目的 :探討miR-150調(diào)控Notch3對人脂肪干細(xì)胞（hADSCs）成骨分化的影響。方法 :體外分離和培養(yǎng)hADSCs,將其分為空白對照組（NC組）、綠色熒光蛋白對照組（GFP組）和過表達(dá)miR-150組（miR-150組）。實時熒光定量PCR法檢測各組hADSCs miR-150的表達(dá),免疫印跡檢測hADSCs中成骨標(biāo)志物RUNX-2、Notch3的表達(dá)。構(gòu)建Notch3敲低的hADSCs組（Notch3-siR組）、GFP組和NC組,免疫印跡檢測3組hADSCs Notch3的表達(dá)。利用成骨細(xì)胞誘導(dǎo)液定向誘導(dǎo)各組hADSCs向成骨細(xì)胞分化,免疫印跡檢測各組hADSCs RUNX-2的表達(dá)。結(jié)果 :hADSCs成骨誘導(dǎo)14 d期間,miR-150表達(dá)逐漸下降。miR-150組的Notch3表達(dá)明顯低于GFP組和NC組。經(jīng)體外成骨誘導(dǎo)后,miR-150組RUNX-2蛋白表達(dá)水平低于GFP組和NC組。敲低Notch3后體外誘導(dǎo)hADSCs,Notch3-siR組RUNX-2蛋白的表達(dá)水平低于GFP組和NC組。結(jié)論 :miR-150通過下調(diào)Notch3表達(dá)抑制hADSCs成骨分化。 

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 主要試劑
    1.2 h ADSCs的分離和培養(yǎng)
    1.3 h ADSCs成骨分化過程中mi R-150的表達(dá)
    1.4 h ADSCs的感染與轉(zhuǎn)染
    1.5 Real-time PCR檢測mi R-150-5p的表達(dá)
    1.6 熒光素酶報告實驗分析mi R-150的下游靶基因
    1.7 h ADSCs的成骨誘導(dǎo)
    1.8 免疫印跡檢測Notch3和RUNX-2蛋白的表達(dá)
    1.9 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 h ADSCs成骨誘導(dǎo)過程中mi R-150的表達(dá)變化
    2.2 過表達(dá)mi R-150可抑制h ADSCs的成骨分化
    2.3 mi R-150靶向調(diào)控Notch3
    2.4 Notch3的下調(diào)減弱了h ADSCs的成骨分化
3討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]miR-150在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化中的作用及其可能的機制[J]. 郭偉壯,蘭濤,楊欣建,田長慶.  黑龍江醫(yī)學(xué). 2019(10)
[2]不同濃度細(xì)胞松弛素D對人脂肪源干細(xì)胞分化能力的影響[J]. 樊庭宇,曲戎梅,馮雁婷,彭彥,張仔昂,歐陽鈞,戴景興,鐘世鎮(zhèn).  中國臨床解剖學(xué)雜志. 2018(01)
[3]人脂肪源干細(xì)胞促進前交叉韌帶重建后腱骨界面愈合的實驗研究[J]. 陳平,曲戎梅,韓忠宇,楊宇超,尹玉琨,田京,張力.  中國臨床解剖學(xué)雜志. 2016(06)
[4]自體骨髓經(jīng)皮注射移植治療骨不連和骨延遲愈合的臨床應(yīng)用觀察[J]. 劉瑞祥,陳琪,涂江虹,梁海,歐陽陽鋼,婁楠,廖家成.  內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)雜志. 2015(04)

博士論文
[1]MicroRNAs調(diào)控人脂肪源性干細(xì)胞成骨分化及ODN影響其調(diào)控的研究[D]. 王敏.吉林大學(xué) 2010



本文編號：3717367