熒光生物傳感器陣列在臨床疾病診斷和治療、基因分析、環(huán)境監(jiān)測等方面有較好的應(yīng)用潛能,它能夠經(jīng)濟、快速、靈敏、特異性地檢測生物分子。大部分核酸分子之間的相似度較高,區(qū)分困難,是分析化學(xué)需要解決的重要問題;另外,一些熒光傳感器陣列的構(gòu)建過程比較復(fù)雜,耗費大量的人力和物力。針對這些問題,本論文構(gòu)建了三種DNA熒光傳感器陣列,運用無酶的熵驅(qū)動放大反應(yīng),實現(xiàn)了多類核酸類似物的有效區(qū)分,且該方法具有通用性強、靈敏度高等特點。在這些傳感器陣列中,我們考察了雜交鏈式反應(yīng)的交叉性,實現(xiàn)了DNA、RNA以及基因表達譜等的區(qū)分和識別。其研究內(nèi)容如下:(1)DNA熒光傳感器陣列在耐藥基因中的應(yīng)用:本章設(shè)計了一種基于交叉反應(yīng)的DNA傳感器陣列,利用雜交鏈式反應(yīng)和熵驅(qū)動信號放大反應(yīng),用于6種乙肝病毒耐藥基因的區(qū)分。該DNA傳感器陣列具有較高的靈敏度,對耐藥基因的響應(yīng)范圍為1 nM-20 nM。通過凝膠電泳和熒光檢測,我們驗證了該傳感器陣列具有豐富的交叉反應(yīng)性,并驗證了雜交鏈式反應(yīng)和熵驅(qū)動信號放大聯(lián)用的可行性。經(jīng)過對傳感器陣列的優(yōu)選,該DNA傳感器陣列可以減少至由4組傳感元件組成,但仍可以區(qū)分6種靶DNA,表明了該傳...

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 緒論
    1.1 熒光分析技術(shù)
        1.1.1 熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)
        1.1.2 熒光生物傳感器
    1.2 雜交鏈式反應(yīng)(HCR)
        1.2.1 雜交鏈式反應(yīng)(HCR)的原理
        1.2.2 雜交鏈式反應(yīng)(HCR)的應(yīng)用
        1.2.3 雜交鏈式反應(yīng)(HCR)的發(fā)展前景
    1.3 鏈置換技術(shù)
        1.3.1 鏈置換技術(shù)的機理
        1.3.2 鏈置換技術(shù)的應(yīng)用
    1.4 傳感器陣列
        1.4.1 光學(xué)傳感器陣列
    1.5 選題思路及研究內(nèi)容
第2章 DNA熒光傳感器陣列在耐藥基因中的應(yīng)用
    2.1 前言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 儀器與試劑
        2.2.2 熒光檢測
        2.2.3 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳
    2.3 結(jié)論與討論
        2.3.1 基于交叉反應(yīng)的DNA傳感器陣列
        2.3.2 傳感器陣列的優(yōu)選
        2.3.3 傳感器陣列對兩種不同比率靶DNA混合液的區(qū)分和識別
        2.3.4 傳感器陣列對不同濃度YMDD的區(qū)分和識別
        2.3.5 復(fù)雜體系中靶DNA的區(qū)分和識別
    2.4 小結(jié)
第3章 DNA熒光傳感器陣列在RNA中的應(yīng)用
    3.1 前言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 儀器與試劑
        3.2.2 熒光檢測
        3.2.3 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳
    3.3 結(jié)論與討論
        3.3.1 基于交叉反應(yīng)的DNA傳感器陣列
        3.3.2 傳感器陣列對兩種不同比率靶RNA混合液的區(qū)分和識別
        3.3.3 傳感器陣列對不同濃度Let-7c的區(qū)分和識別
        3.3.4 復(fù)雜體系中靶RNA的區(qū)分
        3.3.5 靶RNA基因表達譜的區(qū)分和識別
    3.4 小結(jié)
第4章 基于協(xié)同雜交的多維熒光傳感器陣列的應(yīng)用
    4.1 前言
    4.2 實驗部分
        4.2.1 儀器與試劑
        4.2.2 熒光檢測
        4.2.3 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳
    4.3 結(jié)論與討論
        4.3.1 基于交叉反應(yīng)的DNA傳感器陣列
        4.3.2 雜交鏈式反應(yīng)的正交性
    4.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
致謝
個人簡歷及在校期間發(fā)表的論文



本文編號：3753106