KUP/HAK/KT鉀轉(zhuǎn)運(yùn)體基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控是植物響應(yīng)低鉀脅迫的一項(xiàng)重要機(jī)制�？寺『头治雒藁ㄢ涋D(zhuǎn)運(yùn)體基因的啟動(dòng)子,不僅有助于了解其表達(dá)模式及調(diào)控機(jī)制,對(duì)于改良棉花的鉀吸收特性也具有重要意義。陸地棉鉀轉(zhuǎn)運(yùn)體基因GhHAK5是一個(gè)在根中特異性高表達(dá)的基因,其表達(dá)受低鉀脅迫誘導(dǎo),目前關(guān)于該基因啟動(dòng)子的功能還不清楚。本研究以陸地棉品種百棉1號(hào)為材料,通過(guò)PCR方法對(duì)GhHAK5上游2000bp啟動(dòng)子片段(pGhHAK5)進(jìn)行克隆,并通過(guò)轉(zhuǎn)化擬南芥、GUS組織定位和低鉀誘導(dǎo)表達(dá)特性分析來(lái)研究其功能。結(jié)果表明, pGhHAK5除具有TATA-box和CAAT-box等基本順式作用元件外,還含有多個(gè)響應(yīng)于光、逆境脅迫、植物激素和生物鐘等的順式作用元件。pGhHAK5與雷蒙德氏棉pGrHAK5在重要調(diào)控元件的數(shù)量和位置分布上具有較高的一致性,均具有5個(gè)參與根特異性表達(dá)調(diào)控的元件(ATAAAAT)和1個(gè)參與低鉀條件下轉(zhuǎn)錄調(diào)控的ARF轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)(TGTCNN)。GUS組織化學(xué)染色結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)基因擬南芥幼苗的葉脈和胚軸維管束組織染色較深,根系染色較淺;成熟期轉(zhuǎn)基因擬南芥植株的根、葉脈和花萼維管束組織染色...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 供試材料與植株培養(yǎng)
    1.2 DNA的提取及pGhHAK5擴(kuò)增
    1.3 序列分析
    1.4 基因表達(dá)特性分析
    1.5 載體的構(gòu)建及農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化
    1.6 轉(zhuǎn)基因擬南芥植株的篩選和鑒定
    1.7 擬南芥幼苗的低鉀處理
    1.8 GUS組織化學(xué)染色
2 結(jié)果與分析
    2.1 GhHAK5基因啟動(dòng)子的克隆
    2.2 pGhHAK5順式作用元件預(yù)測(cè)與分析
    2.3 GhHAK5與其同源基因啟動(dòng)子序列的比較分析
    2.4 轉(zhuǎn)基因擬南芥陽(yáng)性植株的鑒定
    2.5 pGhHAK5的功能分析
    2.6 低鉀脅迫對(duì)轉(zhuǎn)pGhHAK5擬南芥幼苗GUS表達(dá)的影響
    2.7 GhHAK5基因的時(shí)空表達(dá)特性分析
3 討論
4 結(jié)論



本文編號(hào)：3752444