背景:現(xiàn)階段骨形態(tài)發(fā)生蛋白2和堿性成纖維生長(zhǎng)因子2對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞膜片增殖、成骨分化的影響和作用機(jī)制還尚未可知,如何將生長(zhǎng)因子與組織工程細(xì)胞膜片技術(shù)相整合,最終將其用于骨缺損修復(fù)具有重要意義。目的:探討單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用骨形態(tài)發(fā)生蛋白2和堿性成纖維生長(zhǎng)因子2對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞膜片增殖和成骨分化的影響。方法:體外分離培養(yǎng)鑒定SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞并構(gòu)建細(xì)胞膜片,選用不同質(zhì)量濃度的骨形態(tài)發(fā)生蛋白2和堿性成纖維生長(zhǎng)因子2單獨(dú)及聯(lián)合誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞膜片,CCK-8法結(jié)合堿性磷酸酶活性檢測(cè)確定2種因子促進(jìn)膜片增殖和成骨分化的最佳有效質(zhì)量濃度;然后對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞膜片進(jìn)行成骨誘導(dǎo),通過(guò)大體及顯微鏡觀察、Vonkossa染色、茜素紅染色、RT-PCR檢測(cè)相關(guān)成骨標(biāo)志物來(lái)評(píng)估誘導(dǎo)效果。結(jié)果與結(jié)論:單獨(dú)應(yīng)用骨形態(tài)發(fā)生蛋白2可增強(qiáng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞膜片的堿性磷酸酶活性,最佳質(zhì)量濃度為100μg/L（P <0.001）,單獨(dú)應(yīng)用堿性成纖維生長(zhǎng)因子2能加速骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞膜片的增殖,最佳質(zhì)量濃度為20μg/L（P <0.001）,而聯(lián)合應(yīng)用既可以促進(jìn)膜片增殖又能提高其堿性磷酸酶活性（P <... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)組織工程研究. 2020,24(01)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【部分圖文】：

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞流式鑒定圖

0.01，fP<0.001；B為BMP-2及FGF-2單獨(dú)與聯(lián)合作用后的細(xì)胞堿性磷酸酶活性，與對(duì)照組相比，aP<0.01，bP<0.001；與BMP-2組相比，cP<0.01，dP<0.001；與FGF-2組相比，eP<0.01，fP<0.001；BMP-2：骨形態(tài)發(fā)生蛋白2，F(xiàn)GF-2：堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子2圖3BMP-2及FGF-2對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞膜片堿性磷酸酶活性的影響Figure3Effectsofbonemorphogeneticprotein2andbasicfibroblastgrowthfactor2onalkalinephosphataseactivityofbonemarrowmesenchymalstemcellsheetABCD圖4骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞膜片經(jīng)骨形態(tài)發(fā)生蛋白2及堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子2成骨誘導(dǎo)后的形態(tài)變化(×50)Figure4Morphologicalchangesofbonemesenchymalstemcellsheetinducedbybonemorphogeneticprotein2andbasicfibroblastgrowthfactor2(×50)圖注：圖中A為聯(lián)合組；B為骨形態(tài)發(fā)生蛋白2組；C為堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子2組；D為對(duì)照組3d7d3d7d2.01.51.00.502.01.51.00.5050μg/LBMP-2組100μg/LBMP-2組200μg/LBMP-2組5μg/LFGF-2組10μg/LFGF-2組20μg/LFGF-2組空白組100μg/LBMP-2組20μg/LFGF-2組聯(lián)合組對(duì)照組acacbdbdacacacacbdebde吸光度值吸光度值A(chǔ)B7d14d21d對(duì)照組20μg/LFGF-2組100μg/LBMP-2組聯(lián)合組3.53.02.52.01.51.00.50吸光度值aabcbcbcaaaa圖注：與對(duì)照組相比，aP<0.01，bP<0.001；與FGF-2組和BMP-2組相比，cP<0.001；BMP-2：骨形態(tài)發(fā)生蛋白2，F(xiàn)GF-2：堿性成纖維細(xì)胞生

entificationofosteogenicdifferentiationofbonemarrowmesenchymalstemcellsheetinducedbybonemorphogeneticprotein2andbasicfibroblastgrowthfactor2(×50)對(duì)照組FGF-2組BMP-2組聯(lián)合組對(duì)照組FGF-2組BMP-2組聯(lián)合組對(duì)照組FGF-2組BMP-2組聯(lián)合組1.51.00.5054321020151050COL-1mRAN表達(dá)Runx2mRAN表達(dá)BMP-2mRAN表達(dá)P<0.001P<0.001P<0.001圖注：BMP-2：骨形態(tài)發(fā)生蛋白2，F(xiàn)GF-2：堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子2圖7RT-PCR檢測(cè)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)7d后成骨基因COL-1、Runx2/cbfa1、BMP-2的表達(dá)Figure7RT-PCRdetectionofexpressionofCOL-1,Runx2/cbfa1andBMP-2inbonemarrowmesenchymalstemcellsafter7daysofosteogenicinduction

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]聯(lián)合細(xì)胞膜片和自組裝多肽技術(shù)構(gòu)建一種新型BMSCs膜片-RADA16組織工程復(fù)合體的研究[J]. 李豆豆,周維維,王蕾,劉露,李春絨,劉思麟,曹猛.  實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2019(01)
[2]脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞膜片移植促進(jìn)創(chuàng)面愈合的可行性[J]. 陳梅紅,黨旖旎,朱旭東,李璇,彭磊,楊佳佳,張國(guó)新.  中國(guó)組織工程研究. 2019(05)
[3]BMP-2及FGF-2對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的影響[J]. 白燕,王士斌,陳愛(ài)政,肖唯,張然熙.  重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(12)
[4]高糖對(duì)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的影響[J]. 高海,陳瀟,管東華,張穎婕,林常綠.  口腔疾病防治. 2017(01)
[5]堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子在大鼠BMSCs向睪丸Leydig細(xì)胞分化中的作用研究[J]. 閆秀文,劉春,田翡.  中華男科學(xué)雜志. 2015(06)
[6]辛伐他汀對(duì)大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞成骨分化的影響[J]. 姚樹(shù)生,張柳,鄭杰.  第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2006(17)

碩士論文
[1]生長(zhǎng)因子FGF-2和VEGF對(duì)人牙周膜干細(xì)胞增殖、遷移、黏附及成骨分化能力的影響[D]. 張戎.第四軍醫(yī)大學(xué) 2013



本文編號(hào)：3601206