內(nèi)蒙古查干諾爾鹽堿湖可培養(yǎng)嗜鹽古菌多樣性及氨肽酶研究
發(fā)布時(shí)間:2023-03-19 04:33
我國鹽湖資源豐富,蘊(yùn)藏著大量的嗜鹽古菌。內(nèi)蒙古高原得益于獨(dú)特的氣候,鹽湖數(shù)目居全國首位,其中包含眾多的鹽堿湖。本文主要研究內(nèi)蒙古查干諾爾鹽堿湖可培養(yǎng)嗜鹽古菌多樣性,發(fā)掘新的嗜鹽古菌資源,采用多相分類學(xué)方法確定分類學(xué)地位;從嗜鹽古菌基因組中篩選出氨肽酶基因,進(jìn)一步開展嗜鹽古菌氨肽酶的異源表達(dá)和酶學(xué)性質(zhì)研究,希望為食品加工用酶制劑的開發(fā)和利用提供科學(xué)依據(jù)。從內(nèi)蒙古查干諾爾鹽堿湖土壤中分離到89株嗜鹽古菌;16S rRNA基因的系統(tǒng)發(fā)育分析表明,這些菌株分屬于Natronococcus、Natronorubrum、Halovivax、Halovarius、Halalkalicoccus、CGA53、CGA73和CG73等8個(gè)屬的15個(gè)分類單元,其中包含3個(gè)潛在的新的屬級(jí)分類單元和8個(gè)潛在的新的種級(jí)分類單元,優(yōu)勢(shì)類群為Halalkalicoccus tibetensis。基于16S rRNA基因、rpoB′基因以及直系同源基因的系統(tǒng)發(fā)育、表型特征、細(xì)胞化學(xué)組分、基因組分析結(jié)果表明,菌株CGA30代表Halovivax屬的一個(gè)新種(Halovivax salinus sp.nov.),菌株C...
【文章頁數(shù)】:94 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
1.1 嗜鹽古菌
1.1.1 嗜鹽古菌的發(fā)現(xiàn)
1.1.2 嗜鹽古菌特征
1.1.3 嗜鹽古菌應(yīng)用
1.2 內(nèi)蒙古地區(qū)鹽湖嗜鹽古菌資源
1.2.1 我國鹽湖分布
1.2.2 內(nèi)蒙古鹽湖分布
1.2.3 內(nèi)蒙古查干諾爾鹽堿湖
1.2.4 內(nèi)蒙古地區(qū)嗜鹽古菌資源開發(fā)
1.3 氨肽酶
1.3.1 氨肽酶定義
1.3.2 氨肽酶的來源與分類
1.3.3 正四面體十二聚體氨肽酶(TET)
1.3.4 氨肽酶在食品工業(yè)中的應(yīng)用
1.4 嗜鹽古菌氨肽酶
1.4.1 嗜鹽古菌酶
1.4.2 嗜鹽古菌氨肽酶研究進(jìn)展
1.5 立題依據(jù)與研究意義
1.6 主要研究內(nèi)容
第二章 查干諾爾鹽堿湖可培養(yǎng)嗜鹽古菌多樣性研究
2.1 材料與方法
2.1.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
2.1.2 樣品采集
2.1.3 鹽環(huán)境參數(shù)測(cè)定
2.1.4 菌株分離與培養(yǎng)
2.1.5 嗜鹽古菌鑒定
2.1.6 基于16S rRNA基因的系統(tǒng)發(fā)育分析
2.1.7 可培養(yǎng)嗜鹽古菌多樣性分析
2.2 結(jié)果與討論
2.2.1 查干諾爾鹽堿湖環(huán)境信息
2.2.2 查干諾爾鹽堿湖可培養(yǎng)嗜鹽古菌菌株
2.2.3 查干諾爾鹽堿湖可培養(yǎng)嗜鹽古菌16S rRNA基因及系統(tǒng)發(fā)育分析
2.2.4 查干諾爾鹽堿湖可培養(yǎng)嗜鹽古菌多樣性
2.3 本章小結(jié)
第三章 查干諾爾鹽堿湖嗜鹽古菌新類群多相分類學(xué)研究
3.1 材料與方法
3.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
3.1.2 培養(yǎng)基
3.1.3 基因型分析
3.1.4 嗜鹽古菌的表型特征分析
3.1.5 嗜鹽古菌極性脂組分鑒定
3.1.6 全基因組測(cè)序及分析
3.2 結(jié)果與討論
3.2.1 菌株CGA30的多相分類學(xué)研究
3.2.2 菌株CGA73的多相分類學(xué)研究
3.3 本章小結(jié)
第四章 嗜鹽古菌氨肽酶基因的異源表達(dá)與酶學(xué)性質(zhì)表征
4.1 材料與方法
4.1.1 菌株
4.1.2 質(zhì)粒
4.1.3 引物
4.1.4 主要儀器與設(shè)備
4.1.5 主要試劑和培養(yǎng)基
4.1.6 主要溶液的配制
4.1.7 嗜鹽古菌氨肽酶基因分析
4.1.8 構(gòu)建質(zhì)粒
4.1.9 嗜鹽古菌轉(zhuǎn)化
4.1.10 嗜鹽古菌氨肽酶的純化
4.1.11 SDS-PAGE驗(yàn)證
4.1.12 嗜鹽古菌氨肽酶質(zhì)譜檢測(cè)
4.1.13 嗜鹽古菌氨肽酶酶活測(cè)定及酶學(xué)性質(zhì)研究
4.1.14 數(shù)據(jù)分析
4.2 結(jié)果與討論
4.2.1 編碼嗜鹽古菌氨肽酶基因分析
4.2.2 嗜鹽古菌氨肽酶基因的異源表達(dá)、純化及質(zhì)譜檢測(cè)
4.2.3 酶學(xué)性質(zhì)研究
4.3 本章小結(jié)
第五章 主要結(jié)論和展望
5.1 主要結(jié)論
5.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及其他科研成果
本文編號(hào):3764564
【文章頁數(shù)】:94 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
1.1 嗜鹽古菌
1.1.1 嗜鹽古菌的發(fā)現(xiàn)
1.1.2 嗜鹽古菌特征
1.1.3 嗜鹽古菌應(yīng)用
1.2 內(nèi)蒙古地區(qū)鹽湖嗜鹽古菌資源
1.2.1 我國鹽湖分布
1.2.2 內(nèi)蒙古鹽湖分布
1.2.3 內(nèi)蒙古查干諾爾鹽堿湖
1.2.4 內(nèi)蒙古地區(qū)嗜鹽古菌資源開發(fā)
1.3 氨肽酶
1.3.1 氨肽酶定義
1.3.2 氨肽酶的來源與分類
1.3.3 正四面體十二聚體氨肽酶(TET)
1.3.4 氨肽酶在食品工業(yè)中的應(yīng)用
1.4 嗜鹽古菌氨肽酶
1.4.1 嗜鹽古菌酶
1.4.2 嗜鹽古菌氨肽酶研究進(jìn)展
1.5 立題依據(jù)與研究意義
1.6 主要研究內(nèi)容
第二章 查干諾爾鹽堿湖可培養(yǎng)嗜鹽古菌多樣性研究
2.1 材料與方法
2.1.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
2.1.2 樣品采集
2.1.3 鹽環(huán)境參數(shù)測(cè)定
2.1.4 菌株分離與培養(yǎng)
2.1.5 嗜鹽古菌鑒定
2.1.6 基于16S rRNA基因的系統(tǒng)發(fā)育分析
2.1.7 可培養(yǎng)嗜鹽古菌多樣性分析
2.2 結(jié)果與討論
2.2.1 查干諾爾鹽堿湖環(huán)境信息
2.2.2 查干諾爾鹽堿湖可培養(yǎng)嗜鹽古菌菌株
2.2.3 查干諾爾鹽堿湖可培養(yǎng)嗜鹽古菌16S rRNA基因及系統(tǒng)發(fā)育分析
2.2.4 查干諾爾鹽堿湖可培養(yǎng)嗜鹽古菌多樣性
2.3 本章小結(jié)
第三章 查干諾爾鹽堿湖嗜鹽古菌新類群多相分類學(xué)研究
3.1 材料與方法
3.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
3.1.2 培養(yǎng)基
3.1.3 基因型分析
3.1.4 嗜鹽古菌的表型特征分析
3.1.5 嗜鹽古菌極性脂組分鑒定
3.1.6 全基因組測(cè)序及分析
3.2 結(jié)果與討論
3.2.1 菌株CGA30的多相分類學(xué)研究
3.2.2 菌株CGA73的多相分類學(xué)研究
3.3 本章小結(jié)
第四章 嗜鹽古菌氨肽酶基因的異源表達(dá)與酶學(xué)性質(zhì)表征
4.1 材料與方法
4.1.1 菌株
4.1.2 質(zhì)粒
4.1.3 引物
4.1.4 主要儀器與設(shè)備
4.1.5 主要試劑和培養(yǎng)基
4.1.6 主要溶液的配制
4.1.7 嗜鹽古菌氨肽酶基因分析
4.1.8 構(gòu)建質(zhì)粒
4.1.9 嗜鹽古菌轉(zhuǎn)化
4.1.10 嗜鹽古菌氨肽酶的純化
4.1.11 SDS-PAGE驗(yàn)證
4.1.12 嗜鹽古菌氨肽酶質(zhì)譜檢測(cè)
4.1.13 嗜鹽古菌氨肽酶酶活測(cè)定及酶學(xué)性質(zhì)研究
4.1.14 數(shù)據(jù)分析
4.2 結(jié)果與討論
4.2.1 編碼嗜鹽古菌氨肽酶基因分析
4.2.2 嗜鹽古菌氨肽酶基因的異源表達(dá)、純化及質(zhì)譜檢測(cè)
4.2.3 酶學(xué)性質(zhì)研究
4.3 本章小結(jié)
第五章 主要結(jié)論和展望
5.1 主要結(jié)論
5.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及其他科研成果
本文編號(hào):3764564
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