類枯草桿菌蛋白酶（subtilisin-like proteases, SBT）是一類與植物發(fā)育、防御反應(yīng)相關(guān)的多功能絲氨酸蛋白酶。本文以百子蓮（Agapanthus praecox ssp.orientalis）胚性愈傷組織為供試材料,利用RACE技術(shù)克隆出全長的ApSBT基因?yàn)? 316 bp,編碼771個氨基酸。預(yù)測ApSBT蛋白為82.69 kDa,是從屬于Peptidases S8家族的親水蛋白。同源序列對比分析可知,百子蓮ApSBT蛋白與棕櫚科和禾本科等單子葉植物的SBT遺傳進(jìn)化關(guān)系較近。百子蓮叢生芽經(jīng)過4種單一的非生物（滲透、鹽、氧化及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)）脅迫處理12和24 h后,實(shí)時熒光定量PCR檢測發(fā)現(xiàn)ApSBT基因的相對表達(dá)量對4種脅迫均有響應(yīng),其中脅迫12 h時的表達(dá)量最高,分別為對照的12.00、4.25、3.20和2.50倍。通過單一脅迫實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),在10 mmol·L-1 H2O2誘導(dǎo)下的轉(zhuǎn)基因擬南芥幼苗死亡率高達(dá)78.57%,說明ApSBT主要響應(yīng)了氧化脅迫。 

【文章來源】：植物生理學(xué)報(bào). 2020,56(12)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：11 頁

【部分圖文】：

百子蓮Ap SBT基因3′-RACE (A)、5′-RACE (B)及編碼區(qū)全長(C)擴(kuò)增產(chǎn)物

百子蓮Ap SBT基因的核苷酸、編碼氨基酸序列(A)及蛋白的PFam結(jié)構(gòu)域預(yù)測(B)

利用SOPMA在線網(wǎng)站進(jìn)行蛋白的二級結(jié)構(gòu)分析表明,百子蓮Ap SBT主要由無規(guī)卷曲(379個氨基酸)、延伸主鏈(173個氨基酸)、α螺旋(166個氨基酸)和β折疊(53個氨基酸)構(gòu)成,分別占氨基酸序列總數(shù)的49.16%、22.44%、21.53%和6.87%,其中無規(guī)卷曲所占比例最高;少量的β折疊散布在延伸主鏈附近,α螺旋、延伸主鏈和無規(guī)卷曲貫穿于整個氨基酸肽鏈。圖4 百子蓮Ap SBT與其他植物SBT蛋白系統(tǒng)進(jìn)化樹

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3551916