目的:初步探討人腺病毒36型（adenvirus type 36,Ad36）在誘導3T3-L1前脂肪細胞棕色化過程中的作用。方法:（1）對MDI誘導組（對照組）和MDI+Ad36誘導組（實驗組）第0、2、4、6、8天細胞進行BODIPY染色,觀察細胞成脂情況。（2）分別收取對照組與實驗組第0、2、4、6、8天細胞,利用實時熒光定量PCR檢測兩組棕色脂肪標記基因pgc1α、ucp1、fgf21,線粒體氧化磷酸化相關(guān)基因atp5o、cox5b、nd2 mRNA表達水平變化;Western blot檢測兩組上述基因的蛋白質(zhì)表達水平變化。（3）使用mTOR的抑制劑雷帕霉素后,BODIPY染色檢測細胞成脂情況;實時熒光定量PCR與Western blot檢測各組棕色脂肪標記基因pgc1α、ucp1、fgf21,線粒體氧化磷酸化相關(guān)基因atp5o、cox5b、nd2 mRNA與蛋白質(zhì)表達水平變化。結(jié)果:（1）在3T3-L1前脂肪細胞分化過程中,MDI誘導組細胞內(nèi)脂滴逐漸增多并匯集,而MDI+Ad36誘導組細胞內(nèi)脂滴先增多、匯集,在細胞分化的第4天加入Ad36后,與對照組相比,細胞內(nèi)脂滴大小逐漸減小... 

【文章來源】：新疆醫(yī)科大學新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

1a基因qRT-PCR結(jié)果

圖1 e1a基因qRT-PCR結(jié)果Fig.1 The expression of e1a gene注：e1a mRNA表達水平變化， *表示MDI+Ad36誘導組與第0天比較P<0.052 檢測 MDI 與 MDI+Ad36 誘導組細胞成脂情況分別使用MDI、MDI+Ad36對3T3-L1前脂肪細胞進行成脂誘導，對兩組第0、2、4、6、8天細胞進行BODIPY染色，激光共聚焦顯微鏡下出現(xiàn)綠色提示脂肪滴形成。結(jié)果顯示：兩組在成脂誘導的第2天時，顯微鏡下可見到脂滴出現(xiàn)，隨著細胞誘導分化，兩組細胞內(nèi)脂滴逐漸增多，但MDI+Ad36誘導組在誘導分化的第四天加入Ad36后，細胞內(nèi)脂滴逐漸減小。激光共聚焦顯微鏡采集圖像（1320x），（見圖2）。

新疆醫(yī)科大學碩士學位論文3 3T3-L1 前脂肪細胞分化過程中，MDI 誘導組與 MDI+Ad36 誘導組 pparg mRNA 與蛋白質(zhì)表達水平變化分別使用 MDI 與 MDI+Ad36 誘導 3T3-L1 前脂肪細胞分化，檢測兩組第 0、2、4、6、8 天 pparg mRNA 與蛋白質(zhì)表達水平變化。結(jié)果顯示：兩種誘導方法都能促進pparγ mRNA 與蛋白質(zhì)表達（見圖 3A、B）。表19 3T3-L1前脂肪細胞分化過程中pparg mRNA表達水平變化（x s）Table 19 Changes in expression levels of pparg mRNA during differentiation of 3T3-L1preadopocutes基因名稱 組別 第 0 天 第 2 天 第 4 天 第 6 天 第 8 天pparg MDI 0.99+0.04 2.53+0.13*5.46+0.31*8.69+0.46*10.33+1.89*MDI+Ad36 1.0+0.02 2.01+0.07#4.99+0.28#8.23+0.41#8.54+0.46#注：*、#分別表示MDI誘導組、MDI+Ad36誘導組與第0天比較P<0.05

【參考文獻】：
期刊論文
[1]腺病毒36型對PPARγ和CIDEC在脂肪細胞分化過程的調(diào)節(jié)作用[J]. 伊力亞斯·艾薩,梁小弟,焦誼,弓弦,努爾比耶·努爾麥麥提,陸劍飛,關(guān)亞群.  科技導報. 2016(03)
[2]腺病毒36感染對人脂肪源性間充質(zhì)干細胞PPARγ和adiponectin基因表達的影響[J]. 努爾比耶·努爾麥麥提,焦誼,伊力亞斯·艾薩,地力木拉提·艾克熱木,開色爾·喀米力,陸建飛,常曦,關(guān)亞群.  新疆醫(yī)科大學學報. 2015(05)
[3]Ad36感染對維吾爾族肥胖患者progranulin表達的調(diào)節(jié)作用[J]. 常曦,焦誼,陸劍飛,努爾比耶·努爾麥麥提,關(guān)亞群.  西安交通大學學報(醫(yī)學版). 2015(02)
[4]中國超重和肥胖造成相關(guān)慢性疾病的經(jīng)濟負擔研究[J]. 趙文華,翟屹,胡建平,王建生,楊正雄,孔靈芝,陳春明.  中華流行病學雜志. 2006(07)



本文編號：3391159