背景:現(xiàn)階段骨形態(tài)發(fā)生蛋白2和堿性成纖維生長因子2對骨髓間充質(zhì)干細胞膜片增殖、成骨分化的影響和作用機制還尚未可知,如何將生長因子與組織工程細胞膜片技術(shù)相整合,最終將其用于骨缺損修復(fù)具有重要意義。目的:探討單獨及聯(lián)合應(yīng)用骨形態(tài)發(fā)生蛋白2和堿性成纖維生長因子2對骨髓間充質(zhì)干細胞膜片增殖和成骨分化的影響。方法:體外分離培養(yǎng)鑒定SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞并構(gòu)建細胞膜片,選用不同質(zhì)量濃度的骨形態(tài)發(fā)生蛋白2和堿性成纖維生長因子2單獨及聯(lián)合誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞膜片,CCK-8法結(jié)合堿性磷酸酶活性檢測確定2種因子促進膜片增殖和成骨分化的最佳有效質(zhì)量濃度;然后對骨髓間充質(zhì)干細胞膜片進行成骨誘導(dǎo),通過大體及顯微鏡觀察、Vonkossa染色、茜素紅染色、RT-PCR檢測相關(guān)成骨標(biāo)志物來評估誘導(dǎo)效果。結(jié)果與結(jié)論:單獨應(yīng)用骨形態(tài)發(fā)生蛋白2可增強骨髓間充質(zhì)干細胞膜片的堿性磷酸酶活性,最佳質(zhì)量濃度為100μg/L（P <0.001）,單獨應(yīng)用堿性成纖維生長因子2能加速骨髓間充質(zhì)干細胞膜片的增殖,最佳質(zhì)量濃度為20μg/L（P <0.001）,而聯(lián)合應(yīng)用既可以促進膜片增殖又能提高其堿性磷酸酶活性（P <... 

【文章來源】：中國組織工程研究. 2020,24(01)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

骨髓間充質(zhì)干細胞流式鑒定圖

0.01，fP<0.001；B為BMP-2及FGF-2單獨與聯(lián)合作用后的細胞堿性磷酸酶活性，與對照組相比，aP<0.01，bP<0.001；與BMP-2組相比，cP<0.01，dP<0.001；與FGF-2組相比，eP<0.01，fP<0.001；BMP-2：骨形態(tài)發(fā)生蛋白2，F(xiàn)GF-2：堿性成纖維細胞生長因子2圖3BMP-2及FGF-2對骨髓間充質(zhì)干細胞膜片堿性磷酸酶活性的影響Figure3Effectsofbonemorphogeneticprotein2andbasicfibroblastgrowthfactor2onalkalinephosphataseactivityofbonemarrowmesenchymalstemcellsheetABCD圖4骨髓間充質(zhì)干細胞膜片經(jīng)骨形態(tài)發(fā)生蛋白2及堿性成纖維細胞生長因子2成骨誘導(dǎo)后的形態(tài)變化(×50)Figure4Morphologicalchangesofbonemesenchymalstemcellsheetinducedbybonemorphogeneticprotein2andbasicfibroblastgrowthfactor2(×50)圖注：圖中A為聯(lián)合組；B為骨形態(tài)發(fā)生蛋白2組；C為堿性成纖維細胞生長因子2組；D為對照組3d7d3d7d2.01.51.00.502.01.51.00.5050μg/LBMP-2組100μg/LBMP-2組200μg/LBMP-2組5μg/LFGF-2組10μg/LFGF-2組20μg/LFGF-2組空白組100μg/LBMP-2組20μg/LFGF-2組聯(lián)合組對照組acacbdbdacacacacbdebde吸光度值吸光度值A(chǔ)B7d14d21d對照組20μg/LFGF-2組100μg/LBMP-2組聯(lián)合組3.53.02.52.01.51.00.50吸光度值aabcbcbcaaaa圖注：與對照組相比，aP<0.01，bP<0.001；與FGF-2組和BMP-2組相比，cP<0.001；BMP-2：骨形態(tài)發(fā)生蛋白2，F(xiàn)GF-2：堿性成纖維細胞生

entificationofosteogenicdifferentiationofbonemarrowmesenchymalstemcellsheetinducedbybonemorphogeneticprotein2andbasicfibroblastgrowthfactor2(×50)對照組FGF-2組BMP-2組聯(lián)合組對照組FGF-2組BMP-2組聯(lián)合組對照組FGF-2組BMP-2組聯(lián)合組1.51.00.5054321020151050COL-1mRAN表達Runx2mRAN表達BMP-2mRAN表達P<0.001P<0.001P<0.001圖注：BMP-2：骨形態(tài)發(fā)生蛋白2，F(xiàn)GF-2：堿性成纖維細胞生長因子2圖7RT-PCR檢測骨髓間充質(zhì)干細胞成骨誘導(dǎo)7d后成骨基因COL-1、Runx2/cbfa1、BMP-2的表達Figure7RT-PCRdetectionofexpressionofCOL-1,Runx2/cbfa1andBMP-2inbonemarrowmesenchymalstemcellsafter7daysofosteogenicinduction

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]生長因子FGF-2和VEGF對人牙周膜干細胞增殖、遷移、黏附及成骨分化能力的影響[D]. 張戎.第四軍醫(yī)大學(xué) 2013



本文編號：3601206