發(fā)布時間：2021-10-10 03:51

　　背景:前期證明,過表達心臟基因轉(zhuǎn)錄因子GATA-4小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞分泌的外泌體(BMSCs^GATA-4-exosome)可以促進BMSCs向心肌樣細胞分化,提示其可以修復心肌梗死,另外還發(fā)現(xiàn)BMSCs^GATA-4-exosome中及心肌梗死局部心肌組織中有mi RNA-673-5p明顯高表達且功能涉及細胞分化,可能是BMSCs^GATA-4-exosome修復心肌梗死的關鍵分子。目的:探討B(tài)MSCs^GATA-4-exosome促進BMSCs向心肌樣細胞分化的分子調(diào)控網(wǎng)絡。方法:在小鼠BMSCs培養(yǎng)體系內(nèi)加入miRNA-673-5p模擬物（mi R-673-5p-mimic）作為實驗組(BMSCs^{miR-673-5p-mimic}),將BMSCs^GATA-4組、BMSCs^{GATA-4-空載體}組、BMSCs組、BMSCs^{miR-673-5p-inhibitor}組作為混雜因素對照組,提取各組分泌的外泌體與BMSCs直接... 

【文章來源】：中國組織工程研究. 2020,24(19)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
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文題釋義：
縮略語：
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 設計
    1.2 時間及地點
    1.3 材料
        1.3.1 實驗試劑
        1.3.2 實驗動物
    1.4 實驗方法
        1.4.1 小鼠BMSCs的分離、培養(yǎng)及鑒定
        1.4.2 慢病毒載體及基因開啟技術構建過表達GATA-4的BMSCs
        1.4.3 BMSCsmiR-673-5p-mimic和BMSCsmiR-673-5p-inhibitor構建
        1.4.4 外泌體的提取
        1.4.5 細胞的分組及處理
        1.4.6 免疫熒光技術定性評估各組共培養(yǎng)BMSCs表達
        1.4.7 RT-PCR方法檢測各組共培養(yǎng)BMSCs內(nèi)α-actin、Cx43、Desmin、cTnT的表達
        1.4.8 根據(jù)基因庫推測miRNA-673-5p的靶基因
        1.4.9 Western blot檢測TSC-1、ERK1/2、Mef2c的蛋白表達
    1.5 主要觀察指標
    1.6 統(tǒng)計學分析
2 結果Results
    2.1 小鼠BMSCs中CD29、CD44及SCA-1的表達
    2.2 慢病毒轉(zhuǎn)染48h后小鼠BMSCs中GATA-4的表達
    2.3 采用免疫熒光技術定性評估BMSCs表達α-actin、Cx43、Desmin、cTnT情況
    2.4 RT-PCR檢測BMSCs中心肌特異性抗原cTnT、α-actin、Cx43、Desmin及TSC-1、ERK1/2、Mef2c蛋白表達
        2.4.1 BMSCs內(nèi)心肌特異性抗原cTnT、α-actin、Cx43、Desmin表達
        2.4.2 BMSCs內(nèi)TSC-1、ERK1/2、Mef2c表達水平
3 討論Discussion


【參考文獻】：
期刊論文
[1]過表達GATA-4小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞向心肌細胞分化的初步探討[J]. 賀繼剛,韓金秀,李貝貝,李宏遠,嚴丹.  臨床心血管病雜志. 2018(02)
[2]過表達GATA-4小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞修復心肌損傷的效果研究[J]. 賀繼剛,韓金秀,李貝貝,李宏遠,李洪榮,嚴丹.  中國全科醫(yī)學. 2018(02)
[3]過表達GATA-4骨髓間充質(zhì)干細胞通過外排體修復心肌損傷的機制[J]. 賀繼剛,韓金秀,李貝貝,李宏遠,李洪榮,撒亞蓮,嚴丹.  臨床心血管病雜志. 2017(12)
[4]采用高速離心及ExoQuick-TC法提取小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞來源外泌體比較及鑒定[J]. 韓金秀,李宏遠,撒亞蓮,嚴丹,賀繼剛.  安徽醫(yī)科大學學報. 2017(04)
[5]外排體的研究概況[J]. 賀繼剛,王平,李洪榮.  醫(yī)學綜述. 2015(18)



本文編號：3427589