降膽固醇益生菌菌株及活性的研究
發(fā)布時間：2021-08-05 06:15
益生菌有益于人體健康,現已發(fā)現某些菌株具有降膽固醇功能,但尚對降膽固醇功能的研究存在不足。本論文中首先優(yōu)化膽固醇-MRS培養(yǎng)基及膽固醇的測定方法用于降膽固醇益生菌的篩選;接著從5株益生菌中篩選出具有較強降膽固醇功能的菌株,研究其發(fā)酵特性;并通過耐酸、耐膽鹽實驗,從中篩選出耐高酸性、高膽鹽環(huán)境的優(yōu)質菌株;進而對該菌株進行動物實驗,以確證其體內降膽固醇功效;最后從分子水平探討益生菌降膽固醇功能的遺傳特性。主要結果如下:（1）對膽固醇-MRS培養(yǎng)基進行優(yōu)化。對膽固醇粗溶液進行90℃熱水浴、渦旋、超聲處理,有助于制備澄清透明的膽固醇膠束溶液,接著對加入膽固醇膠束后的MRS培養(yǎng)基進行磁力攪拌,加速膽固醇在MRS中均勻、穩(wěn)定存在,有利于益生菌菌株進行長時間發(fā)酵降膽固醇體外實驗。（2）對膽固醇測定方法進行優(yōu)化。確定了優(yōu)化后的膽固醇提取步驟、皂化、除去MRS培養(yǎng)基中的Tween-80以及增加膽固醇溶液的加樣量都有利于增加改良后的OPA方法測定膽固醇-MRS發(fā)酵液中膽固醇的準確度。（3）利用優(yōu)化后的膽固醇-MRS培養(yǎng)基及膽固醇測定方法,從5株益生菌中篩選出3株膽固醇體外去除率約為20%的益生菌用于下一步...
【文章來源】：華南理工大學廣東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數】：125 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
膽固醇（膠束）溶液Fig.2-1Cholesterol(micelle)solution
華南理工大學工程碩士學位論文26圖2-1膽固醇（膠束）溶液Fig.2-1Cholesterol(micelle)solution注：第一排從左至右分別a、b、c組制備的膽固醇（膠束）溶液；第二排從左至右分別為d、e組制備的膽固醇膠束溶液由圖2-1可知，a組超聲處理30min后，溶液澄清透明，說明膽固醇在超聲作用下完全溶于冰乙酸；b組、c組超聲30min后有細小顆粒，處理50min后仍有絮狀懸浮物，而d組超聲處理30min后膽固醇完全溶解，無懸浮物產生，說明膽固醇膠束的制備必須同時使用蔗糖脂肪酸酯和Tween-80；e組較d組渾濁，超聲處理30min后無懸浮物產生，說明無水乙醇在制備膽固醇膠束的過程中也可以作為膽固醇溶劑使用。（2）五組膽固醇（膠束）溶液在MRS中的結果將制成的膽固醇（膠束）溶液加入至含有10mLMRS的試管內，每組有三支試管，37℃恒溫放置0h、2h、24h后的結果分別如圖2-2、圖2-3和圖2-4所示。圖2-2放置0h的MRS培養(yǎng)基Fig.2-2EachgroupofMRSmediumwasplacedfor0h注：從左至右分別為空白MRS培養(yǎng)基、a、b、c、d、e組膽固醇-MRS培養(yǎng)基；每組三支試管的膽固醇濃度從左至右分別為0.15mg/mL、0.20mg/mL和0.30mg/mL。圖2-3放置2h的MRS培養(yǎng)基Fig.2-3EachgroupofMRSmediumwasplacedfor2h
華南理工大學工程碩士學位論文26圖2-1膽固醇（膠束）溶液Fig.2-1Cholesterol(micelle)solution注：第一排從左至右分別a、b、c組制備的膽固醇（膠束）溶液；第二排從左至右分別為d、e組制備的膽固醇膠束溶液由圖2-1可知，a組超聲處理30min后，溶液澄清透明，說明膽固醇在超聲作用下完全溶于冰乙酸；b組、c組超聲30min后有細小顆粒，處理50min后仍有絮狀懸浮物，而d組超聲處理30min后膽固醇完全溶解，無懸浮物產生，說明膽固醇膠束的制備必須同時使用蔗糖脂肪酸酯和Tween-80；e組較d組渾濁，超聲處理30min后無懸浮物產生，說明無水乙醇在制備膽固醇膠束的過程中也可以作為膽固醇溶劑使用。（2）五組膽固醇（膠束）溶液在MRS中的結果將制成的膽固醇（膠束）溶液加入至含有10mLMRS的試管內，每組有三支試管，37℃恒溫放置0h、2h、24h后的結果分別如圖2-2、圖2-3和圖2-4所示。圖2-2放置0h的MRS培養(yǎng)基Fig.2-2EachgroupofMRSmediumwasplacedfor0h注：從左至右分別為空白MRS培養(yǎng)基、a、b、c、d、e組膽固醇-MRS培養(yǎng)基；每組三支試管的膽固醇濃度從左至右分別為0.15mg/mL、0.20mg/mL和0.30mg/mL。圖2-3放置2h的MRS培養(yǎng)基Fig.2-3EachgroupofMRSmediumwasplacedfor2h
【參考文獻】：
期刊論文
[1]高密度脂蛋白逆轉運膽固醇的分子生物學基礎[J]. 梅俊,徐鳳芹. 中國動脈硬化雜志. 2019(03)
[2]實驗性高脂血癥動物模型的研究進展[J]. 馬尚偉,高璦潔,趙玲娟,朱琳,崔遠武. 黑龍江醫(yī)學. 2018(11)
[3]基于高通量測序技術的新疆傳統(tǒng)干奶酪乳酸菌多樣性分析[J]. 趙順先,關統(tǒng)偉,向慧平,張國棟,張習超,歐夢瑩,林宜錦,王鵬昊. 四川農業(yè)大學學報. 2018(05)
[4]一株降膽固醇乳酸菌的篩選及其在模擬消化環(huán)境活性的研究[J]. 范穎,陳思涵,黨芳芳,王喆,滿朝新,姜毓君. 中國乳品工業(yè). 2018(09)
[5]傳統(tǒng)測序與高通量測序在稚魚食性分析中的比較[J]. 林先智,胡思敏,劉勝,黃暉. 應用生態(tài)學報. 2018(09)
[6]芒果源植物乳桿菌FMNP01的全基因組測序及序列分析[J]. 李雪飛,郭麗瓊,葉志偉,劉英麗,林俊芳. 中國食品學報. 2018(05)
[7]強化人群血脂分層管理和創(chuàng)新提出低密度脂蛋白膽固醇更低靶標[J]. 李建軍. 中華老年心腦血管病雜志. 2018(02)
[8]第二代高通量測序技術用于進口細菌型微生物肥料菌群分析[J]. 劉玉莉,魏霜,劉碧琳,鄞杰平,林利平. 安徽農業(yè)科學. 2017(28)
[9]植物甾醇及添加植物甾醇乳制品降低心腦血管疾病風險的功能性評價（英文）[J]. 明珠,陳慶森,張蕾,閆亞麗,趙培. 食品科學. 2017(17)
[10]3株益生菌體外降膽固醇能力及體內降血脂效果評價[J]. 韋云路,劉義,王瑤,孟祥飛,李平蘭. 食品科學. 2017(23)
博士論文
[1]基于高通量測序數據的遺傳調控元件識別及算法研究[D]. 張紹軍.哈爾濱工業(yè)大學 2014
[2]植物乳桿菌ST-Ⅲ全基因組序列分析及其對低聚果糖代謝通路的解析[D]. 陳臣.江南大學 2014
[3]意蜂哺育蜂與采集蜂頭部mRNAs與miRNAs表達譜Solexa測序比較分析及其調控網絡研究[D]. 劉芳.浙江大學 2012
[4]人源性益生菌降膽固醇機制及影響因素研究[D]. 郭春鋒.哈爾濱工業(yè)大學 2011
碩士論文
[1]降膽固醇乳酸菌的篩選及其體內降膽固醇作用[D]. 郭均.華南理工大學 2016
[2]基于高通量測序方法研究家蠶品種間產絲量差異[D]. 彭莉.西南大學 2016
[3]高效降膽固醇乳酸菌的篩選和全基因組測序分析[D]. 劉兆山.華南理工大學 2016
[4]幾種動物來源益生菌部分生物學特性的比較研究[D]. 劉釗熠.東北農業(yè)大學 2013
[5]降膽固醇功能乳酸菌的篩選及其特性的研究[D]. 姜華.南京農業(yè)大學 2010
[6]植物乳桿菌降膽固醇作用的研究[D]. 王歡.黑龍江大學 2010
[7]降膽固醇乳酸菌的篩選、鑒定及降解機制的研究[D]. 汪曉輝.浙江工商大學 2010
[8]具有降膽固醇功能益生菌的篩選[D]. 王巍.黑龍江大學 2009
[9]降膽固醇乳酸菌的研究[D]. 郭東起.大連工業(yè)大學 2008
[10]羅伊氏乳桿菌生物學特性及功能性發(fā)酵乳的研究[D]. 李正華.江南大學 2008
本文編號：3323232
【文章來源】：華南理工大學廣東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數】：125 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
膽固醇（膠束）溶液Fig.2-1Cholesterol(micelle)solution
華南理工大學工程碩士學位論文26圖2-1膽固醇（膠束）溶液Fig.2-1Cholesterol(micelle)solution注：第一排從左至右分別a、b、c組制備的膽固醇（膠束）溶液；第二排從左至右分別為d、e組制備的膽固醇膠束溶液由圖2-1可知，a組超聲處理30min后，溶液澄清透明，說明膽固醇在超聲作用下完全溶于冰乙酸；b組、c組超聲30min后有細小顆粒，處理50min后仍有絮狀懸浮物，而d組超聲處理30min后膽固醇完全溶解，無懸浮物產生，說明膽固醇膠束的制備必須同時使用蔗糖脂肪酸酯和Tween-80；e組較d組渾濁，超聲處理30min后無懸浮物產生，說明無水乙醇在制備膽固醇膠束的過程中也可以作為膽固醇溶劑使用。（2）五組膽固醇（膠束）溶液在MRS中的結果將制成的膽固醇（膠束）溶液加入至含有10mLMRS的試管內，每組有三支試管，37℃恒溫放置0h、2h、24h后的結果分別如圖2-2、圖2-3和圖2-4所示。圖2-2放置0h的MRS培養(yǎng)基Fig.2-2EachgroupofMRSmediumwasplacedfor0h注：從左至右分別為空白MRS培養(yǎng)基、a、b、c、d、e組膽固醇-MRS培養(yǎng)基；每組三支試管的膽固醇濃度從左至右分別為0.15mg/mL、0.20mg/mL和0.30mg/mL。圖2-3放置2h的MRS培養(yǎng)基Fig.2-3EachgroupofMRSmediumwasplacedfor2h
華南理工大學工程碩士學位論文26圖2-1膽固醇（膠束）溶液Fig.2-1Cholesterol(micelle)solution注：第一排從左至右分別a、b、c組制備的膽固醇（膠束）溶液；第二排從左至右分別為d、e組制備的膽固醇膠束溶液由圖2-1可知，a組超聲處理30min后，溶液澄清透明，說明膽固醇在超聲作用下完全溶于冰乙酸；b組、c組超聲30min后有細小顆粒，處理50min后仍有絮狀懸浮物，而d組超聲處理30min后膽固醇完全溶解，無懸浮物產生，說明膽固醇膠束的制備必須同時使用蔗糖脂肪酸酯和Tween-80；e組較d組渾濁，超聲處理30min后無懸浮物產生，說明無水乙醇在制備膽固醇膠束的過程中也可以作為膽固醇溶劑使用。（2）五組膽固醇（膠束）溶液在MRS中的結果將制成的膽固醇（膠束）溶液加入至含有10mLMRS的試管內，每組有三支試管，37℃恒溫放置0h、2h、24h后的結果分別如圖2-2、圖2-3和圖2-4所示。圖2-2放置0h的MRS培養(yǎng)基Fig.2-2EachgroupofMRSmediumwasplacedfor0h注：從左至右分別為空白MRS培養(yǎng)基、a、b、c、d、e組膽固醇-MRS培養(yǎng)基；每組三支試管的膽固醇濃度從左至右分別為0.15mg/mL、0.20mg/mL和0.30mg/mL。圖2-3放置2h的MRS培養(yǎng)基Fig.2-3EachgroupofMRSmediumwasplacedfor2h
【參考文獻】：
期刊論文
[1]高密度脂蛋白逆轉運膽固醇的分子生物學基礎[J]. 梅俊,徐鳳芹. 中國動脈硬化雜志. 2019(03)
[2]實驗性高脂血癥動物模型的研究進展[J]. 馬尚偉,高璦潔,趙玲娟,朱琳,崔遠武. 黑龍江醫(yī)學. 2018(11)
[3]基于高通量測序技術的新疆傳統(tǒng)干奶酪乳酸菌多樣性分析[J]. 趙順先,關統(tǒng)偉,向慧平,張國棟,張習超,歐夢瑩,林宜錦,王鵬昊. 四川農業(yè)大學學報. 2018(05)
[4]一株降膽固醇乳酸菌的篩選及其在模擬消化環(huán)境活性的研究[J]. 范穎,陳思涵,黨芳芳,王喆,滿朝新,姜毓君. 中國乳品工業(yè). 2018(09)
[5]傳統(tǒng)測序與高通量測序在稚魚食性分析中的比較[J]. 林先智,胡思敏,劉勝,黃暉. 應用生態(tài)學報. 2018(09)
[6]芒果源植物乳桿菌FMNP01的全基因組測序及序列分析[J]. 李雪飛,郭麗瓊,葉志偉,劉英麗,林俊芳. 中國食品學報. 2018(05)
[7]強化人群血脂分層管理和創(chuàng)新提出低密度脂蛋白膽固醇更低靶標[J]. 李建軍. 中華老年心腦血管病雜志. 2018(02)
[8]第二代高通量測序技術用于進口細菌型微生物肥料菌群分析[J]. 劉玉莉,魏霜,劉碧琳,鄞杰平,林利平. 安徽農業(yè)科學. 2017(28)
[9]植物甾醇及添加植物甾醇乳制品降低心腦血管疾病風險的功能性評價（英文）[J]. 明珠,陳慶森,張蕾,閆亞麗,趙培. 食品科學. 2017(17)
[10]3株益生菌體外降膽固醇能力及體內降血脂效果評價[J]. 韋云路,劉義,王瑤,孟祥飛,李平蘭. 食品科學. 2017(23)
博士論文
[1]基于高通量測序數據的遺傳調控元件識別及算法研究[D]. 張紹軍.哈爾濱工業(yè)大學 2014
[2]植物乳桿菌ST-Ⅲ全基因組序列分析及其對低聚果糖代謝通路的解析[D]. 陳臣.江南大學 2014
[3]意蜂哺育蜂與采集蜂頭部mRNAs與miRNAs表達譜Solexa測序比較分析及其調控網絡研究[D]. 劉芳.浙江大學 2012
[4]人源性益生菌降膽固醇機制及影響因素研究[D]. 郭春鋒.哈爾濱工業(yè)大學 2011
碩士論文
[1]降膽固醇乳酸菌的篩選及其體內降膽固醇作用[D]. 郭均.華南理工大學 2016
[2]基于高通量測序方法研究家蠶品種間產絲量差異[D]. 彭莉.西南大學 2016
[3]高效降膽固醇乳酸菌的篩選和全基因組測序分析[D]. 劉兆山.華南理工大學 2016
[4]幾種動物來源益生菌部分生物學特性的比較研究[D]. 劉釗熠.東北農業(yè)大學 2013
[5]降膽固醇功能乳酸菌的篩選及其特性的研究[D]. 姜華.南京農業(yè)大學 2010
[6]植物乳桿菌降膽固醇作用的研究[D]. 王歡.黑龍江大學 2010
[7]降膽固醇乳酸菌的篩選、鑒定及降解機制的研究[D]. 汪曉輝.浙江工商大學 2010
[8]具有降膽固醇功能益生菌的篩選[D]. 王巍.黑龍江大學 2009
[9]降膽固醇乳酸菌的研究[D]. 郭東起.大連工業(yè)大學 2008
[10]羅伊氏乳桿菌生物學特性及功能性發(fā)酵乳的研究[D]. 李正華.江南大學 2008
本文編號：3323232
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