多氯聯(lián)苯(Polychlorinated biphenyls,PCBs)是一種環(huán)境中長期存在的持久性有機(jī)污染物,易在生物體內(nèi)蓄積引起多種生物毒性,嚴(yán)重威脅生態(tài)與生物安全。紅樹林是海岸潮間帶一種獨(dú)特的生態(tài)系統(tǒng),微生物資源豐富,本試驗(yàn)基于紅樹林相關(guān)降解菌的研究,旨在尋找高效的PCBs降解菌,通過生物修復(fù)治理PCBs環(huán)境污染。本研究主要進(jìn)行了以下試驗(yàn):(1)本試驗(yàn)以廣東省湛江市高橋鎮(zhèn)紅樹林國家級自然保護(hù)區(qū)為研究對象,采集高、中、低潮帶3種生境底泥進(jìn)行微生物宏基因組測序;(2)在原生數(shù)據(jù)分析的基礎(chǔ)上,利用MM30無機(jī)鹽培養(yǎng)基對紅樹林底泥微生物進(jìn)行富集、馴化,再對富集培養(yǎng)物進(jìn)行分離、鑒定;(3)通過氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(Gas Chromatography-Mass Spectrometer,GC-MS)檢測PCBs降解體系中PCBs的濃度,探究目標(biāo)菌株對PCBs的降解效果。研究結(jié)果表明:(1)3組湛江紅樹林底泥生境樣本的序列數(shù)、多樣性指數(shù)和覆蓋率均處于較高水平,OTU數(shù)目統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn),在3組樣本底泥樣品中共獲得了10054個(gè)OTU(S1:6761個(gè)、S2:7866個(gè)、S3:8073個(gè)),分屬60個(gè)...

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 聯(lián)苯與多氯聯(lián)苯概況
        1.1.1 多氯聯(lián)苯概述
        1.1.2 PCBs的危害
        1.1.3 PCBs治理方法
        1.1.4 PCBs檢測方法
    1.2 紅樹林系統(tǒng)概述
        1.2.1 紅樹林研究進(jìn)展
        1.2.2 湛江紅樹林概況
        1.2.3 湛江紅樹林生態(tài)系統(tǒng)
    1.3 研究目的與意義
2 湛江紅樹林底泥微生物組學(xué)研究
    2.1 材料與方法
        2.1.1 儀器
        2.1.2 試劑
        2.1.3 紅樹林底泥理化因子測定
        2.1.4 紅樹林底泥細(xì)菌基因組DNA提取
        2.1.5 PCR擴(kuò)增
        2.1.6 Miseq文庫構(gòu)建
        2.1.7 測序及數(shù)據(jù)分析
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 底泥樣品理化指標(biāo)
        2.2.2 生物信息學(xué)分析
    2.3 討論
        2.3.1 紅樹林底泥理化指標(biāo)隨潮帶環(huán)境變化
        2.3.2 紅樹林底泥微生物結(jié)構(gòu)與酸堿度有關(guān)
    2.4 小結(jié)
3 多氯聯(lián)苯降解菌的分離鑒定
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗(yàn)所用培養(yǎng)基
        3.1.2 儀器
        3.1.3 試劑
        3.1.4 PCBs降解菌的富集與篩選
        3.1.5 菌種保存
        3.1.6 菌種鑒定
        3.1.7 PCR擴(kuò)增
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 PCBs降解菌的傳代與分離
        3.2.2 PCBs降解菌的鑒定
        3.2.3 PCR結(jié)果
    3.3 討論
        3.3.1 PCBs降解菌的分離鑒定
        3.3.2 降解菌與特異性引物的關(guān)系
    3.4 小結(jié)
4 多氯聯(lián)苯微生物降解體系的驗(yàn)證
    4.1 材料與方法
        4.1.1 試劑
        4.1.2 休眠細(xì)胞的制備
        4.1.3 4-氯聯(lián)苯的出峰時(shí)間的確定
        4.1.4 4-氯聯(lián)苯降解驗(yàn)證體系
        4.1.5 PCBs定量檢測
        4.1.6 GC-MS條件
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 PCBs3標(biāo)準(zhǔn)圖
        4.2.2 不同濃度菌株的降解效果
        4.2.3 不同時(shí)期PCBs殘留率
    4.3 討論
    4.4 小結(jié)
5 結(jié)論
附錄
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介
導(dǎo)師簡介



本文編號：3783639