用MEM培養(yǎng)基對(duì)CEF細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),采用RNA提取試劑盒提取CEF細(xì)胞總RNA,通過(guò)RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增編碼ATP合成酶β亞基的ATP5B基因片段,將其克隆至pMD18-T載體上,轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α感受態(tài)細(xì)胞,PCR技術(shù)鑒定重組載體后,測(cè)定ATP5B基因的核苷酸序列.結(jié)果表明,CEF細(xì)胞ATP5B基因長(zhǎng)度為1401 bp,編碼466氨基酸殘基的多肽,與在GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中已報(bào)道不同鳥(niǎo)類(lèi)ATP5B基因序列的同源性在86.91%～99.64%之間.克隆的CEF細(xì)胞ATP5B基因,為進(jìn)一步開(kāi)展ATP5B基因的表達(dá)、純化及其致病機(jī)理研究奠定了基礎(chǔ).

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本文編號(hào)：3765036