基于膜融合的囊泡內(nèi)凝聚體制備
發(fā)布時(shí)間:2021-12-25 07:44
凝聚體是細(xì)胞中存在的無(wú)膜細(xì)胞器,也被用于模擬原始細(xì)胞。膜融合是細(xì)胞中普遍存在的過(guò)程,具有重要的生理功能。通過(guò)融合肽、電擊穿以及靜電相互作用均可實(shí)現(xiàn)磷脂囊泡的膜融合。本論文利用不同電性的囊泡通過(guò)靜電相互作用使其發(fā)生膜融合,融合后兩個(gè)腔室變成一個(gè),導(dǎo)致各室的物質(zhì)發(fā)生混合,在融合后的囊泡內(nèi)部生成凝聚體。通過(guò)調(diào)節(jié)聚(二烯丙基二甲基氯化銨)(PDDA)與三磷酸腺苷(ATP)的濃度和比例,制備出不同尺寸的凝聚體。由ATP:PDDA=1:4(PDDA=80 m M)制備的凝聚體,尺寸較大便于觀察可作為化學(xué)反應(yīng)的隔室。由ATP:PDDA=1:16或1:2(PDDA=80m M)制備的凝聚體尺寸較小,可在囊泡內(nèi)生成。凝聚體與帶正電荷的囊泡發(fā)生靜電相互作用,使囊泡在凝聚體內(nèi)部聚集。進(jìn)而在凝聚體內(nèi)部實(shí)現(xiàn)了酶的級(jí)聯(lián)反應(yīng):葡萄糖在葡萄糖氧化酶(GOx)的作用下生成過(guò)氧化氫,過(guò)氧化氫在辣根過(guò)氧化物酶(HRP)的作用下將Amplex Red氧化生成具有紅色熒光的試鹵靈分子。利用1,2-二月桂酰-sn-甘油-3-膽堿磷酸(DLPC)/二油;字=z氨酸(DOPS)制備出巨型磷脂囊泡(Giant unilamella...
【文章來(lái)源】:哈爾濱工業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校 985工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:64 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
膜融合分子機(jī)制示意圖[8]
蛋白質(zhì)介導(dǎo)囊泡融合的模型圖解[9]
GUV與LUVs靜電融合的圖解[12]
本文編號(hào):3552063
【文章來(lái)源】:哈爾濱工業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校 985工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:64 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
膜融合分子機(jī)制示意圖[8]
蛋白質(zhì)介導(dǎo)囊泡融合的模型圖解[9]
GUV與LUVs靜電融合的圖解[12]
本文編號(hào):3552063
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