6-甲基腺嘌呤[N6-methyl-adenosine（m6A）]是指發(fā)生于腺嘌呤（Adenine）的第6位氮原子（N）上的甲基化修飾,是近年來(lái)備受關(guān)注的RNA表觀遺傳調(diào)控方向的研究熱點(diǎn)。m6A甲基化在人類(lèi)RNA病毒（如HIV）和植物病毒（AMV和CMV）復(fù)制中也具有一定的調(diào)控作用。但關(guān)于植物病毒是否影響植物體內(nèi)的m6A甲基化變化的報(bào)道很少。本論文研究了本氏煙（Nicotianabenthamiana）受到煙草脈斑駁病毒（TVMV）、馬鈴薯X病毒（PVX）侵染后對(duì)寄主RNA m6A甲基化的影響。研究結(jié)果如下:（1）通過(guò)比色法測(cè)定m6A甲基化水平,發(fā)現(xiàn)在病毒侵染本氏煙后,m6A甲基化水平與健康植株相比顯著降低（P<0.5）,所檢測(cè)到的m6A分別為0.0565%（健康植株）,0.0295%（TVMV）和 0.0205%（PVX）。（2）對(duì)侵染TVMV和PVX的樣品中m6A甲基化峰進(jìn)行了 MeRIP-Seq測(cè)序分析。結(jié)果也證實(shí)了病毒侵染后植株中m6A甲基化水平明顯降低,健康植株中有33655個(gè)m6A甲基化峰,侵染TVMV的樣品中有32556個(gè)m6A甲基化峰,侵染PVX的樣品中有1888... 

【文章來(lái)源】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１真核生物ｍＲＮＡ中常見(jiàn)化學(xué)修飾分布（引自⑴）??Ｆｉｇ．ｌ?Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ?ｏｆ?ｃｏｍｍｏｎ?ｃｈｅｍｉｃａｌ?ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ?ｉｎ?ｅｕｋａｒｙｏｔｉｃ?ｍＲＮＡ??

?內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位：論文?１５??３結(jié)果與分析??３．１?ＴＶＭＶ和ＰＶＸ侵染后本氏煙ｍ６Ａ甲基化水平??在本氏煙（ｉＶ．?執(zhí)ａｍｉａｒｎｊ）上用機(jī)械摩擦接種的方法接種了?ＴＶＭＶ和ＰＶＸ，１４??ｄ后觀察病毒侵染癥狀，如圖２所示，與健康本氏煙相比，被ＰＶＸ侵染的葉片表現(xiàn)??為輕型花葉，葉片上有大小不等、形狀不規(guī)則的黃綠色斑駁；被ＴＶＭＶ侵染的葉片??表現(xiàn)為厚度不均勻的癥狀。在系統(tǒng)侵染的葉片中采用ＲＴ－ＰＣＲ方法分析驗(yàn)證了病毒的??積累量，如圖３可知ＴＶＭＶ和ＰＶＸ都獲得了相應(yīng)的特異性擴(kuò)增條帶，說(shuō)明本氏煙中??病毒的積累量達(dá)到要求，可以進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。采用比色法（ＥｐｉＱｕｉｋｍ６ＡＲＮＡ甲基??化定量試劑盒）對(duì)病毒侵染的系統(tǒng)葉片進(jìn)行測(cè)定ｍ６Ａ甲基化。結(jié)果如圖４，檢測(cè)到??健康植物、ＴＶＭＶ和ＰＶＸ侵染的樣品中ｍ６Ａ甲基化分別為０．０５６５％，?０．０２９５％和??０．０２０５％。這表明這兩種病毒侵染均導(dǎo)致寄主植物中總的ｍ６Ａ甲基化水平顯著降低??（Ｐ＜０．５），??Ｈｅａｌｔｈｙ?ＴＶＭＶ?ＰＶＸ??＿＿＿??圖２?ＴＶＭＶ和ＰＶＸ在本氏煙上的侵染癥狀??Ｆｉｇ．２?Ｓｙｍｐｔｏｍｓ?ｏｆ?ＴＶＭＶ?ａｎｄ?ＰＶＸ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?Ｎ．?ｂｅｎｔｈａｍｉａｎａ??０．０７?ｉ??〇．〇ａ．??１５００ｈｐ?＇??｜?０．０４?－?Ｈ??＞〇〇?ａＱ２?■?■畜??雇ｂｐ?°＇°；丨■?■?■??１００?ｂｐ?Ｈｅａｌｔｈｙ?ＴＶＭＶ??圖３?ＲＴ－ＰＣＲ方法檢測(cè)ＴＶＭＶ和ＰＶＸ?圖４病毒ｆｅ：染后的ｍ６Ａ甲基化水平??Ｆｉｇ．３?Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ＴＶＭＶ?ａｎｄ?Ｐ

?內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位：論文?１５??３結(jié)果與分析??３．１?ＴＶＭＶ和ＰＶＸ侵染后本氏煙ｍ６Ａ甲基化水平??在本氏煙（ｉＶ．?執(zhí)ａｍｉａｒｎｊ）上用機(jī)械摩擦接種的方法接種了?ＴＶＭＶ和ＰＶＸ，１４??ｄ后觀察病毒侵染癥狀，如圖２所示，與健康本氏煙相比，被ＰＶＸ侵染的葉片表現(xiàn)??為輕型花葉，葉片上有大小不等、形狀不規(guī)則的黃綠色斑駁；被ＴＶＭＶ侵染的葉片??表現(xiàn)為厚度不均勻的癥狀。在系統(tǒng)侵染的葉片中采用ＲＴ－ＰＣＲ方法分析驗(yàn)證了病毒的??積累量，如圖３可知ＴＶＭＶ和ＰＶＸ都獲得了相應(yīng)的特異性擴(kuò)增條帶，說(shuō)明本氏煙中??病毒的積累量達(dá)到要求，可以進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。采用比色法（ＥｐｉＱｕｉｋｍ６ＡＲＮＡ甲基??化定量試劑盒）對(duì)病毒侵染的系統(tǒng)葉片進(jìn)行測(cè)定ｍ６Ａ甲基化。結(jié)果如圖４，檢測(cè)到??健康植物、ＴＶＭＶ和ＰＶＸ侵染的樣品中ｍ６Ａ甲基化分別為０．０５６５％，?０．０２９５％和??０．０２０５％。這表明這兩種病毒侵染均導(dǎo)致寄主植物中總的ｍ６Ａ甲基化水平顯著降低??（Ｐ＜０．５），??Ｈｅａｌｔｈｙ?ＴＶＭＶ?ＰＶＸ??＿＿＿??圖２?ＴＶＭＶ和ＰＶＸ在本氏煙上的侵染癥狀??Ｆｉｇ．２?Ｓｙｍｐｔｏｍｓ?ｏｆ?ＴＶＭＶ?ａｎｄ?ＰＶＸ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?Ｎ．?ｂｅｎｔｈａｍｉａｎａ??０．０７?ｉ??〇．〇ａ．??１５００ｈｐ?＇??｜?０．０４?－?Ｈ??＞〇〇?ａＱ２?■?■畜??雇ｂｐ?°＇°；丨■?■?■??１００?ｂｐ?Ｈｅａｌｔｈｙ?ＴＶＭＶ??圖３?ＲＴ－ＰＣＲ方法檢測(cè)ＴＶＭＶ和ＰＶＸ?圖４病毒ｆｅ：染后的ｍ６Ａ甲基化水平??Ｆｉｇ．３?Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ＴＶＭＶ?ａｎｄ?Ｐ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定芒果中六種鏈格孢霉毒素殘留[J]. 張子庚,張愛(ài)芝,邢家溧,承海,張書(shū)芬,鄭睿行,戴賢君.  食品工業(yè)科技. 2020(20)
[3]RNA甲基化修飾m6A在動(dòng)物中的研究進(jìn)展[J]. 何波,周小楓,蔣瑤,曹浩男,袁曉龍,張哲,張豪,李加琪.  畜牧與獸醫(yī). 2020(03)
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[5]病毒基因組中m6A甲基化修飾調(diào)控機(jī)制及研究進(jìn)展[J]. 鞏沅鑫,王超,李晉濤.  病毒學(xué)報(bào). 2018(05)
[6]RNA修飾分布特征概述[J]. 韓瀟,孫寶發(fā).  生命科學(xué). 2018(04)
[7]mRNA修飾研究概況及展望[J]. 孫文舉,周克任,楊建華,周惠,屈良鵠.  生命科學(xué). 2016(05)
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[9]人類(lèi)皰疹病毒8型基因甲基化的研究進(jìn)展[J]. 吳曹英,普雄明.  中國(guó)麻風(fēng)皮膚病雜志. 2012 (09)

博士論文
[1]RNA m6A修飾及其催化基因METTL14在肝癌發(fā)生發(fā)展中的作用及機(jī)制研究[D]. 馬金召.第二軍醫(yī)大學(xué) 2017
[2]mRNA m6A位點(diǎn)預(yù)測(cè)及其功能的系統(tǒng)生物學(xué)研究[D]. 向書(shū)念.清華大學(xué) 2017
[3]RNA N6-甲基腺嘌呤（m6A）位點(diǎn)形成機(jī)制及功能研究[D]. 郝亞娟.中國(guó)科學(xué)院北京基因組研究所 2016

碩士論文
[1]高脂對(duì)小鼠肝臟基因RNA甲基化的影響[D]. 羅祖朋.廣西大學(xué) 2019



本文編號(hào)：3514966