)染色、脫色
    2.9 RT-PCR
3 結(jié)果與分析
    3.1 MAG2拴留復(fù)合體雙突變體制備與篩選
    3.2 MAG2拴留復(fù)合體亞基基因缺失對(duì)擬南芥的影響
        3.2.1 對(duì)擬南芥植物生長(zhǎng)發(fā)育的影響
        3.2.2 對(duì)擬南芥種子發(fā)育的影響
        3.2.3 對(duì)擬南芥蛋白質(zhì)運(yùn)輸?shù)挠绊?br>        3.2.4 囊泡運(yùn)輸缺陷引起ER stress
        3.2.5 對(duì)擬南芥種子壽命的影響
        3.2.6 對(duì)植物對(duì)外界環(huán)境脅迫應(yīng)答的影響
    3.3 MAG2復(fù)合體亞基缺失對(duì)種子成熟、休眠和萌發(fā)調(diào)控因子表達(dá)的影響
        3.3.1 對(duì)ABI3、ABI4和ABI5表達(dá)水平的影響
        3.3.2 對(duì)轉(zhuǎn)錄因子LEC1、LEC2和FUS3表達(dá)水平的影響
        3.3.3 對(duì)轉(zhuǎn)錄因子WRKY40、WRKY41、WRKY6的影響
    3.4 MAG2復(fù)合體與ABA信號(hào)途徑的相關(guān)性
        3.4.1 ABA信號(hào)通路對(duì)MAG2復(fù)合體穩(wěn)定性的影響
        3.4.2 ABA信號(hào)通路對(duì)蛋白質(zhì)運(yùn)輸?shù)挠绊?br>        3.4.3 ABA信號(hào)通路對(duì)種子壽命的影響
        3.4.4 MAG2復(fù)合體與ABA信號(hào)途徑的相關(guān)性
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝
附件



本文編號(hào)：3843788