細(xì)胞是生物體的基本組成單位。鑒于細(xì)胞在形態(tài)、組分等方面均有較大個體差異性,在單細(xì)胞層面對細(xì)胞中生物分子的傳感分析將有助于研究細(xì)胞層面的生命活動,如細(xì)胞的生長、分化、病變等。這些基于單細(xì)胞分析的研究結(jié)果對疾病的早期診斷和預(yù)防等均具有重要的指導(dǎo)意義。在過去50年中,對單個細(xì)胞中生物分子的檢測技術(shù)已取得了長足發(fā)展,主要有光學(xué)分析、電化學(xué)分析、質(zhì)譜檢測和微流控技術(shù)等。本論文第一部分將基于電化學(xué)分析法免標(biāo)記、檢測限低及簡便等優(yōu)勢,結(jié)合實驗室建立的“單細(xì)胞試劑盒”分析策略,實現(xiàn)了對單個細(xì)胞內(nèi)電化學(xué)難檢分子——磷酸鹽的檢測。由于電化學(xué)無法直接得到傳感過程的分子結(jié)構(gòu)信息,本論文第二部分結(jié)合微毛細(xì)管特性設(shè)計了一種電化學(xué)和質(zhì)譜在線聯(lián)用的方法,利用質(zhì)譜分析可以直接判定混合物組成的優(yōu)勢,獲取生物分子在不同環(huán)境下進(jìn)行氧化還原過程的分子結(jié)構(gòu),以探究化學(xué)反應(yīng)機(jī)理。本論文第三部分進(jìn)一步結(jié)合毛細(xì)管內(nèi)試劑盒反應(yīng)及質(zhì)譜分析方法,實現(xiàn)對細(xì)胞色素C蛋白結(jié)構(gòu)的解析,為單細(xì)胞蛋白組學(xué)的研究提供早期探索性數(shù)據(jù)。本文第一部分工作使用尖端開口～100nm毛細(xì)管,利用其扎入細(xì)胞過程中對細(xì)胞損傷小、毛細(xì)管內(nèi)可留存試劑盒成分的特性,將轉(zhuǎn)化磷酸... 

【文章來源】：南京大學(xué)江蘇省211工程院校985工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 單細(xì)胞分析
        1.1.1 單細(xì)胞分析的研究目的和意義
        1.1.2 單細(xì)胞內(nèi)磷酸鹽
        1.1.3 單細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)
        1.1.4 單細(xì)胞分析方法
        1.1.5 小結(jié)
    1.2 生物分子化學(xué)反應(yīng)機(jī)理的分析
        1.2.1 生物分子化學(xué)反應(yīng)分析的研究目的及其意義
        1.2.2 多巴胺(Dopamine)氧化反應(yīng)
        1.2.3 雙(二芳基亞甲基)型染料電轉(zhuǎn)化反應(yīng)
        1.2.4 化學(xué)反應(yīng)機(jī)理研究方法
        1.2.5 小結(jié)
    1.3 本論文的研究內(nèi)容及目的
    參考文獻(xiàn)
第二章 單個活細(xì)胞中磷酸鹽的電化學(xué)檢測
    2.1 前言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 試劑和儀器
        2.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.3 納米電極制備和表征
        2.2.4 電化學(xué)分析檢測
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 納米電極制備與表征
        2.3.2 磷酸鹽溶液檢測
        2.3.3 單個活細(xì)胞中磷酸鹽檢測
        2.3.4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第三章 電化學(xué)-質(zhì)譜聯(lián)用分析生物分子電化學(xué)反應(yīng)分子機(jī)理
    3.1 前言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 試劑和儀器
        3.2.2 管內(nèi)Pt電極的制備過程和表征方法
        3.2.3 電化學(xué)工作站和質(zhì)譜Nano-ESI在線聯(lián)用裝置
    3.3 結(jié)果和討論
        3.3.1 毛細(xì)管內(nèi)鉑電極表面的電化學(xué)表征
        3.3.2 毛細(xì)管內(nèi)電化學(xué)-質(zhì)譜分析多巴胺的電子轉(zhuǎn)移過程
        3.3.3 Pt電極應(yīng)用于電化學(xué)質(zhì)譜分析雙(二芳基亞甲基)型染料電轉(zhuǎn)化過程
        3.3.4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第四章 毛細(xì)管電噴霧質(zhì)譜法檢測蛋白
    4.1 前言
    4.2 實驗部分
        4.2.1 試劑和儀器
        4.2.2 離心管中Trypsin酶解細(xì)胞色素C實驗
        4.2.3 微毛細(xì)管中酶解蛋白實驗
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 離心管中Trypsin酶解細(xì)胞色素C實驗
        4.3.2 微毛細(xì)管中Trypsin酶解細(xì)胞色素C實驗
        4.3.3 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號：3642978