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植物乳桿菌CCFM8610緩解鎘暴露誘導腸道損傷的效果評價及機制探究

發(fā)布時間:2022-02-24 07:47
  鎘(Cadmium,Cd)是一種在環(huán)境中廣泛存在的重金屬,近年來工業(yè)化進展的不斷加速及污水農田灌溉技術的廣泛使用,鎘污染事件頻頻發(fā)生,嚴重危害了公共健康。過往研究表明,植物乳桿菌CCFM8610是一株對重金屬鎘具有良好的吸附能力的乳酸菌,可有效緩解機體內炎癥,預防日常鎘暴露。但現(xiàn)階段,關于植物乳桿菌CCFM8610緩解鎘暴露的研究主要集中在肝、腎方面。而腸道作為鎘吸收的直接器官,植物乳桿菌CCFM8610對腸道鎘暴露損傷的恢復效果及機制卻并未有靶向研究。因此,本課題通過體內外實驗,對植物乳桿菌CCFM8610恢復鎘暴露誘導腸道損傷的效果及其機制進行了探究。首先通過構建慢性鎘暴露動物模型,探究植物乳桿菌CCFM8610對慢性鎘暴露小鼠腸道損傷的恢復能力。結果表明植物乳桿菌CCFM8610能有效降低小鼠臟器內約20%的鎘蓄積,同時加快慢性鎘暴露小鼠排便速度,縮短鎘暴露小鼠排便時間近2小時,增強小鼠結腸肌條張力。檢測小鼠腸道中神經遞質,并對小鼠結腸c-kit蛋白進行免疫標記后發(fā)現(xiàn),植物乳桿菌CCFM8610顯著調節(jié)了鎘暴露紊亂的腸道神經遞質一氧化氮、5羥色胺、P物質、乙酰膽堿酯酶、血管活性腸... 

【文章來源】:江南大學江蘇省211工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:65 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
中英文縮略詞表
1 緒論
    1.1 重金屬鎘污染現(xiàn)狀及危害
        1.1.1 重金屬鎘及其污染現(xiàn)狀
        1.1.2 鎘的致毒性效應及致毒機理
    1.2 鎘對腸道造成的損傷
        1.2.1 鎘暴露損傷腸道屏障
        1.2.2 鎘暴露損傷腸道免疫
        1.2.3 鎘暴露破壞腸穩(wěn)態(tài)系統(tǒng)
    1.3 益生菌緩解有害化學物質誘導腸道損傷的潛力
        1.3.1 益生菌與重金屬吸附結合
        1.3.2 維護腸道屏障的能力
        1.3.3 調節(jié)免疫的能力
        1.3.4 調節(jié)腸道微生態(tài)功能
    1.4 腸道動力
    1.5 植物乳桿菌CCFM8610對鎘毒性的緩解作用
    1.6 立題意義
    1.7 主要研究內容
2 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 菌株
        2.1.2 實驗動物
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要設備
    2.2 實驗方法
        2.2.1 菌株的活化與培養(yǎng)
        2.2.2 灌胃菌株菌粉制作
        2.2.3 小鼠排出首粒黑便時間
        2.2.4 小鼠糞便含水量的測定
        2.2.5 小鼠肝臟、腎臟和血液中鎘含量
        2.2.6 小鼠結腸張力檢測
        2.2.7 小鼠結腸、空腸和血清中細胞因子測定
        2.2.8 小鼠血液生理生化指標檢測
        2.2.9 小鼠結腸c-Kit蛋白檢測
        2.2.10 小鼠糞便菌群組成的測定
        2.2.11 人結腸癌HT-29 細胞的培養(yǎng)
        2.2.12 細胞實驗設計
        2.2.13 鎘暴露細胞總蛋白提取
        2.2.14 鎘暴露細胞蛋白iTRAQ標記
        2.2.15 液相色譜質譜分析細胞鎘暴露蛋白
        2.2.16 細胞鎘暴露差異蛋白篩選
        2.2.17 轉錄水平RT-qPCR驗證
        2.2.18 數(shù)據處理及分析方法
3 結果與討論
    3.1 植物乳桿菌CCFM8610緩解鎘暴露誘導腸道損傷的效果評價
        3.1.1 植物乳桿菌CCFM8610對小鼠血液、腎臟、肝臟中的鎘含量的影響
        3.1.2 植物乳桿菌CCFM8610對小鼠慢性鎘暴露期間糞便含水量的影響
        3.1.3 植物乳桿菌CCFM8610對小鼠慢性鎘暴露后排出首粒黑便時間的影響
        3.1.4 植物乳桿菌CCFM8610對慢性鎘暴露小鼠腸道動力的影響
    3.2 植物乳桿菌CCFM8610緩解鎘暴露造成的小鼠腸道損傷途徑分析
        3.2.1 植物乳桿菌CCFM8610緩解鎘暴露損傷的腸道屏障
        3.2.2 植物乳桿菌CCFM8610緩解鎘暴露造成的腸道炎癥
        3.2.3 植物乳桿菌CCFM8610能緩解鎘暴露損傷的腸道菌群
    3.3 探尋植物乳桿菌CCFM8610緩解鎘暴露損傷的腸道的蛋白組學分析
        3.3.1 HT-29細胞自然狀態(tài)與鎘暴露狀態(tài)下差異蛋白篩選
        3.3.2 差異蛋白GO通路分析
        3.3.3 差異蛋白KEGG通路分析
        3.3.4 差異蛋白互作(PPI)分析
        3.3.5 基于細胞蛋白組學探尋植物乳桿菌CCFM8610緩解鎘暴露腸道損傷的機制
主要結論與展望
致謝
參考文獻
附錄: 作者在攻讀碩士學位期間發(fā)表的文章


【參考文獻】:
期刊論文
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本文編號:3642286

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