棉花是世界上一種重要的經(jīng)濟(jì)作物,棉纖維不僅可以作為紡織工業(yè)的紡織原料,而且在農(nóng)業(yè)和食品等產(chǎn)業(yè)中也發(fā)揮重要作用。棉纖維品質(zhì)對(duì)于紡織工業(yè)及其相關(guān)產(chǎn)業(yè)極為重要。以往的研究表明,棉纖維細(xì)胞次生壁發(fā)育主要決定著棉纖維強(qiáng)度。棉纖維細(xì)胞次生壁主要由纖維素構(gòu)成,主要受到NAC和MYB轉(zhuǎn)錄因子及其下游轉(zhuǎn)錄因子所構(gòu)成的網(wǎng)絡(luò)調(diào)控。本實(shí)驗(yàn)室在之前的研究中,分離鑒定了一個(gè)R2R3-MYB轉(zhuǎn)錄因子GhMYBL1。在擬南芥中過表達(dá)GhMYBL1,發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因植株的細(xì)胞次生壁組分出現(xiàn)了異位沉積,并且CesA4/7/8等細(xì)胞次生壁相關(guān)基因的表達(dá)被激活。本文主要研究GhMYBL1在棉花中的功能,在獲得GhMYBL1轉(zhuǎn)基因棉花材料之后,對(duì)轉(zhuǎn)基因棉花表型進(jìn)行了分析,并對(duì)GhMYBL1調(diào)控纖維細(xì)胞次生壁發(fā)育的分子機(jī)制進(jìn)行了探討。本文獲得的研究結(jié)果如下:1、GhMYBL1基因參與調(diào)節(jié)棉纖維細(xì)胞次生壁發(fā)育為了研究GhMYBL1基因在棉纖維發(fā)育中的功能,我們對(duì)T1代GhMYBL1RNAi轉(zhuǎn)基因棉花材料進(jìn)行了表型分析。RT-PCR分析表明,轉(zhuǎn)基因棉花纖維中GhMYBL1表達(dá)顯著下降。對(duì)不同RNAi轉(zhuǎn)基因棉花株系材料的成熟纖維進(jìn)行了測(cè)量,... 

【文章來源】：華中師范大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：61 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．３植物體內(nèi)ＩＡＡ合成路線圖（Ｚｈａｏ，?２０１０）??ＩＡＡ在合成之后，以游離態(tài)和軛合態(tài)兩種狀態(tài)存在，其中軛合態(tài)的ＩＡＡ是沒柯??活性的

?ｒｅｐｒｅｓｓｅｄ??Ｃｕｌｌ?Ａｕｘｉｎ??—??ＡＲＥｓ??Ａｕｘｍ－ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ?ｇｅｎｅ??八，??Ｕｂ??脒?Ｕｂｚ??Ｉ?Ｉ?Ｘ??Ｅ１?＾?Ｅ２??Ｕｂｉｑｕｉｔｉｎ?Ｕｂｉｑｕｉｔｉｎ?＼３??ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ?Ｃｏｎｊｕｇａｔｉｎｇ?＾?＼?．??ｅｎｚｙｍｅ?ｅｎｚｙｍｅ?Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ??＼??Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ??ＡＲＦ?ＡＲＦ?ａｃｔｉｖｅ??ＡＲＥｓ??Ａｕｘｉｎ－ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ?ｇｅｎｅ??圖１．４生長(zhǎng)素信號(hào)通路圖（Ｍｉｒｏｎｏｖａ?ｅｔ?ａｌ．，２０１４）??１．４．４生長(zhǎng)素對(duì)棉花纖維發(fā)育的影響??研究表明，生長(zhǎng)素在棉纖維細(xì)胞發(fā)育中起著重要的調(diào)控作用。例如，外源施加??ＩＡＡ?顯著增加了總纖維的體積（Ｂｅａｓｌｅｙ，?１９７３；?Ｃｈｅｎ?ｅｔａｌ．，?２０１１；?Ｇｕｉｎｎ?ｅｔａｌ．，１９８８）９??１０??

系的??ＲＮＡｉ?ＴＯ代材料。將其種植后收到Ｔ１代棉花材料的種子，發(fā)苗種在田里。經(jīng)過精??心照顧，待其長(zhǎng)出幼嫩的真葉。采取少ＳＫ葉，通過植物基因組ＤＮＡ提取試劑盒??進(jìn)行棉花ｇＤＮＡ提取，具體實(shí)驗(yàn)操作步驟詳見說明書。以提取的棉花ｇＤＮＡ為模板，??以Ｇ／７Ｍ７５Ｚ７?Ｒｌ＋Ｇ；？ｎ＾９Ｉｎｔｒｏｎ?Ｐ１為特異性引物進(jìn)行ＰＣＲ。將ＰＣＲ產(chǎn)物進(jìn)行ＤＮＡ??瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)。結(jié)果顯示，ＧＭ／ｒａ／Ｊ?ＲＮＡｉ的Ｔ１代材料陽(yáng)性率為１００％。??Ｍｌ?２３４５６７８９?１０?１１?１２??圖３．?１?ＲＮＡｉ轉(zhuǎn)基因棉花Ｔ１代陽(yáng)性苗檢測(cè)??Ｍ：ＭａｒｋｅｒＤＬ２０００，ｌ：陰性對(duì)照，２：陽(yáng)性對(duì)照，３－１２：轉(zhuǎn)基因棉花植株。??３丄２?ＲＮＡｉ轉(zhuǎn)基因棉花基因表達(dá)分析??為了觀察Ｇ／７Ａ／７５Ｚ／在轉(zhuǎn)基因材料中的表達(dá)量，我們收取了?１８ＤＰＡ的棉花纖維??材料。通過植物ＲＮＡ提取試劑盒提取１８ＤＰＡ棉花纖維細(xì)胞總ＲＮＡ，具體實(shí)驗(yàn)步驟??詳見說明書。取少量ＲＮＡ進(jìn)行ＲＮＡ瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，觀察提取ＲＮＡ的完整??性。結(jié)果顯示ＲＮＡ沒有發(fā)生降解。??Ｍ?１?２?３??圖３．?２?ＲＮＡ瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)??Ｍ：ＭａｒｋｅｒＤＬ２０００；?１：野生型棉花?１８ＤＰＡ?棉纖維?ＲＮＡ；?２－３：?Ｇ／ｉＭｒＳＺＪ?ＲＮＡｉ?轉(zhuǎn)基因棉花??Ｌ１２３株系和Ｌ４株系１８ＤＰＡ棉纖維ＲＮＡ，??將檢測(cè)合格的ＲＮＡ進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，逆轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)操作步驟詳見方法２．２．３。以逆轉(zhuǎn)??２１??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Developmental and hormonal regulation of fiber quality in two natural-colored cotton cultivars[J]. ZHANG Xiang,HU Da-peng,LI Yuan,CHEN Yuan,Eltayib H.M.A.Abidallha,DONG Zhao-di,CHEN De-hua,ZHANG Lei.  Journal of Integrative Agriculture. 2017(08)
[2]Cotton GhMYB7 is predominantly expressed in developing fibers and regulates secondary cell wall biosynthesis in transgenic Arabidopsis[J]. Junfeng Huang,Feng Chen,Siyu Wu,Juan Li,Wenliang Xu.  Science China（Life Sciences）. 2016(02)



本文編號(hào)：3501558