發(fā)布時間：2021-12-23 06:17

　　目的研究敲低Krüppel樣因子4（KLF4）基因?qū)AW264.7巨噬細胞極化的影響。方法采用RNA干涉技術（RNAi）構建敲低KLF4的慢病毒載體,轉(zhuǎn)染RAW264.7巨噬細胞獲得KLF4基因沉默的穩(wěn)定細胞株。采用白細胞介素4（IL-4）刺激野生型、 KLF4敲低組和陰性對照組巨噬細胞,反轉(zhuǎn)錄PCR檢測細胞誘導型一氧化氮合酶（iNOS）、 IL-1β、腫瘤壞死因子α（TNF-α）及精氨酸酶1（Arg1）、 IL-10、轉(zhuǎn)化生長因子β（TGF-β）的mRNA水平,免疫細胞化學染色檢測和定位巨噬細胞iNOS及Arg1蛋白。結果敲低KLF4基因后, RAW264.7細胞的iNOS、 IL-1β的mRNA含量明顯增高,而TNF-α、Arg1、 IL-10及TGF-β的mRNA含量則明顯降低; IL-4處理野生型RAW264.7細胞后KLF4、 Arg1、 IL-10及TGF-β的mRNA的表達增加, iNOS、 IL-1β及TNF-αmRNA的表達減少; IL-4處理敲低KLF4的細胞,其iNOS、 IL-1β及TNF-αmRNA含量低于野生型組,但高于陰性對照組,而Arg1、 IL-10... 

【文章來源】：細胞與分子免疫學雜志. 2020,36(09)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

實時定量PCR檢測細胞培養(yǎng)12 h后巨噬細胞iNOS、 IL-1β、 TNF-α、 Arg1、 IL-10及TGF-β的 mRNA表達

實時定量PCR結果顯示, IL-4處理 RAW264.7 細胞12 h后, IL-4組細胞的KLF4 mRNA 相對表達量比WT組細胞明顯增加, 差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05, 圖2)。2.3 IL-4處理野生型RAW264.7 細胞后, M1型標志物 iNOS、 IL-1β及TNF-α mRNA的表達量降低, M2型標志物 Arg1、 IL-10及TGF-β mRNA的表達量增加

實時定量PCR結果顯示, 與WT對照組相比, IL-4處理野生型 RAW264.7細胞12 h后, iNOS、 IL-1β 及TNF-α基因的mRNA相對表達量明顯降低, Arg1、 IL-10及TGF-β基因的mRNA的相對表達量明顯增加, 差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01, 圖3)。2.4 IL-4處理shKLF4-RAW264.7 細胞后, M1型細胞標志物 iNOS、 IL-1β及TNF-α mRNA表達量降低, M2型細胞標志物 Arg1、 IL-10及TGF-β mRNA表達量增加

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3547951