植物根系在植物吸收水分、營養(yǎng)物質(zhì)以及物質(zhì)合成等方面發(fā)揮著關鍵作用。Rab8d作為質(zhì)體蛋白翻譯延伸因子,不僅調(diào)控葉綠體發(fā)育,而且參與調(diào)控植物耐熱性,以及調(diào)控花粉粒中質(zhì)體活性和植物葉片發(fā)育等過程。本研究還發(fā)現(xiàn)Rab8d在主根發(fā)育過程中也發(fā)揮關鍵作用。本研究通過對擬南芥突變體rab8d的主根表型進行觀察和分析,結合激素或化學藥物處理、轉(zhuǎn)錄組分析、遺傳學驗證等進一步探究了 Rab8d影響根發(fā)育的分子機理。主要研究結果如下:1.本研究篩選了三個Rab8d T-DNA插入突變體（rab8d-1、rab8d-2和rab8d-3）,系統(tǒng)地分析了 rab8d突變體的主根表型。研究發(fā)現(xiàn),主根長度與Rab8d的表達水平呈正相關;rab8d突變體分生區(qū)細胞數(shù)目減少,是導致主根生長遲緩的重要原因;rab8d突變體根尖淀粉粒分布異常,根尖干細胞龕（Stem Cell Niche,SCN）出現(xiàn)程序性細胞死亡（Programmed Cell Death,PCD）,并且靜止中心（Quiescent Center,QC）細胞開始分裂。林可霉素和壯觀霉素的處理實驗說明,Rab8d對根發(fā)育的影響可能不依賴于質(zhì)體蛋白翻譯。2.... 

【文章來源】：山東大學山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖３－１不同基因型之間的相對表達量??Ｆｉｇｕｒｅ?３－１?Ｒｅｌａｔｉｖｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?Ｒｃｉｂ８ｃｉ?ａｍｏｎｇ?ｔｈｅ?ｉｎｄｉｃａｔｅｄ?ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ??

?山東大學碩士學位論文???進一步觀察突變體幼苗表型，發(fā)現(xiàn)的主根明顯短于野生型，這種表??型在；＾６＆／－／中明顯減輕，說明根長可能與的表達水平呈正相關。為了證??實這一點，分別將ｒａ６＆／－八／與雜交得到了兩個雙突變體：??７／？７７辦＆／－２（卩１）和＾７６＆／－２／＾７／７５（：／－＿５（卩１）。觀察表型發(fā)現(xiàn)，＾：／６＆／－／／＞＇（７６５（＾－２（？１）的根??比?ｒａ６５ｃ／－／?短，比?ｒａ６５ｃ／－２?長，而?（Ｆ１）的根似乎與?ｒａ６＆／－２?相差??不大（圖３－２）。這些結果說明根長確實與的表達水平呈正相關。??－＼Ｎ?ｘ＼Ｎ??麵??１?ｍｍ??圖３－２?３?ＤＡＧ?突變體幼苗的根發(fā)育表型??Ｆｉｇｕｒｅ?３－２?Ｒｏｏｔ?ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ?ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?３?ＤＡＧ?ｒａｂ８ｄ?ｍｕｔａｎｔ?ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ??同時種植野生型、和ｒａ６＆／－２突變體，從萌發(fā)后開始統(tǒng)計幼苗的根??長和分生區(qū)細胞數(shù)目，共記錄了?６ｄ。分析結果發(fā)現(xiàn)，ｒａ姑ｔ／－／和突變體??的根長從２?ＤＡＧ開始逐漸短于野生型，表現(xiàn)根生長遲緩。的根長從２??ＤＡＧ開始逐漸短于ｒａ６５ｄ－／，４－６ＤＡＧｒａＭｃ／－２的根長幾乎沒有變化，說明ｒａＭｔ／－??２的根生長在４?ＤＡＧ時被抑制（圖３－３）。在１?ＤＡＧ時，突變體的分生??區(qū)細胞數(shù)目與野生型幾乎相等，而ｒａ６＆／－２突變體的分生區(qū)細胞數(shù)目相比野生型??和ｒａ６＆／－／明顯減少。在２－６?ＤＡＧ，／Ｙ＾Ｓｃ／－／突變體的分生區(qū)細胞數(shù)目相比比野??生型明顯減少，但是趨于穩(wěn)定；而ｒａ６＆／－２突變體的分生區(qū)細胞數(shù)目逐漸減少（圖??－５?）〇?

?山東大學碩士學位論文???－Ｐ?２０??｜?Ｅ?４０??ＩＬｆｊ＾?＾??—？—?ｗｉｌｄ?ｔｙｐｅ?—＊—?ｒａｂ８ｄ－１?－？?ｒａｂ８ｄ－２??圖３－３?１－６?ＤＡＧ?ｒａＭｄ突變體幼苗的根長和分生區(qū)細胞數(shù)目統(tǒng)計??Ｆｉｇｕｒｅ?３－３?Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ?ｏｎ?ｒｏｏｔ?ｌｅｎｇｔｈ?ａｎｄ?ｍｅｒｉｓｔｅｍ?ｃｅｌｌ?ｎｕｍｂｅｒ?ｉｎ?１－６?ＤＡＧ?ｒｃｉｂＳｄ?ｍｕｔａｎｔ?ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ??利用Ｌｕｇｏｌ?（碘－腆化鉀混合液）染色分析５?ＤＡＧ幼苗根小柱細胞淀粉粒的??分布情況。結果表明，野生型在根尖的淀粉粒分布規(guī)則，它們的分布繪出了小柱??細胞的細胞輪廓。相比之下的單、雙突變體的根尖淀粉粒分布都出現(xiàn)異常，??淀粉粒小且分散，這種表型在ｒａ／＞＆／－２和中更為嚴重（圖３－??４）。更有趣的是，將５?ＤＡＧ的幼苗根用ＰＩ?（碘化丙啶染液）染色后在共聚焦顯??微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，／？＆＆／突變體根尖干細胞區(qū)域出現(xiàn)細胞死亡，并且中柱干細胞??及其子代細胞的死亡比小柱細胞的死亡更頻繁，此外突變體的ＱＣ細胞在形態(tài)上??難以區(qū)分（圖３－５?）。以上結果表明，維持根系的生長需要Ｒａｂ８ｄ。這些表型??２突變體都比突變體明顯，因此接下來主要利用ｒａＭＪ－２突變體進行研??究。??ｆ?ｆ?％?參？??５０?ｐｍ??ＨＩ??ｗｉｌｄ?ｔｙｐｅ?ｒａｂ８ｄ－１?ｒａｂ８ｄ－２?ｒａｂ８ｄ－１?ｒａｂ８ｄ－２?（Ｆ１）?ｒａｂ８ｄ－２?ｒａｂ８ｄ－３?（Ｆ１）??圖３－４?突變體的根小柱細胞表型??Ｆｉｇｕｒｅ?３－４?Ｒｏｏｔ?ｃｏｌｕｍｅｌｌａ?ｃｅｌｌｓ?ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?


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