大腦是人類產(chǎn)生情感,學(xué)習(xí)和記憶的根源,而神經(jīng)元則是完成這些功能的基本單元。神經(jīng)元存在一特化的結(jié)構(gòu)稱為軸突(axon),其通過軸突來向胞體遠(yuǎn)端傳遞電信號,并導(dǎo)致作為化學(xué)信號的神經(jīng)遞質(zhì)從其末端的特殊結(jié)構(gòu)突觸(synapse)釋放神經(jīng)遞質(zhì),從而將信號傳遞給其他神經(jīng)元以及效應(yīng)器官或組織。突觸位于神經(jīng)元軸突的遠(yuǎn)端,包含了前一個細(xì)胞的軸突末端膨大,后一個細(xì)胞的胞體或樹突,以及二者之間的細(xì)胞間質(zhì),稱為突觸間隙(synaptic cleft)。突觸前的軸突末端包含了大量裝載有神經(jīng)遞質(zhì)的突觸囊泡(synaptic vesicle),當(dāng)胞體傳遞而來的電信號到達(dá)軸突末端,引起突觸前膜的去極化,激活突觸前膜上的電壓敏感鈣離子通道,導(dǎo)致胞外鈣離子內(nèi)流從而觸發(fā)突觸囊泡與突觸前膜融合,釋放神經(jīng)遞質(zhì)進(jìn)入突觸間隙。突觸間隙中的神經(jīng)遞質(zhì)結(jié)合到突觸后細(xì)胞膜上的特異性受體,引起下一個神經(jīng)元或效應(yīng)細(xì)胞接下來的一系列反應(yīng),完成神經(jīng)系統(tǒng)的信號傳遞。裝載了神經(jīng)遞質(zhì)的突觸囊泡經(jīng)由拴系(tethering),錨定(docking),成熟(priming)以及融合(fusion)四個主要過程將神經(jīng)遞質(zhì)釋放入突觸間隙。調(diào)控這些過程的蛋白質(zhì)以...

【文章頁數(shù)】：126 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 N-乙基馬來酰亞胺敏感因子結(jié)合蛋白受體(SNAREs)
    1.2 Munc18-1 蛋白
    1.3 Munc13-1 蛋白
    1.4 Synaptotagmin-1 蛋白
    1.5 Munc18-1與Munc13-1 介導(dǎo)的SNARE復(fù)合物組裝與神經(jīng)遞質(zhì)分泌的模型
    1.6 本課題研究的主要內(nèi)容
2 方法與原理
    2.1 環(huán)狀定點(diǎn)突變
    2.2 重組蛋白表達(dá)與純化
    2.3 谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶下拉(GST pull-down)實驗
    2.4 圓二色譜(Circular dichroism spectroscopy,CD spectroscopy)
    2.5 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(Native PAGE)
    2.6 脂質(zhì)體制備
    2.7 脂質(zhì)體共懸浮(Liposome co-floatation)
    2.8 晶體數(shù)據(jù)收集及結(jié)構(gòu)解析
    2.9 熒光各向異性(Fluorescence anisotropy)
    2.10 熒光共振能量轉(zhuǎn)移(F?rster resonance energy transfer,FRET)
    2.11 單分子熒光共振能量轉(zhuǎn)移(simgle-molecule FRET,smFRET)
    2.12 單囊泡拴系(single-vesicle tehtering)
    2.13 脂質(zhì)體融合實驗
3 結(jié)果與分析
    3.1 Munc13-1 MUN結(jié)構(gòu)域的活性區(qū)域研究
    3.2 Munc13-1 MUN結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)SNARE復(fù)合物組裝的分子機(jī)制
    3.3 Munc13-1 與Munc18-1 共同介導(dǎo)SNARE復(fù)合物組裝的分子機(jī)制
4 總結(jié)與討論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文



本文編號：3837977