17β—雌二醇介導(dǎo)GPER/AKT途徑干預(yù)成骨細(xì)胞線粒體自噬的分子機(jī)制研究
發(fā)布時間:2021-08-11 15:08
目的:自噬(autophagy)是當(dāng)細(xì)胞狀態(tài)為饑餓或應(yīng)激時,細(xì)胞可通過自我消化胞內(nèi)多余或反常的成分,進(jìn)而得取養(yǎng)分以促使內(nèi)環(huán)境處于穩(wěn)態(tài)的過程,自噬在真核細(xì)胞生長發(fā)育過程中廣泛存在,適度自噬,可促進(jìn)蛋白質(zhì)和細(xì)胞器的循環(huán)利用,并且對促使細(xì)胞功能正常和細(xì)胞存活有不可忽視的價值;但是,如果細(xì)胞自噬過度,細(xì)胞會出現(xiàn)吞噬自身的細(xì)胞器而死亡,F(xiàn)如今,有關(guān)自噬和程序性細(xì)胞死亡,分子生物和細(xì)胞生物學(xué)家的認(rèn)知尚停留于初級水平。在國內(nèi),有關(guān)細(xì)胞自噬等方面的探索更為少見,且常常拘泥于其在腫瘤、心血管、神經(jīng)退行性疾病變等方面的研究,尚未發(fā)現(xiàn)自噬與成骨細(xì)胞相關(guān)的研究。骨代謝過程中,激素調(diào)節(jié)、生長因子、神經(jīng)系統(tǒng)與骨生長和骨吸收的全部調(diào)節(jié)過程,共同形成調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)。雌激素對骨代謝和保持骨量正常等方面,具有調(diào)節(jié)作用。通過文獻(xiàn)表明,雌激素匱乏使成骨細(xì)胞增殖異常,并使其功能受損。在人體諸多組織器官內(nèi),雌激素在調(diào)節(jié)生理、病理等方面意義巨大。雌激素受體α(estrogen receptorα,ERα)和雌激素受體β(estrogen receptor β,ERβ)是雌激素的主要受體,轉(zhuǎn)錄因子位于細(xì)胞核,會與雌激素反應(yīng)元件相結(jié)合,進(jìn)而...
【文章來源】:中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省
【文章頁數(shù)】:84 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
7β-E2對GPERmRNA表達(dá)的影響
中國醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文123結(jié)果3.117β-E2促進(jìn)小鼠成骨細(xì)胞MC3T3-E1中GPER的mRNA表達(dá)實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),17β-E2呈劑量依賴性促進(jìn)MC3T3-E1細(xì)胞中GPER的mRNA表達(dá)。在10-8M和10-7M組17β-E2促進(jìn)GPERmRNA的表達(dá)作用較為明顯,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05,圖3.1)。圖3.117β-E2對GPERmRNA表達(dá)的影響3.217β-E2促進(jìn)小鼠成骨細(xì)胞MC3T3-E1GPER蛋白的表達(dá)本實驗結(jié)果表明,在MC3T3-E1成骨細(xì)胞中GPER蛋白有少量表達(dá)。17β-E2(10-7M)可以使GPER蛋白的表達(dá)程度顯著升高(p<0.05)。17β-E2對GPER蛋白表達(dá)的促進(jìn)作用能夠被GPER特異性抑制劑G15所抑制(圖3.2)。圖3.2MC3T3-E1細(xì)胞中GPER蛋白表達(dá)隨17β-E2濃度梯度變化情況
中國醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文133.317β-E2促進(jìn)小鼠成骨細(xì)胞MC3T3-E1細(xì)胞質(zhì)中GPER蛋白的表達(dá)免疫熒光結(jié)果也發(fā)現(xiàn),與對照組相比,10-7M17β-E2能夠促使MC3T3-E1細(xì)胞質(zhì)中GPER蛋白表達(dá)升高(P<0.05),即紅色熒光顆粒數(shù)目增多(圖3.3)。圖3.3免疫熒光法觀察17β-E2對MC3T3-E1細(xì)胞質(zhì)中GPER表達(dá)的影響3.417β-E2抑制小鼠成骨細(xì)胞MC3T3-E1線粒體中自噬體的形成本實驗結(jié)果顯示,對照組的小鼠成骨細(xì)胞MC3T3-E1中,細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核和細(xì)胞器的形態(tài)均表現(xiàn)正常,可見較少自噬小泡于細(xì)胞質(zhì)中。用10-7M17β-E2對MC3T3-E1細(xì)胞進(jìn)行處理24小時,透射電子顯微鏡圖像結(jié)果為:同對照組相比,自噬小泡數(shù)量于MC3T3-E1細(xì)胞質(zhì)內(nèi)顯著減少。將MC3T3-E1細(xì)胞用10-7M17β-E2結(jié)合15μMG15做24小時的處理,透射電子顯微鏡圖像結(jié)果為:同對照組相比,MC3T3-E1細(xì)胞質(zhì)內(nèi)自噬小泡個數(shù)減少不顯著(圖3.4)。圖3.417β-E2對MC3T3-E1細(xì)胞質(zhì)內(nèi)自噬小泡形成的影響
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]2016年《美國內(nèi)分泌醫(yī)師協(xié)會與美國內(nèi)分泌協(xié)會絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥診療指南》解讀[J]. 李靜,陳德才,王覃. 中國全科醫(yī)學(xué). 2017(08)
[2]雌激素受體β在乳腺癌生長中的作用研究進(jìn)展[J]. 陳風(fēng)飛,高穎生,孫立,袁勝濤. 藥學(xué)進(jìn)展. 2017(01)
[3]絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥骨折危險因素及中醫(yī)癥狀相關(guān)性研究[J]. 申浩,魏戌,謝雁鳴,楊靖,曾憲斌,易丹輝,虞鯤,康樹. 中國中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2017(01)
[4]促骨形成藥物干預(yù)骨質(zhì)疏松性骨折臨床研究進(jìn)展[J]. 辛力,林華. 中華骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病雜志. 2017(01)
[5]Inhibition of Autophagy by Estradiol Promotes Locomotor Recovery after Spinal Cord Injury in Rats[J]. Chao-Wei Lin,Bi Chen,Ke-Lun Huang,Yu-Sen Dai,Hong-Lin Teng. Neuroscience Bulletin. 2016(02)
[6]饑餓誘導(dǎo)下小鼠成骨細(xì)胞自噬與凋亡相互作用研究[J]. 朱文胤,陳倩倩,劉祁,周云,晏燕,曹軍. 川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2015(02)
[7]重組腺相關(guān)病毒介導(dǎo)VEGF和BMP雙基因共表達(dá)對兔早期激素性股骨頭壞死的修復(fù)作用[J]. 張晨,李興華,李苗,唐一侖,時志斌,黨曉謙,王坤正. 中華骨科雜志. 2014 (08)
[8]刺參酸性黏多糖對宮頸癌HeLa細(xì)胞凋亡及Bax、Bcl-2基因表達(dá)的影響[J]. 劉風(fēng)仙,宋揚(yáng). 實用醫(yī)學(xué)雜志. 2010(12)
[9]非基因型雌激素膜性受體GPR30在生后雌性大鼠海馬內(nèi)的發(fā)育學(xué)表達(dá)與亞細(xì)胞水平定位研究[J]. 趙承軍,鄧其躍,張東梅,蔡文琴,張吉強(qiáng). 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2009(01)
本文編號:3336383
【文章來源】:中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省
【文章頁數(shù)】:84 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
7β-E2對GPERmRNA表達(dá)的影響
中國醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文123結(jié)果3.117β-E2促進(jìn)小鼠成骨細(xì)胞MC3T3-E1中GPER的mRNA表達(dá)實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),17β-E2呈劑量依賴性促進(jìn)MC3T3-E1細(xì)胞中GPER的mRNA表達(dá)。在10-8M和10-7M組17β-E2促進(jìn)GPERmRNA的表達(dá)作用較為明顯,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05,圖3.1)。圖3.117β-E2對GPERmRNA表達(dá)的影響3.217β-E2促進(jìn)小鼠成骨細(xì)胞MC3T3-E1GPER蛋白的表達(dá)本實驗結(jié)果表明,在MC3T3-E1成骨細(xì)胞中GPER蛋白有少量表達(dá)。17β-E2(10-7M)可以使GPER蛋白的表達(dá)程度顯著升高(p<0.05)。17β-E2對GPER蛋白表達(dá)的促進(jìn)作用能夠被GPER特異性抑制劑G15所抑制(圖3.2)。圖3.2MC3T3-E1細(xì)胞中GPER蛋白表達(dá)隨17β-E2濃度梯度變化情況
中國醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文133.317β-E2促進(jìn)小鼠成骨細(xì)胞MC3T3-E1細(xì)胞質(zhì)中GPER蛋白的表達(dá)免疫熒光結(jié)果也發(fā)現(xiàn),與對照組相比,10-7M17β-E2能夠促使MC3T3-E1細(xì)胞質(zhì)中GPER蛋白表達(dá)升高(P<0.05),即紅色熒光顆粒數(shù)目增多(圖3.3)。圖3.3免疫熒光法觀察17β-E2對MC3T3-E1細(xì)胞質(zhì)中GPER表達(dá)的影響3.417β-E2抑制小鼠成骨細(xì)胞MC3T3-E1線粒體中自噬體的形成本實驗結(jié)果顯示,對照組的小鼠成骨細(xì)胞MC3T3-E1中,細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核和細(xì)胞器的形態(tài)均表現(xiàn)正常,可見較少自噬小泡于細(xì)胞質(zhì)中。用10-7M17β-E2對MC3T3-E1細(xì)胞進(jìn)行處理24小時,透射電子顯微鏡圖像結(jié)果為:同對照組相比,自噬小泡數(shù)量于MC3T3-E1細(xì)胞質(zhì)內(nèi)顯著減少。將MC3T3-E1細(xì)胞用10-7M17β-E2結(jié)合15μMG15做24小時的處理,透射電子顯微鏡圖像結(jié)果為:同對照組相比,MC3T3-E1細(xì)胞質(zhì)內(nèi)自噬小泡個數(shù)減少不顯著(圖3.4)。圖3.417β-E2對MC3T3-E1細(xì)胞質(zhì)內(nèi)自噬小泡形成的影響
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[5]Inhibition of Autophagy by Estradiol Promotes Locomotor Recovery after Spinal Cord Injury in Rats[J]. Chao-Wei Lin,Bi Chen,Ke-Lun Huang,Yu-Sen Dai,Hong-Lin Teng. Neuroscience Bulletin. 2016(02)
[6]饑餓誘導(dǎo)下小鼠成骨細(xì)胞自噬與凋亡相互作用研究[J]. 朱文胤,陳倩倩,劉祁,周云,晏燕,曹軍. 川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2015(02)
[7]重組腺相關(guān)病毒介導(dǎo)VEGF和BMP雙基因共表達(dá)對兔早期激素性股骨頭壞死的修復(fù)作用[J]. 張晨,李興華,李苗,唐一侖,時志斌,黨曉謙,王坤正. 中華骨科雜志. 2014 (08)
[8]刺參酸性黏多糖對宮頸癌HeLa細(xì)胞凋亡及Bax、Bcl-2基因表達(dá)的影響[J]. 劉風(fēng)仙,宋揚(yáng). 實用醫(yī)學(xué)雜志. 2010(12)
[9]非基因型雌激素膜性受體GPR30在生后雌性大鼠海馬內(nèi)的發(fā)育學(xué)表達(dá)與亞細(xì)胞水平定位研究[J]. 趙承軍,鄧其躍,張東梅,蔡文琴,張吉強(qiáng). 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2009(01)
本文編號:3336383
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