重組人2型松弛素對(duì)人支氣管上皮Bease-2B細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的抑制作用的時(shí)間相關(guān)性研究
發(fā)布時(shí)間:2022-09-28 18:16
目的:通過體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)探索重組人2型松弛素(RLN2)參與抑制轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)誘導(dǎo)支氣管上皮細(xì)胞Bease-2B細(xì)胞的上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)過程。方法:本研究選取Bease-2B細(xì)胞株作為模式細(xì)胞,體外培養(yǎng)。1)通過觀察細(xì)胞形態(tài)變化初步確定TGF-β1誘導(dǎo)濃度以及RLN2對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)的Bease-2B細(xì)胞EMT的有效干預(yù)濃度; 2) RLN2抑制TGF-β1誘導(dǎo)Bease-2B細(xì)胞EMT的時(shí)間:將細(xì)胞分別于TGF-β1誘導(dǎo)的同時(shí)和誘導(dǎo)24小時(shí)后加入RLN2培養(yǎng)24小時(shí),及在TGF-β1誘導(dǎo)24小時(shí)后加入RLN2組分別作用24小時(shí)和48小時(shí)后:(1)通過觀察細(xì)胞遷移能力推測RLN2不同作用時(shí)間對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)的細(xì)胞EMT抑制效果;(2)通過Western bloting法檢測各組間質(zhì)標(biāo)志ACTA2,上皮標(biāo)志E-Cadhrin表達(dá)情況分析抑制效果與作用時(shí)間的關(guān)系。結(jié)果:1)觀察細(xì)胞形態(tài)變化:與正常組比,10ng/mLTGF-β1誘導(dǎo)組Bease-2b細(xì)胞由鋪路石狀上皮形態(tài)逐漸變成梭形、針葉型,且細(xì)胞之間的間隙變大,胞間的連接變得松散;加不同濃度的RLN2抑制細(xì)胞...
【文章頁數(shù)】:3 頁
【文章目錄】:
1 材料
2 方法
2.1 Bease-2B細(xì)胞的常規(guī)培養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)前處理
2.2 Bease-2B細(xì)胞的向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化
2.3 顯微鏡觀察不同濃度RLN2對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)細(xì)胞轉(zhuǎn)化的影響
2.4 RLN2作用時(shí)間對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)細(xì)胞遷移能力的影響
2.5 Western blotting法檢測Bease-2B細(xì)胞在經(jīng)過TGF-β1和RLN2處理不同時(shí)間后E-Cad、ACTA2蛋白的表達(dá)情況
3 結(jié)果
3.1 RLN2作用時(shí)間對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)細(xì)胞遷移能力的影響
3.2 Western blotting法檢測Bease-2B細(xì)胞在經(jīng)過TGF-β1和RLN2處理不同時(shí)間后E-Cad、ACTA2蛋白的表達(dá)情況
4 討論
本文編號(hào):3682148
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1 材料
2 方法
2.1 Bease-2B細(xì)胞的常規(guī)培養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)前處理
2.2 Bease-2B細(xì)胞的向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化
2.3 顯微鏡觀察不同濃度RLN2對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)細(xì)胞轉(zhuǎn)化的影響
2.4 RLN2作用時(shí)間對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)細(xì)胞遷移能力的影響
2.5 Western blotting法檢測Bease-2B細(xì)胞在經(jīng)過TGF-β1和RLN2處理不同時(shí)間后E-Cad、ACTA2蛋白的表達(dá)情況
3 結(jié)果
3.1 RLN2作用時(shí)間對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)細(xì)胞遷移能力的影響
3.2 Western blotting法檢測Bease-2B細(xì)胞在經(jīng)過TGF-β1和RLN2處理不同時(shí)間后E-Cad、ACTA2蛋白的表達(dá)情況
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