溴氰菊酯（DM）被廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、公共衛(wèi)生和獸醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域,由于使用量大、范圍廣,導(dǎo)致了全球性的抗藥性,因此,深入研究DM的抗性機(jī)理具有非常重要的意義。有研究報(bào)道DM能引起昆蟲(chóng)細(xì)胞氧化應(yīng)激,而Nrf2-Keap1信號(hào)通路是細(xì)胞中重要的抗氧化通路,在預(yù)防外源性物質(zhì)損傷方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。Nrf2基因通過(guò)調(diào)節(jié)多種抗氧化和解毒酶的表達(dá)來(lái)調(diào)控抗氧化反應(yīng)和異生質(zhì)代謝,從而保護(hù)細(xì)胞免受包括內(nèi)源性物質(zhì)、活性氧（ROS）、輻射和環(huán)境毒素在內(nèi)的刺激導(dǎo)致的損傷。因此我們推斷轉(zhuǎn)錄因子Nrf2可能在DM應(yīng)激和耐受中發(fā)揮作用。為探究Nrf2通路與昆蟲(chóng)DM耐受性之間的關(guān)系,我們以果蠅Kc細(xì)胞為模式細(xì)胞,分析Nrf2對(duì)DM的應(yīng)激響應(yīng)及細(xì)胞DM耐受水平的影響,結(jié)果如下:1、DM刺激后細(xì)胞內(nèi)ROS含量迅速增加。應(yīng)激細(xì)胞中ROS的生成量與DM劑量和應(yīng)激時(shí)間相關(guān),在一定DM劑量?jī)?nèi)ROS量隨著劑量增加不斷增加并達(dá)到峰值;在同一劑量下,ROS量隨著應(yīng)激時(shí)間增加不斷增加并達(dá)到峰值。2、DM刺激可以使細(xì)胞中Nrf2基因的表達(dá)顯著上調(diào)并發(fā)生核聚集。qPCR檢測(cè)顯示,20 ppm DM誘導(dǎo)24 h時(shí),細(xì)胞中Nrf2基因的轉(zhuǎn)錄水平達(dá)到最大... 

【文章來(lái)源】：南京師范大學(xué)江蘇省 211工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

DM刺激下細(xì)胞中的氧化應(yīng)激水平

20圖 2.2 DM 刺激下細(xì)胞中 Nrf2 基因的表達(dá)水平A:時(shí)間梯度；B：濃度梯度；n=3, *代表 p < 0.05.Fig. 2.2 mRNAexpression of Nrf2 gene in cells stimulated by DMA: Time gradient; B: concentration gradient;n=3; (*) represents p < 0.05 compared with the control.

圖 2.3 DM 刺激下細(xì)胞中 Nrf2 蛋白的核質(zhì)分布情況A:時(shí)間梯度；B：濃度梯度Fig. 2.3 Distribution of Nrf2 protein in cells stimulated by DMA: Time gradient; B: concentration gradient3.3 DM 脅迫對(duì)細(xì)胞活性的影響為了探討 DM 處理對(duì)細(xì)胞活性的影響，且考慮到 Nrf2 在細(xì)胞凋亡中起用，運(yùn)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)了細(xì)胞凋亡率，用來(lái)表示細(xì)胞的存活狀況。如圖示，DM 的刺激會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞整體凋亡率顯著升高，但結(jié)果顯示隨著 Nrf2 增加，細(xì)胞凋亡率降低。在 20 ppm DM 處理 24 h 后細(xì)胞凋亡率(約 13%)他實(shí)驗(yàn)組要低。

【參考文獻(xiàn)】：
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