白蟻(蜚蠊目,昆蟲綱)是一種社會性昆蟲,主要食木頭、凋落物或腐殖質,這些食物富含木質纖維素且含氮量少,白蟻腸道微生物在木質纖維素降解和生物固氮中起著重要作用。培菌白蟻是一類特殊的白蟻,專一性培育雞樅菌。培菌白蟻和菌圃真菌易受多種真菌侵染,但在健康的白蟻蟻巢中,菌圃上只生長雞樅菌,白蟻或其共生菌存在一定的機制來抵制致病菌,其中放線菌作為天然產物主要產生者,可能起著關鍵的作用。為探究培菌白蟻腸道微生物的固氮和防御作用,我們以黃翅大白蟻Macrotermesbarney 為研究材料,對其腸道固氮微生物和放線菌展開了研究。首先,以M.barneyi工蟻腸道為樣品,在不含氮源的培養(yǎng)基篩選微生物,通過16S rRNA序列比對鑒定菌種。我們從無氮培養(yǎng)基上分離到8株菌,它們屬于沙雷氏菌屬、芽孢桿菌屬、腸桿菌屬、克雷伯氏菌屬、沙門氏菌屬和Kosakonia屬,部分菌株報道有固氮活性或固氮基因。除芽孢桿菌屬于厚壁菌門外,其他菌株都屬于變形菌門。這一研究為了解培菌白蟻的固氮機制提供了菌種材料。然后,以M.barneyi工蟻前、中腸為樣品,在高氏一號培養(yǎng)基上分離得到13株放線菌。通過形態(tài)觀察和分子生物學鑒定,...

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略語
第一章 前言
    1.1 白蟻及其腸道微生物
        1.1.1 白蟻腸道微生物對木質纖維素的降解作用
        1.1.2 白蟻腸道微生物的固氮作用
        1.1.3 白蟻腸道微生物的防御作用
        1.1.4 白蟻腸道微生物的其他作用
    1.2 培菌昆蟲概述
        1.2.1 培菌螞蟻
        1.2.2 培菌甲蟲
        1.2.3 培菌白蟻
    1.3 培菌昆蟲相關放線菌天然產物研究
        1.3.1 多肽類化合物
        1.3.2 醌酮類化合物
        1.3.3 多烯類化合物
        1.3.4 生物堿類化合物
        1.3.5 其他類化合物
    1.4 本文的立題依據和研究內容
        1.4.1 立題依據
        1.4.2 研究內容
第二章 黃翅大白蟻腸道固氮微生物的分離與鑒定
    2.1 背景
    2.2 實驗材料
        2.2.1 實驗試劑
        2.2.2 實驗儀器
    2.3 實驗方法
        2.3.1 白蟻的解剖
        2.3.2 微生物的分離
        2.3.3 微生物的鑒定
        2.3.4 微生物的生理生化性質分析
    2.4 實驗結果
        2.4.1 菌株的分離與鑒定
        2.4.2 菌株的生理生化性質
    2.5 小結和討論
第三章 黃翅大白蟻腸道放線菌的分離
    3.1 背景
    3.2 實驗材料
        3.2.1 實驗試劑
        3.2.2 實驗儀器
    3.3 實驗方法
        3.3.1 白蟻的解剖
        3.3.2 放線菌的分離
        3.3.3 放線菌的鑒定
        3.3.4 放線菌抑菌活性的測定
    3.4 實驗結果
        3.4.1 放線菌的分離與鑒定
        3.4.2 放線菌培養(yǎng)上清的抑菌活性
        3.4.3 放線菌粗提物的抑菌活性
    3.5 小結和討論
第四章 菌株WM-3抗菌活性的研究
    4.1 背景
    4.2 實驗材料
    4.3 實驗方法
        4.3.1 菌株WM-3菌落形態(tài)觀察
        4.3.2 菌株WM-3系統(tǒng)發(fā)育分析
        4.3.3 菌株WM-3基因組的提取和測序
        4.3.4 菌株WM-3活性物質提取條件的優(yōu)化
        4.3.5 菌株WM-3粗體物抑菌譜的測定
        4.3.6 菌株WM-3活性物質的純化
    4.4 實驗結果
        4.4.1 菌株WM-3的菌落形態(tài)特征
        4.4.2 菌株WM-3系統(tǒng)發(fā)育樹
        4.4.3 菌株WM-3全基因組注釋
        4.4.4 菌株WM-3次級代謝產物基因簇
        4.4.5 菌株WM-3活性物質的提取
        4.4.6 菌株WM-3粗體物的抑菌譜
        4.4.7 菌株WM-3活性物質的純化
    4.5 小結和討論
第五章 菌株WF-5抗菌活性的研究
    5.1 背景
    5.2 實驗材料
    5.3 實驗方法
        5.3.1 菌株WF-5的菌落形態(tài)觀察
        5.3.2 菌株WF-5的系統(tǒng)發(fā)育分析
        5.3.3 菌株WF-5基因組的提取和測序
        5.3.4 菌株WF-5培養(yǎng)基優(yōu)化
        5.3.5 菌株WF-5的抗真菌活性檢測
    5.4 實驗結果
        5.4.1 菌株WF-5的菌落形態(tài)特征
        5.4.2 菌株WF-5系統(tǒng)發(fā)育樹
        5.4.3 菌株WF-5全基因組注釋
        5.4.4 菌株WF-5次級代謝產物基因簇
        5.4.5 菌株WF-5培養(yǎng)基優(yōu)化
        5.4.6 菌株WF-5的抗真菌活性
    5.5 小結和討論
第六章 總結與展望
附錄
    附錄一 所用試劑和儀器設備
    附錄二 固氮微生物16S rRNA序列
    附錄三 放線菌16S rRNA序列
參考文獻
致謝
攻讀碩士期間參與發(fā)表的論文
學位論文評閱及答辯情況表



本文編號：3766940