為了研究植物液泡H+-ATPase c亞基VHA-c4基因在擬南芥響應(yīng)非生物脅迫中的作用,本研究構(gòu)建了擬南芥VHA-c4基因沉默載體,利用農(nóng)桿菌介導(dǎo),將線性化的沉默載體dsDNA片段整合在擬南芥基因組上,篩選獲得了能夠不同程度特異沉默VHA-c4基因的7個(gè)轉(zhuǎn)基因株系c4-1～c4-7,并對(duì)VHA-c4基因沉默效果最好的株系c4-2進(jìn)行NaCl、ABA、6%葡萄糖脅迫處理。結(jié)果顯示:在特定濃度梯度的NaCl處理后,沉默株系c4-2的主根相對(duì)伸長(zhǎng)量和種子萌發(fā)率都被明顯抑制,并且被抑制效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于野生型株系。然而,在特定濃度梯度的ABA和葡糖糖處理后,沉默株系c4-2的主根相對(duì)伸長(zhǎng)量和種子的萌發(fā)率雖然也都有一定程度的抑制,但是其被抑制效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于野生型擬南芥。結(jié)果顯示沉默了VHA-c4基因后,顯著降低了擬南芥對(duì)NaCl的耐受性,影響了其的生長(zhǎng)發(fā)育,然而對(duì)ABA和葡糖糖的抑制作用卻表現(xiàn)為很不敏感,這可能是因?yàn)镠⁺-ATPase在鹽脅迫信號(hào)通路和ABA信號(hào)通路中起著不同的（正負(fù)）調(diào)控功能。 

【文章來(lái)源】：基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2020,39(04)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【部分圖文】：

沉默株系中VHA-c4基因的表達(dá)水平檢測(cè)

通常在研究植物響應(yīng)ABA脅迫處理的過(guò)程中，也要研究植物響應(yīng)糖處理的實(shí)驗(yàn)，這是由于糖脅迫信號(hào)通路與ABA信號(hào)通路的相關(guān)性所致。本實(shí)驗(yàn)選擇了6%的葡萄糖葡作為糖脅迫材料用于實(shí)驗(yàn)，分別對(duì)擬南芥進(jìn)行24 h、48 h、72 h和96 h的脅迫處理。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：從24 h后開(kāi)始，基因沉默株系c4-2種子的萌發(fā)率與野生型株系種子的萌發(fā)率開(kāi)始出現(xiàn)區(qū)別，c4-2株系種子萌發(fā)率高于野生型，并且隨著糖處理時(shí)間的增加，野生型和基因沉默株系種子萌發(fā)率的區(qū)別也越明顯(圖5)。圖3 NaCl處理VHA-c4基因沉默株系種子萌發(fā)率的變化

NaCl處理VHA-c4基因沉默株系種子萌發(fā)率的變化

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3347309