發(fā)布時間：2022-02-09 06:35

　　細胞衰老是由多種應激反應綜合導致的一個過程,這些應激反應將細胞引入到一種不可逆的生長停滯的狀態(tài)。線粒體內穩(wěn)態(tài)的平衡,是機體維持細胞正常運轉,應對各種損傷刺激和緩解細胞死亡必不可少的重要保障。當線粒體抗氧化防御系統(tǒng)、分裂融合、生物合成等發(fā)生異常時,會造成嚴重的線粒體功能障礙,導致細胞不可逆的生長停滯,導致神經退行性病、癌癥、心血管類疾病、糖尿病等衰老相關性疾病。Omi/HtrA2是一種絲氨酸蛋白酶,屬于HtrA家族,正常情況下位于線粒體膜間隙中,在維持線粒體內穩(wěn)態(tài)中起到重要作用。Omi/HtrA2是具有N末端線粒體靶向序列的核編碼蛋白。Omi/HtrA2含有一個或兩個C末端PDZ結構域,可激活其絲氨酸蛋白酶活性。Omi/HtrA2敲除鼠又名HtrA2^mnd2小鼠（-/-）,其中Omi/HtrA2的S276C發(fā)生錯義突變,導致Omi/HtrA2蛋白酶活性的喪失。小鼠表現(xiàn)出肌肉萎縮,神經變性。為了驗證各組織的線粒體功能、氧化應激等的變化差異,本實驗利用實時定量PCR檢測了HtrA2^mnd2小鼠（-/-）的腦、心臟、肝臟、腎臟4個組織線粒體功能相關基... 

【文章來源】：吉林大學吉林省211工程院校985工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

P62基因表達序列模式圖

第三章 結 果3.1 HtrA2mnd2小鼠形態(tài)學變化HtrA2mnd2小鼠（-/-）由 Omi/HtrA2 基因雜合子小鼠（+/-）交配繁殖而得，新生幼崽在 3 周左右進行基因型鑒定。根據(jù)酶切片段長度及數(shù)量，鑒定小鼠為野生型小鼠（+/+）（Wildtype）、Omi/HtrA2 基因雜合子小鼠（+/-）（Heterozygote）和 HtrA2mnd2小鼠（-/-）（Homozygote）。（圖 3.1）取 45 天齡的野生型小鼠（+/+）一同處死，留取腦、心臟、肝臟和腎臟組織，用于后續(xù)實驗。根據(jù)鑒定結果分離出 HtrA2mnd2小鼠（-/-）和野生型小鼠（+/+）分籠飼養(yǎng)。25天左右，HtrA2mnd2小鼠（-/-）逐漸表現(xiàn)出肌肉萎縮、彎腰駝背、共濟失調和靜止性震顫，步態(tài)不穩(wěn)等形態(tài)特征。HtrA2mnd2小鼠（-/-）生存期約為 45 天（圖 3.2）。

左右進行基因型鑒定。根據(jù)酶切片段長度及數(shù)量）（Wildtype）、Omi/HtrA2 基因雜合子小鼠（+/-）鼠（-/-）（Homozygote）。（圖 3.1）取 45 天齡的野腦、心臟、肝臟和腎臟組織，用于后續(xù)實驗。果分離出 HtrA2mnd2小鼠（-/-）和野生型小鼠（+/nd2小鼠（-/-）逐漸表現(xiàn)出肌肉萎縮、彎腰駝背、共等形態(tài)特征。HtrA2mnd2小鼠（-/-）生存期約為 45圖 3.1 瓊脂糖凝膠電泳顯像結果為野生型小鼠，（+/-）為雜合子小鼠，（-/-）HtrA


本文編號：3616532