目的探索和建立一種純度高、操作簡單且重復性強的小鼠腦微血管內皮細胞原代培養(yǎng)方法。方法通過剪碎、過細胞篩網等物理方法,結合白蛋白密度梯度離心及化學酶消化法,并以嚴格控制1 g/LⅡ型膠原蛋白酶消化作用時間15～20 min為首要,從2～3周齡ICR小鼠腦組織中分離培養(yǎng)出小鼠腦微血管內皮細胞。通過細胞形態(tài)學觀察和免疫細胞化學染色檢測Ⅷ因子相關抗原鑒定所培養(yǎng)的細胞。結果接種24 h,貼壁的血管段周圍爬出多角形或短梭狀細胞,并逐漸擴散成團簇狀; 7 d后細胞融合,呈典型的單層、"鋪路石樣"鑲嵌式排列。Ⅷ因子相關抗原細胞免疫化學染色鑒定為陽性,胞質呈棕紅色,內皮細胞純度達95%以上。結論成功建立了一種操作簡單、重復性強、目的細胞純度高的小鼠腦微血管內皮細胞原代培養(yǎng)方法。 

【文章來源】：細胞與分子免疫學雜志. 2020,36(04)北大核心CSCD

【文章頁數】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 BMEC的原代培養(yǎng)
        1.2.2 BMEC的傳代培養(yǎng)
        1.2.3 免疫細胞化學染色檢測BMEC的Ⅷ因子相關抗原表達
2 結果
    2.1 形態(tài)學觀察
    2.2 分離培養(yǎng)的細胞表達Ⅷ因子相關抗原
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3641550