[目的]研究SgARF9基因與羅漢果果實發(fā)育的關(guān)系。[方法]在轉(zhuǎn)錄組Unigene序列基礎(chǔ)上,對羅漢果SgARF9基因進行克隆,并結(jié)合CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù),構(gòu)建以SgARF9為靶基因的CRISPR/Cas9基因編輯載體。[結(jié)果]克隆得到SgARF9基因序列,且成功構(gòu)建包含SgARF9基因靶點的編輯載體。[結(jié)論]該研究為揭示SgARF9基因的分子生物學(xué)功能,明確其在羅漢果果實起始發(fā)育中的遺傳調(diào)控機制提供了基礎(chǔ)。 

【文章來源】：安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2020,48(02)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 儀器、試劑
    1.3 引物序列
    1.4 研究方法
        1.4.1 SgARF9基因克隆及序列分析。
        1.4.2 CRISPR/Cas9基因編輯載體的構(gòu)建。
            1.4.2.1 靶點接頭的選擇。
            1.4.2.2 靶點接頭制備及酶切-連接反應(yīng)。
            1.4.2.3 兩輪PCR擴增。
            1.4.2.4 擴增產(chǎn)物的酶切連接及轉(zhuǎn)化。
2 結(jié)果與分析
    2.1 基因克隆
    2.2 靶點接頭二級結(jié)構(gòu)
    2.3 巢式PCR擴增
    2.4 測序驗證
3 結(jié)論與討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]紅麻miR394基因的克隆及CRISPR/Cas9載體構(gòu)建[J]. 史奇奇,李增強,韋范,湯丹峰,賈瑞星,謝紅英,周瑞陽,陳鵬.  中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2019(01)
[2]植物CRISPR/Cas9多基因編輯載體構(gòu)建和突變分析的操作方法[J]. 曾棟昌,馬興亮,謝先榮,祝欽瀧,劉耀光.  中國科學(xué):生命科學(xué). 2018(07)
[3]單性結(jié)實的分子研究進展[J]. 涂冬萍,馬小軍,莫長明,潘麗梅,馮世鑫,黃杰.  中草藥. 2014(20)
[4]羅漢果甜甙V在各部位的含量分布[J]. 蘇小建,劉國雄,聶曉,辛云海,何星存.  食品科技. 2007(05)
[5]泛素啟動子的研究進展[J]. 趙慧,鄭文嶺,崔東,馬文麗.  廣東醫(yī)學(xué). 2003(12)
[6]2,4-D與羅漢果單性結(jié)實[J]. 李珍貞,鄔輝平.  植物雜志. 1988(03)



本文編號：3514551