蛋白互作在細(xì)胞生命活動(dòng)中發(fā)揮關(guān)鍵作用,在不同時(shí)空層面上參與多種細(xì)胞學(xué)過程,因此研究蛋白互作對理解分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)至關(guān)重要。通常情況下,利用酵母雙雜交系統(tǒng)篩選植物蛋白互作必須通過體外和體內(nèi)系統(tǒng)進(jìn)行驗(yàn)證。Pull-down和Co-IP是驗(yàn)證植物蛋白互作的常用技術(shù)。Pull-down被廣泛用于體外驗(yàn)證蛋白間的直接互作;而在植物活體內(nèi),利用本氏煙草（Nicotianabenthamiana）葉片瞬時(shí)表達(dá)蛋白,繼而通過Co-IP進(jìn)行鑒定是目前驗(yàn)證蛋白互作最簡單且最有效的方法之一。該文對GSTPull-down和煙草瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)中Co-IP技術(shù)原理及實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行詳細(xì)描述,以期為驗(yàn)證植物蛋白互作提供參考。 

【文章來源】：植物學(xué)報(bào). 2020,55(01)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

利用原核表達(dá)系統(tǒng)檢測融合GST(谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶)的誘餌蛋白與捕獲蛋白互作的Pull-down實(shí)驗(yàn)流程圖

利用煙草瞬時(shí)轉(zhuǎn)化體系檢測融合Myc的誘餌蛋白與融合Flag的捕獲蛋白互作的Co-IP實(shí)驗(yàn)流程圖


本文編號(hào)：3491584