線粒體外膜介導(dǎo)線粒體代謝和遺傳系統(tǒng)與真核細(xì)胞其余組分之間的許多相互作用,因此,線粒體外膜蛋白在細(xì)胞器遺傳和形態(tài)中起關(guān)鍵作用。大規(guī)模定位研究發(fā)現(xiàn)粟酒裂殖酵母蛋白Mrz1定位于線粒體和細(xì)胞核,進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)Mrz1定位于線粒體外膜與細(xì)胞核,其RING指結(jié)構(gòu)域與泛素蛋白酶體系統(tǒng)（UPS）有相關(guān)聯(lián)系,但蛋白功能未知。本研究通過免疫印記分析方法檢測到Mrz1在細(xì)胞生長后期蛋白表達(dá)水平降低,q RT-PCR方法檢測到mrz1在細(xì)胞全生長期轉(zhuǎn)錄表達(dá)量相對穩(wěn)定,推測Mrz1的穩(wěn)定性可能與翻譯后修飾有關(guān)系。UPS是細(xì)胞調(diào)節(jié)其蛋白質(zhì)組的主要手段,蛋白酶體抑制劑MG132處理細(xì)胞會使得細(xì)胞中泛素化蛋白累積,進(jìn)一步用蛋白酶體抑制劑MG132處理酵母細(xì)胞后,發(fā)現(xiàn)Mrz1的后期蛋白表達(dá)量上升,因此認(rèn)為UPS可能參與了Mrz1的降解表達(dá)調(diào)控。為了更好地了解Mrz1是如何發(fā)生泛素化的,我們獲得10種粟酒裂殖酵母非必需的E2泛素結(jié)合酶基因敲除菌株,并利用免疫印記分析方法來檢測E2泛素結(jié)合酶基因敲除菌株中Mrz1的蛋白水平,發(fā)現(xiàn)只有當(dāng)基因ubc13缺失后,Mrz1在細(xì)胞生長后期的蛋白水平部分恢復(fù),由此推測Ubc13參與了... 

【文章來源】：南京師范大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

泛素-蛋白酶體系統(tǒng)（UPS）參與線粒體蛋白調(diào)控的示意圖[34]

第二章粟酒裂殖酵母中Mrz1結(jié)構(gòu)分析與缺失后的表型研究13圖2.1Mrz1的氨基酸序列與蛋白結(jié)構(gòu)分析圖A：Mrz1(S.pombe)，RING1(Homosapiens)，RNF146(Homosapiens)的氨基酸序列比對，藍(lán)色箭頭標(biāo)記部分為RING指結(jié)構(gòu)域共有序列。圖B：Mrz1預(yù)測的RING指結(jié)構(gòu)域（綠色）與已報道的RING指結(jié)構(gòu)域晶體結(jié)構(gòu)（藍(lán)色）對比。圖C：Mrz1的卡通結(jié)構(gòu)預(yù)測圖D：Mrz1的三維結(jié)構(gòu)預(yù)測。藍(lán)色為RING指結(jié)構(gòu)域，綠色為蛋白其他組分，黑球為Zn離子。Figure2.1AminoacidsequenceandproteinsstructureanalysisofMrz1.(A)AminoacidsequencealignmentofMrz1fromS.pombe,RING1andRNF146fromHomosapiens.(B)ComparisonofthecrystalstructureoftheRINGfingerdomainpredictedbyMrz1(green)withthereportedRINGfingerdomain(blue).(C)ThecartoonstructurepredictionofMrz1,(D)Thethree-dimensionalstructurepredictionofMrz1,blueshowstheRINGfingerdomain,greenshowstheothercomponentsoftheprotein,andblackballsshowtheZnions.圖2.2Mrz1蛋白結(jié)構(gòu)圖Figure2.2Mrz1structurediagram

第二章粟酒裂殖酵母中Mrz1結(jié)構(gòu)分析與缺失后的表型研究13圖2.1Mrz1的氨基酸序列與蛋白結(jié)構(gòu)分析圖A：Mrz1(S.pombe)，RING1(Homosapiens)，RNF146(Homosapiens)的氨基酸序列比對，藍(lán)色箭頭標(biāo)記部分為RING指結(jié)構(gòu)域共有序列。圖B：Mrz1預(yù)測的RING指結(jié)構(gòu)域（綠色）與已報道的RING指結(jié)構(gòu)域晶體結(jié)構(gòu)（藍(lán)色）對比。圖C：Mrz1的卡通結(jié)構(gòu)預(yù)測圖D：Mrz1的三維結(jié)構(gòu)預(yù)測。藍(lán)色為RING指結(jié)構(gòu)域，綠色為蛋白其他組分，黑球為Zn離子。Figure2.1AminoacidsequenceandproteinsstructureanalysisofMrz1.(A)AminoacidsequencealignmentofMrz1fromS.pombe,RING1andRNF146fromHomosapiens.(B)ComparisonofthecrystalstructureoftheRINGfingerdomainpredictedbyMrz1(green)withthereportedRINGfingerdomain(blue).(C)ThecartoonstructurepredictionofMrz1,(D)Thethree-dimensionalstructurepredictionofMrz1,blueshowstheRINGfingerdomain,greenshowstheothercomponentsoftheprotein,andblackballsshowtheZnions.圖2.2Mrz1蛋白結(jié)構(gòu)圖Figure2.2Mrz1structurediagram

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]糖尿病心肌中線粒體膜通透性轉(zhuǎn)化孔變化的研究進(jìn)展[J]. 程明月,郭海,鄭宏.  新醫(yī)學(xué). 2016(02)
[2]線粒體基因突變所致糖尿病發(fā)病機(jī)制及治療進(jìn)展[J]. 馬麗晶,徐勉.  醫(yī)學(xué)綜述. 2010(02)
[3]線粒體與腫瘤關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 王勉,張旭.  承德醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2009(03)



本文編號：3358832