目的研究脂肪基質(zhì)細(xì)胞（Adipose-derived stromal cells,ADSC）源性神經(jīng)元是否具有正常神經(jīng)元的突觸內(nèi)吞功能。方法1應(yīng)用針吸法獲取成人皮下脂肪組織,提取ADSC培養(yǎng)及傳代。2選取第三代ADSC,采用β巰基乙醇（β-mercaptoethanol,β-ME）誘導(dǎo)分化為神經(jīng)元,將細(xì)胞分為ADSC組、1h、3h、5h、8h組。3掃描電子顯微鏡（Scanning electron microscope,SEM）下觀察分化各組細(xì)胞的三維形態(tài)學(xué)特征。4 ADSC源性神經(jīng)元特異性標(biāo)志物檢測:免疫細(xì)胞化學(xué)法及Western-blotting法檢測各組細(xì)胞神經(jīng)元的特異性烯醇化酶（Neuron specific enolase,NSE）及微管相關(guān)蛋-2（Microtubule associated protein 2,MAP-2）的表達情況。5 ADSC源性神經(jīng)元突觸內(nèi)吞功能核心標(biāo)志物檢測:免疫細(xì)胞化學(xué)法、免疫熒光雙標(biāo)法以及Western-blotting法定性、定位和定量檢測各組細(xì)胞中神經(jīng)元內(nèi)吞作用核心蛋白銜接蛋白-2（AP-2）、網(wǎng)格蛋白（Clathrin）、吞蛋白（Endo... 

【文章來源】：華北理工大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

ADSC誘導(dǎo)后向神經(jīng)元分化過程中細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化特征

華北理工大學(xué)碩士學(xué)位論文-20-表6ADSC誘導(dǎo)后向神經(jīng)元分化過程中NSE和MAP-2細(xì)胞陽性表達率結(jié)果（%）組別nNSEMAP-2ADSC組150Δ0Δ1h組1544.73±6.12Δ42.96±6.60Δ3h組1573.41±2.89Δ73.61±3.97Δ5h組1588.87±2.7687.08±5.158h組1583.78±4.74Δ81.24±4.83ΔF值1332.584895.378P值<0.001<0.001注：n代表取15個樣本；Δ表示兩兩比較時各組與5h組與相比P<0.05。2）ADSC誘導(dǎo)分化為神經(jīng)元過程中NSE和MAP-2的表達水平檢測結(jié)果ADSC組未見NSE和MAP-2的表達，誘導(dǎo)1h、3h、5h、8h組均見NSE和MAP-2表達，且各組的表達量均有明顯差異（F=524.334、F=425.090,均P<0.001）。在1h組時的NSE和MAP-2的表達水平明顯低于3h組（均P<0.05），3h組明顯低于5h組（均P<0.001），5h組明顯高于8h組（均P<0.05）。（見圖6，表7）A—NSE蛋白表達水平；B—MAP-2蛋白表達水平。圖6Western-blotting法檢測ADSC誘導(dǎo)后向神經(jīng)元分化過程中NSE和MAP-2表達水平表7ADSC誘導(dǎo)后向神經(jīng)元分化過程中NSE和MAP-2表達水平的檢測結(jié)果（%）組別nNSEMAP-2ADSC組80Δ0Δ1h組80.24±0.03Δ0.28±0.04Δ3h組80.28±0.02Δ0.39±0.03Δsxsx

華北理工大學(xué)碩士學(xué)位論文-22-A1-A5、B1-B5、C1-C5、D1-D5、E1-E5—ADSC組及誘導(dǎo)各組AP-2、Clathrin、Endophilin、Dynamin、Hsc70表達情況；A1-E1—ADSC組無陽性表達；A2-A5、B2-B5、C2-C5、E2-E5—誘導(dǎo)1h、3h、5h、8h時均見位于胞體及突起部位的各蛋白陽性表達。（LM,×200）圖7免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測ADSC誘導(dǎo)后向神經(jīng)元分化過程中AP-2、Clathrin、Endophilin、Dynamin、Hsc70的表達情況2）ADSC誘導(dǎo)分化為神經(jīng)元過程中NSE與AP-2、Clathrin、Endophilin、Dynamin、Hsc70的共同表達特征檢測結(jié)果ADSC組未見NSE與AP-2、Clathrin、Endophilin、Dynamin、Hsc70共陽性表達細(xì)胞。誘導(dǎo)1h、3h、5h、8h組均見NSE與AP-2、Clathrin、Endophilin、Dynamin、Hsc70共陽性表達細(xì)胞。在各時間組的細(xì)胞共陽性表達率均有明顯差異（F=2029.768、F=2663.668、F=2430.583、F=1430.623、F=1357.427,均P<0.001），其中1h組細(xì)胞共

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本文編號：3381529