斑布蚋（Simulium maculatum）是世界性分布的重要醫(yī)學(xué)昆蟲之一,該蟲不但叮吸人、畜血液,還傳播病毒及致病細(xì)菌,嚴(yán)重影響了新疆阿勒泰地區(qū)農(nóng)業(yè)牧業(yè)生產(chǎn)及百姓生活。目前國內(nèi)外利用生物農(nóng)藥和物理防治來控制斑布蚋,但效果有限。隨著人們對環(huán)境保護(hù)、昆蟲抗藥性和殺蟲劑污染等問題的日益重視,研發(fā)一種綠色高效的防控方法已迫在眉睫。本文以斑布蚋為研究對象,將行為學(xué)篩選獲得的功能性綠色植物源化合物和與斑布蚋氣味結(jié)合蛋白（OBP）特異性結(jié)合的功能性化合物相聯(lián)系,通過野外測試,尋找有效的引誘劑及趨避劑,為斑布蚋的綠色防控提供理論指導(dǎo),并開發(fā)出誘捕器產(chǎn)品中的防控藥劑。此外,根據(jù)斑布蚋宏基因組數(shù)據(jù)篩選微生物種類組成信息為其微生物防治奠定了基礎(chǔ)。本文主要研究結(jié)果如下:（1）從斑布蚋生境中篩選出72種綠色植物源揮發(fā)物。通過Y管雙選實(shí)驗(yàn)篩選出功能性綠色化合物,其中對斑布蚋具有顯著吸引作用的化合物共7種,分別是:鄰苯二甲酸二丁酯、（-）-芳樟醇、乳香精油、NENU-2、葡萄柚精油、甜茴香精油、茶樹精油。對斑布蚋具有顯著趨避作用的化合物共10種,分別是:鄰二甲苯、水楊酸甲酯、十二烷、亞油酸乙酯、茉莉酸甲酯、NE... 

【文章來源】：東北師范大學(xué)吉林省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

斑布蚋成蟲對41種植物源揮發(fā)物的行為偏好反應(yīng)*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，n.s.代表無顯著差異

東北師范大學(xué)碩士學(xué)位論文72.2結(jié)果與分析通過GraphPad.Prism.v5.0軟件對Y管實(shí)驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。斑布蚋成蟲對41種植物源揮發(fā)物有不同的選擇偏好，如圖2-1，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)鄰苯二甲酸二丁酯、(-)-芳樟醇這兩種揮發(fā)物對斑布蚋具有顯著的吸引作用（p<0.001）。同時，結(jié)果顯示，鄰二甲苯、水楊酸甲酯、十二烷、亞油酸乙酯、茉莉酸甲酯這5種揮發(fā)物對斑布蚋具有顯著趨避作用（p<0.001）。在斑布蚋成蟲對31種植物精油的選擇中，如圖2-2，結(jié)果表明乳香、NENU-2、葡萄柚、甜茴香、茶樹這5種精油對斑布蚋具有顯著的吸引作用（p<0.001），而NENU-1、麝香草沉香醇百里香、薰衣草、柑橘、桉油醇迷迭香這5種精油對斑布蚋具有顯著趨避作用（p<0.001）。圖2-1斑布蚋成蟲對41種植物源揮發(fā)物的行為偏好反應(yīng)*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，n.s.代表無顯著差異Fig2-1Simuliummaculatumadultbehaviorresponseto41plant-derivedvolatiles*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，n.s.representsnotsignificant圖2-2斑布蚋成蟲對31種植物精油的行為偏好反應(yīng)*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，n.s.代表無顯著差異Fig2-2Simuliummaculatumadultbehaviorresponseto31plantessentialoils*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，n.s.representsnotsignificant

東北師范大學(xué)碩士學(xué)位論文13次以保證混勻。室溫靜置2-4min。（3）各加入350μL的BufferP3至每個離心管，并立即溫和顛倒離心管5-10次充分混勻。室溫靜置2min。12000×g，22℃，10min的條件進(jìn)行離心。（4）將上清液移入過濾柱中，9000×g，22℃，30s的條件進(jìn)行離心，收集管中的液體重復(fù)上柱一次。之后倒掉液體。（5）向吸附柱的濾膜加入500μL的WashSolution，9000×g，22℃，30s的條件進(jìn)行離心，倒掉管內(nèi)的液體，重復(fù)上述操作。（6）9000×g，22℃，1min的條件進(jìn)行空離。（7）打開吸附柱蓋子，室溫靜置2min，然后向?yàn)V膜中央，加入30μL的去核酸酶水，9000×g，22℃，1min的條件進(jìn)行離心，使用Nanodrop上測量質(zhì)粒濃度，放入-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?.1.8表達(dá)載體質(zhì)粒雙酶切與構(gòu)建pET-30a載體圖譜如圖3-1：圖3-1pET-30a載體圖譜Fig3-1pET-30avectormap（1）pET-30a表達(dá)載體雙酶切：在pET-30a表達(dá)載體中，選擇HindIII和EcoRI這兩個內(nèi)切酶將pET-30a表達(dá)載體線性化。

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3543222