2株真菌中新穎次級代謝產(chǎn)物的發(fā)現(xiàn)
發(fā)布時間:2023-03-27 03:34
真菌作為生物界的一大生物類群,其次級代謝產(chǎn)物豐富多樣,是醫(yī)藥領(lǐng)域和農(nóng)業(yè)領(lǐng)域研發(fā)的重要資源庫。真菌來源多樣,如土壤、水、植物、動物等。嗜糞真菌(Coprophilous fungi)是一類與動物共生的微生物群落,其通過吸收動物糞便中豐富的營養(yǎng)來維持自身的生長。作為一種生長在特殊生境中的真菌,其次級代謝產(chǎn)物必定與其它真菌類群存在顯著差異。為了探究該類真菌的生物學(xué)和生態(tài)學(xué)功能,我們對一株來源于蝙蝠糞便的真菌Amphichorda guana LC5815進(jìn)行了化學(xué)研究,以期發(fā)現(xiàn)結(jié)構(gòu)新穎、生物活性顯著的次級代謝產(chǎn)物。應(yīng)用硅膠和凝膠柱層析、高壓制備色譜等分離技術(shù)分離Amphichorda guana LC5815固體發(fā)酵物中的次級代謝產(chǎn)物,用核磁共振譜、質(zhì)譜、紫外和紅外等光譜技術(shù)對得到的化合物進(jìn)行鑒定,從中分離鑒定了5個化合物:oxirapentyns L-N(1-3),oxirapentyn B(4)and iso-isariin B(5),其中化合物1-3為新化合物。隨著研究對象的逐漸減少,通過傳統(tǒng)的研究方法發(fā)現(xiàn)結(jié)構(gòu)新穎的化合物變得越來越困難,且費(fèi)時費(fèi)力,因此急需尋找新的策略以提高發(fā)現(xiàn)新化合...
【文章頁數(shù)】:77 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
1 緒論
1.1 真菌次級代謝產(chǎn)物的重要性及研究進(jìn)展
1.2 真菌新穎次級代謝產(chǎn)物的挖掘策略及研究進(jìn)展
1.2.1 培養(yǎng)條件優(yōu)化
1.2.2 對菌株進(jìn)行遺傳操作
1.2.3 共培養(yǎng)
1.2.4 特殊環(huán)境真菌中新穎次級代謝產(chǎn)物的挖掘
1.3 嗜糞真菌Amphichorda guana LC5815 的研究進(jìn)展
1.4 炭團(tuán)木霉Trichoderma hypoxylon的研究進(jìn)展
1.5 研究目的與意義
2 嗜糞真菌Amphichorda guana LC5815 化學(xué)成分研究
2.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法
2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.2 菌株發(fā)酵
2.1.3 提取與分離
2.2 結(jié)果與分析
2.2.1 提取與分離
2.2.2 化合物結(jié)構(gòu)解析
2.3 小結(jié)
3 炭團(tuán)木霉缺失菌株TYHL33 的構(gòu)建
3.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法
3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.2 菌株的培養(yǎng)及保存
3.1.3 炭團(tuán)木霉的DNA提取
3.1.4 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備、轉(zhuǎn)化及質(zhì)粒提取
3.1.5 炭團(tuán)木霉的原生質(zhì)體制備
3.1.6 炭團(tuán)木霉的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化
3.1.7 構(gòu)建載體
3.1.8 次級代謝產(chǎn)物定量分析
3.2 結(jié)果分析
3.2.1 thtri5和tdaA的預(yù)測
3.2.2 構(gòu)建Δthtri5 炭團(tuán)木霉缺失菌株
3.2.3 構(gòu)建Δthtri5ΔtdaA炭團(tuán)木霉缺失菌株
3.2.4 TYHL26和TYHL33 次級代謝產(chǎn)物的變化
3.3 小結(jié)
4 炭團(tuán)木霉突變株TYHL33 的次級代謝產(chǎn)物分離
4.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法
4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.1.2 菌株發(fā)酵
4.1.3 提取與分離
4.2 結(jié)果分析
4.2.1 提取與分離
4.2.2 結(jié)構(gòu)鑒定
4.3 小結(jié)
5 論文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀學(xué)位期間的學(xué)術(shù)論文與研究成果
致謝
本文編號:3772304
【文章頁數(shù)】:77 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
1 緒論
1.1 真菌次級代謝產(chǎn)物的重要性及研究進(jìn)展
1.2 真菌新穎次級代謝產(chǎn)物的挖掘策略及研究進(jìn)展
1.2.1 培養(yǎng)條件優(yōu)化
1.2.2 對菌株進(jìn)行遺傳操作
1.2.3 共培養(yǎng)
1.2.4 特殊環(huán)境真菌中新穎次級代謝產(chǎn)物的挖掘
1.3 嗜糞真菌Amphichorda guana LC5815 的研究進(jìn)展
1.4 炭團(tuán)木霉Trichoderma hypoxylon的研究進(jìn)展
1.5 研究目的與意義
2 嗜糞真菌Amphichorda guana LC5815 化學(xué)成分研究
2.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法
2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.2 菌株發(fā)酵
2.1.3 提取與分離
2.2 結(jié)果與分析
2.2.1 提取與分離
2.2.2 化合物結(jié)構(gòu)解析
2.3 小結(jié)
3 炭團(tuán)木霉缺失菌株TYHL33 的構(gòu)建
3.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法
3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.2 菌株的培養(yǎng)及保存
3.1.3 炭團(tuán)木霉的DNA提取
3.1.4 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備、轉(zhuǎn)化及質(zhì)粒提取
3.1.5 炭團(tuán)木霉的原生質(zhì)體制備
3.1.6 炭團(tuán)木霉的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化
3.1.7 構(gòu)建載體
3.1.8 次級代謝產(chǎn)物定量分析
3.2 結(jié)果分析
3.2.1 thtri5和tdaA的預(yù)測
3.2.2 構(gòu)建Δthtri5 炭團(tuán)木霉缺失菌株
3.2.3 構(gòu)建Δthtri5ΔtdaA炭團(tuán)木霉缺失菌株
3.2.4 TYHL26和TYHL33 次級代謝產(chǎn)物的變化
3.3 小結(jié)
4 炭團(tuán)木霉突變株TYHL33 的次級代謝產(chǎn)物分離
4.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法
4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.1.2 菌株發(fā)酵
4.1.3 提取與分離
4.2 結(jié)果分析
4.2.1 提取與分離
4.2.2 結(jié)構(gòu)鑒定
4.3 小結(jié)
5 論文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀學(xué)位期間的學(xué)術(shù)論文與研究成果
致謝
本文編號:3772304
本文鏈接:http://sikaile.net/projectlw/swxlw/3772304.html
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