羅漢果SgARF9基因克隆及其CRISPR/Cas9基因編輯載體構(gòu)建
發(fā)布時(shí)間:2021-11-23 19:59
[目的]研究SgARF9基因與羅漢果果實(shí)發(fā)育的關(guān)系。[方法]在轉(zhuǎn)錄組Unigene序列基礎(chǔ)上,對(duì)羅漢果SgARF9基因進(jìn)行克隆,并結(jié)合CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù),構(gòu)建以SgARF9為靶基因的CRISPR/Cas9基因編輯載體。[結(jié)果]克隆得到SgARF9基因序列,且成功構(gòu)建包含SgARF9基因靶點(diǎn)的編輯載體。[結(jié)論]該研究為揭示SgARF9基因的分子生物學(xué)功能,明確其在羅漢果果實(shí)起始發(fā)育中的遺傳調(diào)控機(jī)制提供了基礎(chǔ)。
【文章來源】:安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2020,48(02)
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 儀器、試劑
1.3 引物序列
1.4 研究方法
1.4.1 SgARF9基因克隆及序列分析。
1.4.2 CRISPR/Cas9基因編輯載體的構(gòu)建。
1.4.2.1 靶點(diǎn)接頭的選擇。
1.4.2.2 靶點(diǎn)接頭制備及酶切-連接反應(yīng)。
1.4.2.3 兩輪PCR擴(kuò)增。
1.4.2.4 擴(kuò)增產(chǎn)物的酶切連接及轉(zhuǎn)化。
2 結(jié)果與分析
2.1 基因克隆
2.2 靶點(diǎn)接頭二級(jí)結(jié)構(gòu)
2.3 巢式PCR擴(kuò)增
2.4 測(cè)序驗(yàn)證
3 結(jié)論與討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]紅麻miR394基因的克隆及CRISPR/Cas9載體構(gòu)建[J]. 史奇奇,李增強(qiáng),韋范,湯丹峰,賈瑞星,謝紅英,周瑞陽,陳鵬. 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2019(01)
[2]植物CRISPR/Cas9多基因編輯載體構(gòu)建和突變分析的操作方法[J]. 曾棟昌,馬興亮,謝先榮,祝欽瀧,劉耀光. 中國科學(xué):生命科學(xué). 2018(07)
[3]單性結(jié)實(shí)的分子研究進(jìn)展[J]. 涂冬萍,馬小軍,莫長明,潘麗梅,馮世鑫,黃杰. 中草藥. 2014(20)
[4]羅漢果甜甙V在各部位的含量分布[J]. 蘇小建,劉國雄,聶曉,辛云海,何星存. 食品科技. 2007(05)
[5]泛素啟動(dòng)子的研究進(jìn)展[J]. 趙慧,鄭文嶺,崔東,馬文麗. 廣東醫(yī)學(xué). 2003(12)
[6]2,4-D與羅漢果單性結(jié)實(shí)[J]. 李珍貞,鄔輝平. 植物雜志. 1988(03)
本文編號(hào):3514551
【文章來源】:安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2020,48(02)
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 儀器、試劑
1.3 引物序列
1.4 研究方法
1.4.1 SgARF9基因克隆及序列分析。
1.4.2 CRISPR/Cas9基因編輯載體的構(gòu)建。
1.4.2.1 靶點(diǎn)接頭的選擇。
1.4.2.2 靶點(diǎn)接頭制備及酶切-連接反應(yīng)。
1.4.2.3 兩輪PCR擴(kuò)增。
1.4.2.4 擴(kuò)增產(chǎn)物的酶切連接及轉(zhuǎn)化。
2 結(jié)果與分析
2.1 基因克隆
2.2 靶點(diǎn)接頭二級(jí)結(jié)構(gòu)
2.3 巢式PCR擴(kuò)增
2.4 測(cè)序驗(yàn)證
3 結(jié)論與討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]紅麻miR394基因的克隆及CRISPR/Cas9載體構(gòu)建[J]. 史奇奇,李增強(qiáng),韋范,湯丹峰,賈瑞星,謝紅英,周瑞陽,陳鵬. 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2019(01)
[2]植物CRISPR/Cas9多基因編輯載體構(gòu)建和突變分析的操作方法[J]. 曾棟昌,馬興亮,謝先榮,祝欽瀧,劉耀光. 中國科學(xué):生命科學(xué). 2018(07)
[3]單性結(jié)實(shí)的分子研究進(jìn)展[J]. 涂冬萍,馬小軍,莫長明,潘麗梅,馮世鑫,黃杰. 中草藥. 2014(20)
[4]羅漢果甜甙V在各部位的含量分布[J]. 蘇小建,劉國雄,聶曉,辛云海,何星存. 食品科技. 2007(05)
[5]泛素啟動(dòng)子的研究進(jìn)展[J]. 趙慧,鄭文嶺,崔東,馬文麗. 廣東醫(yī)學(xué). 2003(12)
[6]2,4-D與羅漢果單性結(jié)實(shí)[J]. 李珍貞,鄔輝平. 植物雜志. 1988(03)
本文編號(hào):3514551
本文鏈接:http://sikaile.net/projectlw/swxlw/3514551.html
最近更新
教材專著