硒是對人體具有多種生理功能的必需微量元素,而我國多數(shù)人群硒攝入量不足,因此進行富硒產(chǎn)品的研究與開發(fā)對于提高國民健康水平意義重大。富硒酵母菌作為一種有機硒源,比無機硒源具有更高的生物活性和安全性,是富硒功能性產(chǎn)品的理想添加劑,應(yīng)用前景廣闊。本研究以貴州開陽這一富硒地區(qū)的桑葚果園為酵母菌的分離源,通過定性定量的方法篩選出一株富硒能力強的酵母菌,對其進行了分子生物學(xué)鑒定和生長特性研究,同時對菌株的富硒發(fā)酵條件進行了優(yōu)化,分析了富硒酵母菌的氨基酸組成,最后基于轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)對酵母菌的富硒機理進行了初步探究,以期為富硒酵母菌的進一步開發(fā)利用提供參考。研究的主要結(jié)果如下:(1)從富硒地區(qū)開陽的某桑葚果園中,共分離得到75株酵母菌,然后利用耐硒法和紅硒法進行初篩,再以硒轉(zhuǎn)化率進行復(fù)篩,得到一株硒轉(zhuǎn)化率較高的酵母菌,其富硒量為2278.35μg/g,生物量為4.31 g/L,硒轉(zhuǎn)化率為49.11%,編號為SY2,通過WL培養(yǎng)基初步鑒定及26S r DNA序列分析,鑒定該菌株為釀酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)。(2)對S.cerevisiae SY2的生長特性進行了研究,其延...

【文章頁數(shù)】：124 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 硒的概述
        1.2.1 硒元素的發(fā)現(xiàn)
        1.2.2 硒的分布及存在方式
        1.2.3 硒的生理功能
        1.2.4 生物體補硒方式
    1.3 酵母菌
        1.3.1 酵母菌的分布
        1.3.2 酵母菌的鑒定
    1.4 富硒酵母菌
        1.4.1 富硒酵母菌的篩選
        1.4.2 酵母菌作為富硒載體的優(yōu)越性
        1.4.3 富硒酵母的研究現(xiàn)狀
    1.5 轉(zhuǎn)錄組學(xué)
        1.5.1 轉(zhuǎn)錄組學(xué)簡介
        1.5.2 轉(zhuǎn)錄組學(xué)在酵母菌研究中的應(yīng)用
    1.6 研究意義及內(nèi)容
        1.6.1 研究意義
        1.6.2 研究內(nèi)容
        1.6.3 技術(shù)路線
第二章 桑葚果園富硒酵母菌的分離、篩選與鑒定
    2.1 引言
    2.2 試驗材料
        2.2.1 樣品
        2.2.2 試驗試劑
        2.2.3 主要試劑的配制
        2.2.4 試驗儀器與設(shè)備
        2.2.5 培養(yǎng)基
    2.3 試驗方法
        2.3.1 酵母菌的分離純化及保藏
        2.3.2 酵母菌種子液的制備
        2.3.3 富硒酵母菌的初篩
        2.3.4 富硒酵母菌的復(fù)篩
        2.3.5 富硒酵母菌的初步鑒定
        2.3.6 富硒酵母菌的分子生物學(xué)鑒定
        2.3.7 分析測定方法
        2.3.8 數(shù)據(jù)處理與分析
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 酵母菌的分離純化
        2.4.2 富硒酵母菌的初篩
        2.4.3 富硒酵母菌的復(fù)篩
        2.4.4 富硒酵母菌的初步鑒定
        2.4.5 富硒酵母菌的分子生物學(xué)鑒定
    2.5 本章小結(jié)
第三章 富硒酵母菌的生長特性及富硒發(fā)酵條件優(yōu)化研究
    3.1 引言
    3.2 試驗材料
        3.2.1 試驗樣品
        3.2.2 試驗試劑
        3.2.3 主要試劑的配制
        3.2.4 試驗儀器與設(shè)備
        3.2.5 培養(yǎng)基
    3.3 試驗方法
        3.3.1 富硒酵母菌種子液的制備
        3.3.2 富硒酵母菌生長曲線的繪制
        3.3.3 富硒酵母菌發(fā)酵力的測定
        3.3.4 富硒酵母菌生長條件的研究
        3.3.5 富硒酵母菌培養(yǎng)基的選擇
        3.3.6 富硒發(fā)酵條件的研究
        3.3.7 富硒酵母菌氨基酸的測定
        3.3.8 分析測定方法
        3.3.9 數(shù)據(jù)處理與分析
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 富硒酵母菌生長曲線的繪制
        3.4.2 富硒酵母菌發(fā)酵力的測定
        3.4.3 富硒酵母菌的生長條件
        3.4.4 富硒酵母菌培養(yǎng)基的選擇
        3.4.5 富硒發(fā)酵條件的研究
        3.4.6 富硒酵母菌的氨基酸分析
    3.5 本章小結(jié)
第四章 基于轉(zhuǎn)錄組學(xué)對酵母菌富硒機理的初步研究
    4.1 引言
    4.2 試驗材料
        4.2.1 試驗材料
        4.2.2 試驗試劑
        4.2.3 主要試劑的配制
        4.2.4 試驗儀器與設(shè)備
        4.2.5 培養(yǎng)基
    4.3 試驗方法
        4.3.1 富硒酵母菌種子液的制備
        4.3.2 富硒酵母菌培養(yǎng)
        4.3.3 酵母菌總RNA提取與質(zhì)量檢測
        4.3.4 文庫制備和轉(zhuǎn)錄組測序
        4.3.5 測序數(shù)據(jù)質(zhì)量分析
        4.3.6 序列比對分析
        4.3.7 基因功能注釋
        4.3.8 表達量分析
        4.3.9 差異表達基因篩選
        4.3.10 差異基因GO富集分析
        4.3.11 差異基因KEGG富集分析
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 RNA樣品質(zhì)量檢測及文庫構(gòu)建
        4.4.2 測序數(shù)據(jù)質(zhì)量評估
        4.4.3 序列比對分析
        4.4.4 基因功能注釋
        4.4.5 表達量分析
        4.4.6 差異表達基因的篩選及注釋
        4.4.7 差異表達基因GO富集分析
        4.4.8 差異表達基因KEGG富集分析
        4.4.9 iPath代謝通路分析
    4.5 本章小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論與創(chuàng)新點
        5.1.1 主要結(jié)論
        5.1.2 創(chuàng)新點
    5.2 展望
致謝
主要參考文獻
附錄一
附錄二
圖版



本文編號：3843269