發(fā)布時(shí)間：2021-09-25 19:10

　　禽腺病毒血清4型（Fowl Adenovirus serotype 4,FAdV-4）屬于Ⅰ亞群禽腺病毒。對FAdV-4的研究可追溯至1971年。但是由于之前發(fā)現(xiàn)的FAdV-4毒株都屬于低致病性的腺病毒,因此對其的研究進(jìn)度一直處于較慢狀態(tài)。2015年由FAdV-4引起的肝炎-心包積液綜合征（Hepatitis Hydropericardium Syndrome,HHS）在山東、河南、浙江等地大面積爆發(fā),對華東地區(qū)的家禽養(yǎng)殖業(yè)造成了嚴(yán)重的打擊,這引起了中國乃至國際社會對FAdV-4的重視。對FAdV-4的Fiber進(jìn)行反向遺傳改造得到重組病毒。為研究兩個(gè)Fiber對F AdV-4的復(fù)制增殖和毒力影響,分別構(gòu)建了刪除Fiber1的FAV4XF1GFP和刪除F iber2的FAV4XF2GFP重組病毒。結(jié)果表明FAV4XF1GFP可以拯救但不能正常復(fù)制增殖。用pcDNA3-FAV4F1輔助時(shí),FAV4XF1GFP可以復(fù)制增殖。FAV4XF2GF P可以正常復(fù)制增殖,但其復(fù)制增殖能力減弱。研究Fiber Knob蛋白對FAdV-4感染細(xì)胞過程的阻斷作用。本研究以人5型腺病毒為載體,構(gòu)建真核表達(dá)... 

【文章來源】：青島科技大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：97 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

穿梭質(zhì)粒pMD-FAV4Fs的構(gòu)建流程圖

Fiber1與Fiber2在禽腺病毒4型（FAdV-4）細(xì)胞培養(yǎng)中的作用研究282.3.1.1PCR片段擴(kuò)增PCR分別得到2999和2699bp，均與預(yù)期大小相符。見圖2-4。圖2-4PCR片段電泳圖Fig2-4electropherogramofPCRfragment注：MH：λDNA/HindIIIMarker；1:2999bp；2：2699bp2.3.1.2穿梭質(zhì)粒pMD-FAV4Fs的鑒定小提得到4管質(zhì)粒，分別PvuII鑒定，得到三條片段，分別為544,2364,2699bp，均與預(yù)期大小相符。見圖2-5。對酶切正確的質(zhì)粒進(jìn)行測序，測序結(jié)果與預(yù)期相符。將鑒定正確的質(zhì)粒命名為pMD-FAV4Fs。圖2-5pMD-FAV4Fs的酶切鑒定電泳圖Fig2-5DigestionidentificationelectrophoretogramofpMD-FAV4Fs注：MH：λDNA/HindIIIMarker；1-4：pMD-FAV4Fs#1-4PvuII；MD：DL2000Marker2.3.2穿梭質(zhì)粒pMD-FAV4XF1的構(gòu)建及鑒定

Fiber1與Fiber2在禽腺病毒4型（FAdV-4）細(xì)胞培養(yǎng)中的作用研究282.3.1.1PCR片段擴(kuò)增PCR分別得到2999和2699bp，均與預(yù)期大小相符。見圖2-4。圖2-4PCR片段電泳圖Fig2-4electropherogramofPCRfragment注：MH：λDNA/HindIIIMarker；1:2999bp；2：2699bp2.3.1.2穿梭質(zhì)粒pMD-FAV4Fs的鑒定小提得到4管質(zhì)粒，分別PvuII鑒定，得到三條片段，分別為544,2364,2699bp，均與預(yù)期大小相符。見圖2-5。對酶切正確的質(zhì)粒進(jìn)行測序，測序結(jié)果與預(yù)期相符。將鑒定正確的質(zhì)粒命名為pMD-FAV4Fs。圖2-5pMD-FAV4Fs的酶切鑒定電泳圖Fig2-5DigestionidentificationelectrophoretogramofpMD-FAV4Fs注：MH：λDNA/HindIIIMarker；1-4：pMD-FAV4Fs#1-4PvuII；MD：DL2000Marker2.3.2穿梭質(zhì)粒pMD-FAV4XF1的構(gòu)建及鑒定

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]禽腺病毒血清4型廣東株的分離鑒定及致病性研究[J]. 申祖杰,黎世彬,林華源,任行星,洪艷芬,廖佳鈺,張建民,廖明,徐成剛.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2018(06)
[2]一株高致病性血清4型禽腺病毒的分離與鑒定[J]. 梁廣成,高巍,謝泉,張建軍,邵紅霞,秦愛建,葉建強(qiáng).  中國家禽. 2016(19)
[3]山東省血清4型禽腺病毒的分離鑒定[J]. 于可響,黃兵,凌紅麗,龐運(yùn)倩,王友令,李峰,亓麗紅,宋敏訓(xùn).  中國動物傳染病學(xué)報(bào). 2016(05)
[4]5型和35型腺病毒纖毛蛋白的原核表達(dá)及活性驗(yàn)證[J]. 張文峰,張瓊宇,薄華本,邵紅偉,李曉程,王騰,黃樹林.  中國生物工程雜志. 2013(12)
[5]病毒空斑技術(shù)的研究和應(yīng)用概況[J]. 孟繼鴻,朱圣禾.  國外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊). 1989(01)

碩士論文
[1]禽腺病毒血清4型重組株的構(gòu)建及生物學(xué)特性研究[D]. 柴冬華.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2019
[2]血清4型Ⅰ群禽腺病毒的分離鑒定及流行病學(xué)調(diào)查[D]. 竇硯國.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[3]Ⅰ群禽腺病毒纖突knob區(qū)域基因序列同源性分析及病毒部分生物學(xué)特性研究[D]. 陳躍.揚(yáng)州大學(xué) 2009
[4]CELO禽腺病毒載體的構(gòu)建及fiber 1部分片段的原核表達(dá)[D]. 王鳳雪.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2005



本文編號：3410283