豬圓環(huán)病毒2型（Porcine circovirus type 2,PCV2）是引起豬圓環(huán)病毒病（Porcine circovirus diseases,PCVDs）的病原,主要侵害感染豬的免疫細胞,導(dǎo)致嚴重的免疫抑制,使感染豬對其他病原的易感性增高,引起多種疾病的發(fā)生,嚴重危害生豬健康養(yǎng)殖和豬病防控。PCV2是目前發(fā)現(xiàn)的感染哺乳動物最小的DNA病毒,基因組由1766～1768個核苷酸組成,對病毒致病機理的闡明是防控疾病的基礎(chǔ),明確編碼蛋白在病毒致病中的作用是揭示其致病機理的重要方面。PCV2基因組結(jié)構(gòu)簡單,生物信息學軟件分析發(fā)現(xiàn)其基因組中存在11個潛在的開放讀碼框（Open reading frames,ORFs）,分別編碼病毒的結(jié)構(gòu)和非結(jié)構(gòu)蛋白,在病毒致病中發(fā)揮作用,目前發(fā)現(xiàn)的只有6個ORFs（ORF1～6）。對新的ORF發(fā)現(xiàn)和鑒定將為PCV2病原學增加新成員,明確其在病毒致病中的作用,將為PCV2致病機理的揭示提供新的科學資料。我們發(fā)現(xiàn)PCV2基因組中存在一個保守的ORF,包含在ORF2基因中,在基因組的1524-1033核苷酸處（492 nt）,理論上可編碼164個氨基酸,預(yù)測... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１４?０ＲＦ７蛋白表達的Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ檢測??Ｆｉｇ．２－１４?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ?ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?０ＲＦ７?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ??

?第三章豬圓環(huán)病毒２型０ＲＦ７蛋白對宿主細胞功能和病毒復(fù)制的影響???３?？?３結(jié)果??３．３．１?ＯＲＦ７蛋白對ＰＫ－１５細胞功能的影響??３．３．１．１?０ＲＦ７蛋白對ＰＫ－１５細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標志蛋白ＧＲＰ７８基因轉(zhuǎn)錄的影卩向??將?ｐＣＤＨ－ＣＭＶ－Ｆｌａｇ－０ＲＦ７?重組質(zhì)粒和?ｐＣＤＨ－ＣＭＶ－Ｆｌａｇ?質(zhì)粒轉(zhuǎn)染?ＰＫ－１５?細??胞后，通過ＲＴ－ｑＰＣＲ對ＰＫ－１５細胞中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標志蛋ｇ?ＧＲＰ７８?ｍＲＮＡ的表達??情況進行了檢測。結(jié)果如圖３－１所示，與轉(zhuǎn)染ｐＣＤＨ－ＣＭＶ－Ｆｌａｇ的ＰＫ－１５細胞組??相比較，轉(zhuǎn)染ｐＣＤＨ－ＣＭＶ－Ｆｌａｇ－０ＲＦ７質(zhì)粒的ＰＫ－１５細胞中，ＧＲＰ７８?ｍＲＮＡ在??１２ｈ、２４ｈ上調(diào)不顯著（Ｐ＞０．０５），３６ｈ和４８ｈ被極顯箸上調(diào)（Ｐ＜０．００１），??說明０ＲＦ７蛋白可能引起ＰＫ－１５細胞內(nèi)質(zhì)阿應(yīng)激反應(yīng)。??■?ＭＯＣＫ??ｐＣＤＨ－ＣＭＶ－Ｆｌａｇ??｜?２〇?＾?Ｂ?ｐＣＤＨ－ＣＭＶ－Ｆｌａｇ－ＯＲＦ７??ｋ?ａ??臣?１５－?，＊＊＊．?三??Ｏ?卜一Ｉ?三??＊５?自圍??１１０＇?ｎｓ?＾?＼?＼??１０?ａｔｐｉ?ｈ！?ｉ?ｉ［?ｉ??，；：＾?ｎｆ?魯?ｆ??Ｔｉｍｅ（ｈ）??圖３－１?ＯＲＦ７蛋白對ＰＫ－１５?ＧＲＰ７８基因轉(zhuǎn)錄的影響??Ｆｉｇ．３－１?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ＯＲＦ７?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｏｎ?ＧＲＰ７８?ｉｎ?ＰＫ－１５?ｃｅｌｌｓ??３．３．１．２?ＯＲＦ７蛋白對ＰＫ－１５細胞活性的影響??將?ｐＣＤＨ－ＣＭＶ－Ｆｌａｇ－ＯＲＦ７?重組質(zhì)粒和?ｐＣＤＨ－ＣＭＶ－Ｆｌａｇ?質(zhì)粒轉(zhuǎn)染?ＰＫ－１５?細??胞后

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【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]YWHAB蛋白與PCV2 ORF5的互作研究及其對病毒復(fù)制的影響[D]. 侯玉鳳.西北農(nóng)林科技大學 2019
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[3]豬圓環(huán)病毒2型ORF5蛋白誘導(dǎo)豬肺泡巨噬細胞自噬作用及對病毒復(fù)制的影響[D]. 李然.西北農(nóng)林科技大學 2018
[4]豬圓環(huán)病毒2型ORF3蛋白互作蛋白的鑒定[D]. 徐霄.浙江理工大學 2018



本文編號：3607697