蛋白質(zhì)通過(guò)分選途徑和翻譯后修飾實(shí)現(xiàn)特定的亞細(xì)胞定位,形成相互作用網(wǎng)絡(luò),是細(xì)胞區(qū)域化的重要組成部分。闡明蛋白質(zhì)組的亞細(xì)胞定位對(duì)于解析蛋白質(zhì)的功能和調(diào)控,描繪信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)絡(luò),理解細(xì)胞生理活動(dòng)機(jī)制具有重要意義。蛋白質(zhì)磷酸化是一種重要的蛋白質(zhì)翻譯后修飾,它幾乎在包括代謝、增殖、分化、遷移等在內(nèi)的所有細(xì)胞生理活動(dòng)中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。蛋白激酶是細(xì)胞中催化蛋白質(zhì)磷酸化反應(yīng)的生物酶。人類(lèi)基因組編碼538個(gè)蛋白激酶,約占整個(gè)基因組的1.7%。除了發(fā)揮重要的生理功能外,蛋白激酶的失調(diào)在人類(lèi)疾病,特別是癌癥中扮演著重要角色,是精準(zhǔn)治療的關(guān)鍵藥物靶點(diǎn)。盡管已經(jīng)有許多研究深入探索了特定蛋白激酶的亞細(xì)胞定位、功能、以及調(diào)控機(jī)制,但還沒(méi)有研究從激酶組水平上全面闡明蛋白激酶的亞細(xì)胞定位及其與功能的關(guān)系。本研究通過(guò)構(gòu)建人類(lèi)蛋白激酶組表達(dá)質(zhì)粒文庫(kù),在統(tǒng)一條件下通過(guò)免疫熒光染色檢測(cè)各個(gè)激酶的亞細(xì)胞定位情況,繪制了人類(lèi)蛋白激酶組亞細(xì)胞定位圖譜（Kinome Atlas,KA）。圖譜顯示,在獲得定位信息的蛋白激酶中,除了細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核的主要定位外,仍然有許多蛋白激酶定位在特定的細(xì)胞器,這一現(xiàn)象符合亞細(xì)胞定位在蛋白激酶功能和調(diào)控上發(fā)揮... 

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

蛋白激酶激酶結(jié)構(gòu)域示意圖[60]

浙江大學(xué)博士學(xué)位論文引言9激酶家族、TKL（tyrosinekinase-like）激酶家族、Atypical激酶家族、Other激酶家族和NDK激酶家族、PKL（proteinkinase-like）激酶家族、RGC(receptorguanylatecyclase)激酶家族。在各激酶家族之中，AGC激酶家族、CMGC激酶家族、TK激酶家族和Other激酶家族包含的成員數(shù)量較為龐大，而CK1激酶家族、NDK激酶家族、PKL激酶家族和RGC激酶家族所含的激酶成員數(shù)目較少。通過(guò)家族分類(lèi)，人們更容易推測(cè)蛋白激酶可能的調(diào)控方式、底物和參與的信號(hào)通路。圖1-2，人類(lèi)蛋白激酶組進(jìn)化樹(shù)[71]。

浙江大學(xué)博士學(xué)位論文引言20氨基酸，遠(yuǎn)短于MAK和MRK激酶結(jié)構(gòu)域之后的肽段，目前尚未在人類(lèi)蛋白質(zhì)組中發(fā)現(xiàn)該肽段的相似序列[209]。更重要的是，與MAK、MRK活化環(huán)上的保守序列TDY不同，MOK在活化環(huán)上的序列為T(mén)EY，這提示MOK很可能具有和MAK、MRK不同的生物學(xué)功能。圖1-3，人MOK、MAK和MRK蛋白的結(jié)構(gòu)示意圖。體外激酶活性實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，MOK可以磷酸化轉(zhuǎn)錄因子c-JUN、c-Myc、周期蛋白CyclinB1以及髓鞘堿性蛋白（MyelinBasicProtein，MBP）。同時(shí)，和MAPK激酶超家族的成員相似，MOK激酶活性的發(fā)揮依賴(lài)于TEY的保守序列，當(dāng)把TEY序列突變?yōu)锳EF后，MOK的激酶活性喪失[210,211]。當(dāng)使用PKC激酶家族的激活劑TPA（12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate）處理細(xì)胞時(shí)，MOK的激酶活性上升三倍左右。但相比于ERK1/2和p38MAPK的活化速度，MOK激酶活性的提升較慢。這表明TPA激活MOK和傳統(tǒng)MAPK激酶的過(guò)程可能不同，而MOK的上游激酶還不清楚。1.4.2MOK的表達(dá)和功能小鼠組織中的研究結(jié)果顯示，相比于心臟、腦、肝臟等組織，MOK在睪丸中具有很高的表達(dá)[205]。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，除睪丸外，雌性小鼠的卵巢組織中也存在MOK的高表達(dá)。通過(guò)原位雜交，研究人員發(fā)現(xiàn)MOK的轉(zhuǎn)錄本在粗線(xiàn)期精母細(xì)胞、圓形精細(xì)胞及雌性生殖細(xì)胞中高度富集，而在精原細(xì)胞和睪丸體細(xì)胞中卻檢測(cè)不到，這提示MOK很可能在生殖細(xì)胞的分化、成熟過(guò)程中發(fā)揮重要作用。此外，有研究稱(chēng)MOK的mRNA在小鼠的小腸隱窩室處富集，但MOK蛋白卻在隱窩上


本文編號(hào)：3606034