腹瀉性貝類毒素（Diarrhetic Shellfish Toxins,DSTs）屬于八大海洋貝類毒素之一,在全球沿海海域廣泛分布,包括大田軟海綿酸（Okadaic acid,OA）及其衍生物（Dinophysistoxins）等游離態(tài)和酯化態(tài)毒素。DSTs由原甲藻屬和鰭藻屬等有毒甲藻產(chǎn)生,可在貝類等濾食性動(dòng)物體內(nèi)富集代謝和轉(zhuǎn)化,通過食物鏈傳遞至人類體內(nèi),引起腹瀉性中毒,而且部分毒素還被釋放到海洋水體中,不僅危害人體健康,而且對(duì)海洋環(huán)境和食品安全等帶來潛在風(fēng)險(xiǎn)。而利瑪原甲藻（Prorocentrum lima）是產(chǎn)生DSTs的典型海洋底棲有毒赤潮藻,廣泛分布于世界各地,對(duì)我國(guó)近海生態(tài)及食品安全造成嚴(yán)重威脅。本研究以分離自我國(guó)海南文昌（北緯19°37′57′′,東經(jīng)110°58′32′′）的一株利瑪原甲藻（HN45株）為研究對(duì)象,通過優(yōu)化毒素提取步驟和質(zhì)譜條件參數(shù)等建立DSTs中游離態(tài)及酯化態(tài)毒素的高分辨篩查鑒定方法,利用此方法和分子網(wǎng)絡(luò)技術(shù),并輔助高效液相色譜和分子生物法采集不同地域利瑪原甲藻和貝類基質(zhì)樣品的毒素、特征化合物、色素組成及基因序列等多元化參數(shù),為建立基于利瑪原甲藻的指紋譜... 

【文章來源】：上海海洋大學(xué)上海市

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

論文技術(shù)路線圖

?ǖ玫紿N45、XS336和2WZD12三個(gè)藻株，方法步驟參考Zhang[105]。然而，采用天根海洋動(dòng)物基因組測(cè)定貝類基質(zhì)樣品的基因序列結(jié)果顯示，9個(gè)樣品出現(xiàn)條帶弱測(cè)序雙峰。分析此結(jié)果出現(xiàn)的原因：第一，盡管貝類內(nèi)臟里毒素含量高，但是藻細(xì)胞在貝類體內(nèi)呈現(xiàn)流動(dòng)的趨勢(shì)，使得內(nèi)臟里面藻細(xì)胞含量少；第二，貝類體內(nèi)基質(zhì)干擾嚴(yán)重。因此，以ITSA-ITSB引物擴(kuò)增的基因序列可以作為識(shí)別不同株系產(chǎn)毒藻的因子，但是此參數(shù)不能作為產(chǎn)毒藻和貝類基質(zhì)樣品之間相互聯(lián)系的唯一識(shí)別因子。將來可以通過設(shè)計(jì)特異性引物達(dá)到毒素來源識(shí)別的需求。圖3-1三株產(chǎn)毒利瑪原甲藻的色素組成及占比Fig.3-1FormationandpercentageofpigmentinthreeP.limastrains藻株體內(nèi)的各生物組分，如光合色素、蛋白質(zhì)、脂肪酸和毒素等，也同樣可以反映不同藻體的物種特征。光合色素表征藻類的生長(zhǎng)和繁殖，基于其在浮游植物體內(nèi)具有生物標(biāo)志性的特點(diǎn)，如Chlb，Peri，F(xiàn)uco，But-fuco常作為特征色素分別指示綠藻、甲藻和金藻的存在[110,111]，常被作為浮游藻類分類的重要依據(jù)之一[112]。本研究利用高效液相色譜-紫外法分析了三株產(chǎn)毒藻體內(nèi)所含的色素種類，結(jié)果如圖3-1所示。三株產(chǎn)毒藻均含有三種常量色素（Peri，Diad和Chla）和五種微量色素（Fuco，Diat，β-carotene，Viola和Allo）。其中Peri，Diad和Chla含量占總色素含量的平均比例分別為79.3%、9.90%和9.51%。2WZD12、HN45和XS336從西到東分布在中國(guó)南海海域附近，均屬于原甲藻屬中的利瑪原甲藻，而且其胞內(nèi)含有的色素種類相同，占比也幾乎相同，說明屬于同種不同株系的藻細(xì)胞內(nèi)含有穩(wěn)定的色素特征。研究表明，以色素為基礎(chǔ)浮游植物化學(xué)分類方法可以快速高效和批量處

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[7]高效液相色譜-四極桿/靜電場(chǎng)軌道阱高分辨質(zhì)譜對(duì)水產(chǎn)品中未知污染物的非定向快速篩查與測(cè)定[J]. 郭思言,丁濤,殷耀,張曉燕,柳菡,沈偉健,林宏,吳斌,鄧曉軍,伊雄海,楊功俊.  色譜. 2019(01)
[8]液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定文蛤中3種腹瀉性貝類毒素[J]. 張秋云,朱曉華,楊洪生,沈美芳,譚秀慧,夏莉萍.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(34)
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博士論文
[1]長(zhǎng)江口及鄰近海域浮游植物色素與富營(yíng)養(yǎng)化研究[D]. 賴俊翔.中國(guó)科學(xué)院研究生院（海洋研究所） 2011
[2]DSP等赤潮藻毒素對(duì)哺乳類細(xì)胞的毒性效應(yīng)及機(jī)制研究[D]. 陳洋.中國(guó)科學(xué)院研究生院（海洋研究所） 2008

碩士論文
[1]腹瀉性貝毒OA與DTX1制備方法的初步研究[D]. 馮振洲.中國(guó)科學(xué)院研究生院（海洋研究所） 2010



本文編號(hào)：3543971