6-甲基腺嘌呤[N6-methyl-adenosine（m6A）]是指發(fā)生于腺嘌呤（Adenine）的第6位氮原子（N）上的甲基化修飾,是近年來備受關注的RNA表觀遺傳調控方向的研究熱點。m6A甲基化在人類RNA病毒（如HIV）和植物病毒（AMV和CMV）復制中也具有一定的調控作用。但關于植物病毒是否影響植物體內的m6A甲基化變化的報道很少。本論文研究了本氏煙（Nicotianabenthamiana）受到煙草脈斑駁病毒（TVMV）、馬鈴薯X病毒（PVX）侵染后對寄主RNA m6A甲基化的影響。研究結果如下:（1）通過比色法測定m6A甲基化水平,發(fā)現(xiàn)在病毒侵染本氏煙后,m6A甲基化水平與健康植株相比顯著降低（P<0.5）,所檢測到的m6A分別為0.0565%（健康植株）,0.0295%（TVMV）和 0.0205%（PVX）。（2）對侵染TVMV和PVX的樣品中m6A甲基化峰進行了 MeRIP-Seq測序分析。結果也證實了病毒侵染后植株中m6A甲基化水平明顯降低,健康植株中有33655個m6A甲基化峰,侵染TVMV的樣品中有32556個m6A甲基化峰,侵染PVX的樣品中有1888... 

【文章來源】：內蒙古農業(yè)大學內蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１真核生物ｍＲＮＡ中常見化學修飾分布（引自⑴）??Ｆｉｇ．ｌ?Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ?ｏｆ?ｃｏｍｍｏｎ?ｃｈｅｍｉｃａｌ?ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ?ｉｎ?ｅｕｋａｒｙｏｔｉｃ?ｍＲＮＡ??

?內蒙古農業(yè)大學碩士學位：論文?１５??３結果與分析??３．１?ＴＶＭＶ和ＰＶＸ侵染后本氏煙ｍ６Ａ甲基化水平??在本氏煙（ｉＶ．?執(zhí)ａｍｉａｒｎｊ）上用機械摩擦接種的方法接種了?ＴＶＭＶ和ＰＶＸ，１４??ｄ后觀察病毒侵染癥狀，如圖２所示，與健康本氏煙相比，被ＰＶＸ侵染的葉片表現(xiàn)??為輕型花葉，葉片上有大小不等、形狀不規(guī)則的黃綠色斑駁；被ＴＶＭＶ侵染的葉片??表現(xiàn)為厚度不均勻的癥狀。在系統(tǒng)侵染的葉片中采用ＲＴ－ＰＣＲ方法分析驗證了病毒的??積累量，如圖３可知ＴＶＭＶ和ＰＶＸ都獲得了相應的特異性擴增條帶，說明本氏煙中??病毒的積累量達到要求，可以進行下一步實驗。采用比色法（ＥｐｉＱｕｉｋｍ６ＡＲＮＡ甲基??化定量試劑盒）對病毒侵染的系統(tǒng)葉片進行測定ｍ６Ａ甲基化。結果如圖４，檢測到??健康植物、ＴＶＭＶ和ＰＶＸ侵染的樣品中ｍ６Ａ甲基化分別為０．０５６５％，?０．０２９５％和??０．０２０５％。這表明這兩種病毒侵染均導致寄主植物中總的ｍ６Ａ甲基化水平顯著降低??（Ｐ＜０．５），??Ｈｅａｌｔｈｙ?ＴＶＭＶ?ＰＶＸ??＿＿＿??圖２?ＴＶＭＶ和ＰＶＸ在本氏煙上的侵染癥狀??Ｆｉｇ．２?Ｓｙｍｐｔｏｍｓ?ｏｆ?ＴＶＭＶ?ａｎｄ?ＰＶＸ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?Ｎ．?ｂｅｎｔｈａｍｉａｎａ??０．０７?ｉ??〇．〇ａ．??１５００ｈｐ?＇??｜?０．０４?－?Ｈ??＞〇〇?ａＱ２?■?■畜??雇ｂｐ?°＇°；丨■?■?■??１００?ｂｐ?Ｈｅａｌｔｈｙ?ＴＶＭＶ??圖３?ＲＴ－ＰＣＲ方法檢測ＴＶＭＶ和ＰＶＸ?圖４病毒ｆｅ：染后的ｍ６Ａ甲基化水平??Ｆｉｇ．３?Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ＴＶＭＶ?ａｎｄ?Ｐ

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【參考文獻】：
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博士論文
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碩士論文
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本文編號：3514966