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17β—雌二醇介導(dǎo)GPER/AKT途徑干預(yù)成骨細(xì)胞線(xiàn)粒體自噬的分子機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2021-08-11 15:08
  目的:自噬(autophagy)是當(dāng)細(xì)胞狀態(tài)為饑餓或應(yīng)激時(shí),細(xì)胞可通過(guò)自我消化胞內(nèi)多余或反常的成分,進(jìn)而得取養(yǎng)分以促使內(nèi)環(huán)境處于穩(wěn)態(tài)的過(guò)程,自噬在真核細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中廣泛存在,適度自噬,可促進(jìn)蛋白質(zhì)和細(xì)胞器的循環(huán)利用,并且對(duì)促使細(xì)胞功能正常和細(xì)胞存活有不可忽視的價(jià)值;但是,如果細(xì)胞自噬過(guò)度,細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)吞噬自身的細(xì)胞器而死亡,F(xiàn)如今,有關(guān)自噬和程序性細(xì)胞死亡,分子生物和細(xì)胞生物學(xué)家的認(rèn)知尚停留于初級(jí)水平。在國(guó)內(nèi),有關(guān)細(xì)胞自噬等方面的探索更為少見(jiàn),且常常拘泥于其在腫瘤、心血管、神經(jīng)退行性疾病變等方面的研究,尚未發(fā)現(xiàn)自噬與成骨細(xì)胞相關(guān)的研究。骨代謝過(guò)程中,激素調(diào)節(jié)、生長(zhǎng)因子、神經(jīng)系統(tǒng)與骨生長(zhǎng)和骨吸收的全部調(diào)節(jié)過(guò)程,共同形成調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)。雌激素對(duì)骨代謝和保持骨量正常等方面,具有調(diào)節(jié)作用。通過(guò)文獻(xiàn)表明,雌激素匱乏使成骨細(xì)胞增殖異常,并使其功能受損。在人體諸多組織器官內(nèi),雌激素在調(diào)節(jié)生理、病理等方面意義巨大。雌激素受體α(estrogen receptorα,ERα)和雌激素受體β(estrogen receptor β,ERβ)是雌激素的主要受體,轉(zhuǎn)錄因子位于細(xì)胞核,會(huì)與雌激素反應(yīng)元件相結(jié)合,進(jìn)而... 

【文章來(lái)源】:中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】:84 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

17β—雌二醇介導(dǎo)GPER/AKT途徑干預(yù)成骨細(xì)胞線(xiàn)粒體自噬的分子機(jī)制研究


7β-E2對(duì)GPERmRNA表達(dá)的影響

蛋白,細(xì)胞,梯度,濃度


中國(guó)醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文123結(jié)果3.117β-E2促進(jìn)小鼠成骨細(xì)胞MC3T3-E1中GPER的mRNA表達(dá)實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),17β-E2呈劑量依賴(lài)性促進(jìn)MC3T3-E1細(xì)胞中GPER的mRNA表達(dá)。在10-8M和10-7M組17β-E2促進(jìn)GPERmRNA的表達(dá)作用較為明顯,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,圖3.1)。圖3.117β-E2對(duì)GPERmRNA表達(dá)的影響3.217β-E2促進(jìn)小鼠成骨細(xì)胞MC3T3-E1GPER蛋白的表達(dá)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在MC3T3-E1成骨細(xì)胞中GPER蛋白有少量表達(dá)。17β-E2(10-7M)可以使GPER蛋白的表達(dá)程度顯著升高(p<0.05)。17β-E2對(duì)GPER蛋白表達(dá)的促進(jìn)作用能夠被GPER特異性抑制劑G15所抑制(圖3.2)。圖3.2MC3T3-E1細(xì)胞中GPER蛋白表達(dá)隨17β-E2濃度梯度變化情況

免疫熒光法,細(xì)胞質(zhì)


中國(guó)醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文133.317β-E2促進(jìn)小鼠成骨細(xì)胞MC3T3-E1細(xì)胞質(zhì)中GPER蛋白的表達(dá)免疫熒光結(jié)果也發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組相比,10-7M17β-E2能夠促使MC3T3-E1細(xì)胞質(zhì)中GPER蛋白表達(dá)升高(P<0.05),即紅色熒光顆粒數(shù)目增多(圖3.3)。圖3.3免疫熒光法觀察17β-E2對(duì)MC3T3-E1細(xì)胞質(zhì)中GPER表達(dá)的影響3.417β-E2抑制小鼠成骨細(xì)胞MC3T3-E1線(xiàn)粒體中自噬體的形成本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,對(duì)照組的小鼠成骨細(xì)胞MC3T3-E1中,細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核和細(xì)胞器的形態(tài)均表現(xiàn)正常,可見(jiàn)較少自噬小泡于細(xì)胞質(zhì)中。用10-7M17β-E2對(duì)MC3T3-E1細(xì)胞進(jìn)行處理24小時(shí),透射電子顯微鏡圖像結(jié)果為:同對(duì)照組相比,自噬小泡數(shù)量于MC3T3-E1細(xì)胞質(zhì)內(nèi)顯著減少。將MC3T3-E1細(xì)胞用10-7M17β-E2結(jié)合15μMG15做24小時(shí)的處理,透射電子顯微鏡圖像結(jié)果為:同對(duì)照組相比,MC3T3-E1細(xì)胞質(zhì)內(nèi)自噬小泡個(gè)數(shù)減少不顯著(圖3.4)。圖3.417β-E2對(duì)MC3T3-E1細(xì)胞質(zhì)內(nèi)自噬小泡形成的影響

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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本文編號(hào):3336383

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