雙子葉植物種子在黑暗中萌發(fā)時,為了使植物快速穿破土壤見光并進(jìn)行光合作用,形成頂端彎鉤結(jié)構(gòu)來保護(hù)植物幼嫩分生組織不受損害。頂端彎鉤的形成受生長素、赤霉素和乙烯等激素以及光照等外界環(huán)境條件的復(fù)雜調(diào)控。研究表明乙烯應(yīng)答基因HOOKLESS1對頂端彎鉤的形成具有調(diào)控作用。此外,擬南芥HLS1基因還參與調(diào)控生長素的分布和糖響應(yīng)基因的表達(dá)以及植物免疫。本研究以擬南芥HLS1基因?yàn)檠芯繉ο?以HLS1突變體hls1-1和Salk₁36528c為材料,對HLS1基因進(jìn)行克隆和功能的研究。得出以下實(shí)驗(yàn)結(jié)果:（1）通過對不同環(huán)境的T2代轉(zhuǎn)基因植物進(jìn)行GUS組織化學(xué)染色,結(jié)果顯示HLS1主要在植物新生組織和器官中表達(dá)。通過擬南芥WT葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)對HLS1進(jìn)行亞細(xì)胞定位發(fā)現(xiàn)HLS1定位在細(xì)胞核和晚期內(nèi)體,推測HLS1與內(nèi)體參與的生物學(xué)途徑有關(guān)。系統(tǒng)進(jìn)化樹和蛋白序列比對分析發(fā)現(xiàn)HLS1的生物學(xué)功能具有較強(qiáng)保守型。（2）構(gòu)建二元表達(dá)載體,以HLS1基因突變體hls1-1和Salk₁36528c為遺傳背景,農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法過表達(dá)HLS1建立回復(fù)系。對回復(fù)系的研究發(fā)... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

(a)黑暗誘導(dǎo)葉片衰老

數(shù)據(jù)庫（https://www.ncbi.nlm.nih.gov/）下載得到擬南芥 HLS1one 數(shù)據(jù)庫下載到玉米等 13 個與 HLS1 同源性較高的物種蛋白構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹。S1 多序列比對 HLS1 與其它 13 個不同物種的氨基酸序列通過 Clustal Omeg各物種 HLS1 比較結(jié)果輸出，在 BoxShade 軟件中分析，黑色區(qū)，灰色區(qū)域?yàn)橄嗨频陌被嵝蛄�，根�?jù)黑色和灰色分布區(qū)域來中的保守性。芥 HLS1 突變體介紹與表型分析LS1 突變體 hls1-1 為 HLS1 基因的第三個外顯子上從 ATG 開始為 A，氨基酸由谷氨酸變?yōu)橘嚢彼�；Salk_136528c 突變體是由因的第三個外顯子上引起的突變（圖 2-1）。

T、hls1-1 和 Salk_136528c 頂端彎鉤表型分析，BarsAnalysis of the hook phenotypic in WT, hls1-1 and Salk_ 突變體在光照環(huán)境中的表型分析T、hls1-1 和 Salk_136528c，24 h 持續(xù)光照恒溫現(xiàn) 2 周大的 hls1-1、Salk_136528c 表現(xiàn)出葉片的表型（圖 2-3）。圖 2-3 WT、hls1-1 和 Salk_136528c 表型分析2-3 Phenotypic analysis of WT, hls1-1 and Salk_136528c 突變體在碳饑餓誘導(dǎo)衰老模型實(shí)驗(yàn)中表型分析

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]玉米暗形態(tài)建成突變體的篩選[J]. 張昊,汪海,朱莉,郎志宏.  中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào). 2017(01)



本文編號：3592610