為了探討中國鱟N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（EC3.2.1.52,NAGase）活性的必需基團,采用了化學修飾法進行研究,分別以甲醛、乙酸酐、三硝基苯磺酸、對氯汞苯甲酸、苯甲基磺酰氟、二巰基蘇糖醇、乙酰丙酮、溴代乙酸、碘代乙酸、N-溴代琥珀酰亞胺等10種修飾劑,在特定環(huán)境中對中國鱟NAGase進行化學修飾。結果表明:中國鱟NAGase中賴氨酸的ε-氨基、組氨酸的咪唑基、色氨酸的吲哚基和絲氨酸的羥基經修飾后,酶活力幾近喪失,這些氨基酸基團為酶活性的必需基團,且可能處于酶的活性部位;半胱氨酸的巰基經修飾后不完全失活,說明半胱氨酸的巰基是NAGase催化活性所必需的,但可能不處于酶的活性部位;酶的二硫鍵被修飾后,酶活力明顯下降,說明二硫鍵在維系NAGase的三維空間構象中起重要作用;而精氨酸的胍基經修飾后酶的活性基本不變,因此,精氨酸不是NAGase的必需基團。 

【文章來源】：中國海洋大學學報(自然科學版). 2020,50(01)北大核心CSCD

【文章頁數】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 中國鱟內臟NAGase活力測定
        1.2.2 中國鱟內臟NAGase功能基團的化學修飾
        1.2.3 NBS對NAGase紫外吸收光譜和內源熒光發(fā)射光譜的影響
2 結果與分析
    2.1 中國鱟內臟NAGase的分離純化
    2.2 氨基的化學修飾
    2.3 羥基的化學修飾
    2.4 巰基的化學修飾
    2.5 二硫鍵的化學修飾
    2.6 胍基的化學修飾
    2.7 咪唑基的化學修飾
    2.8 吲哚基的化學修飾
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]中國鱟內臟N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的分離純化及其酶學性質[J]. 林建城,許恒棋,羅新明.  中國海洋大學學報(自然科學版). 2017(09)
[2]幾丁質酶的研究進展[J]. 糜艷霞,任慧,張常,劉建紅,范曉軍.  生命科學研究. 2015(05)
[3]槐豬精液中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶功能基團的研究[J]. 林心宇,章文,沈林松,張偉妮,黃小紅.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2015(09)
[4]醇類有機溶劑對木瓜蛋白酶催化活性的影響機理[J]. 初志戰(zhàn),陳紀鵬,劉小林,黃卓烈,黃磊.  食品與生物技術學報. 2014(10)
[5]甲殼動物幾丁質酶基因結構與功能的研究進展[J]. 呂黎,寧黔冀.  生理科學進展. 2011(06)
[6]Aspergillus ficuum菊粉酶的熒光光譜研究[J]. 王靜,金征宇,江波,孫寶國,曹雁平,俞昊洋.  食品科學. 2009(23)
[7]凡納濱對蝦內臟幾丁質酶基因的克隆、序列分析與結構預測[J]. 黃乾生,陳超琪,謝曉蘭,王燁,石艷,陳清西.  臺灣海峽. 2009(03)
[8]菜青蟲N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活性必需基團的研究[J]. 石艷,劉煒風,陳清西.  廈門大學學報(自然科學版). 2006(06)



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