乳酸菌是益生菌的重要成員,具有促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)吸收、拮抗致病菌黏附定植、增強(qiáng)宿主免疫力和維持腸道穩(wěn)態(tài)等重要生理功能。黏附定植于腸上皮細(xì)胞是乳酸菌發(fā)揮益生功能的基礎(chǔ),亦是拮抗致病菌內(nèi)化、定植腸道的前提。目前,乳酸菌功能性組分及其作用分子機(jī)制研究甚少。乳酸菌的表面蛋白是其與外界直接接觸的物質(zhì),具有抑制致病菌內(nèi)化定植、調(diào)節(jié)宿主免疫等多種生理特性。因此,闡明乳酸菌表面蛋白在拮抗致病菌黏附、內(nèi)化和定植的內(nèi)在機(jī)制,將為豐富挖掘益生菌表面蛋白在調(diào)節(jié)胃腸道微生態(tài)及其機(jī)體免疫作用,提供重要科學(xué)依據(jù)。本文借助細(xì)胞和動(dòng)物模型,較為系統(tǒng)地探究了屎腸球菌WEFA23表面蛋白拮抗單核增生李斯特菌內(nèi)化定植分子機(jī)制,并借助分子生物學(xué)手段構(gòu)建其表面蛋白主要成分鳥氨酸氨甲�；D(zhuǎn)移酶（ornithine carbamoyltransferase,OTC）基因缺陷株,為功能實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證提供基礎(chǔ)材料。第一章緒論部分在闡述乳酸菌表面蛋白、單核增生李斯特菌以及基因重組技術(shù)的基礎(chǔ)上,對(duì)腸球菌拮抗單核增生李斯特菌的研究動(dòng)態(tài)進(jìn)行了簡(jiǎn)述,對(duì)屎腸球菌WEFA23的表面蛋白拮抗單核增生李斯特菌的內(nèi)化定植分子機(jī)制進(jìn)行了展望。第二章探究了屎腸球菌WEFA23... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．２表面蛋白抑制單核增生李斯特菌內(nèi)化Ｃａｃｏ－２細(xì)胞作用；圖中沒有共同字母的組別顯??著不同，尸＜０．０５??

第二章屎腸球菌ＷＥＦＡ２３表面蛋白抑制單核增生李斯特菌內(nèi)化腸上皮細(xì)胞機(jī)制??２．４實(shí)驗(yàn)結(jié)果??２．４．１表面蛋白對(duì)Ｃａｃｏ－２細(xì)胞增殖活性影響??以Ｃａｃｏ－２細(xì)胞為模型，ＳＬＰ為研究對(duì)象，利用ＣＣＫ－８法檢測(cè)細(xì)胞的增殖活??性。不同濃度的ＳＬＰ作用于Ｃａｃｏ－２細(xì)胞后増殖效果如圖２．１所示。結(jié)果表明２５－??８００?ｐｇ／ｍＬ?ＳＬＰ對(duì)Ｃａｃｏ－２細(xì)胞增殖均無顯著影響，表明ＳＬＰ對(duì)Ｃａｃｏ－２細(xì)胞無毒??性。選用５０、１００和２０〇ｎｇ／ｍＬ的ＳＬＰ進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。??１５０－??ｉ：ｉｌｌｌ??０?２５?５０?１００?２００?４００?８００??ＣＯＮＣＥＮＴＲＡＴＩＯＮ?（＾ｇ／ｍＬ）??圖２．１不同濃度表面蛋白對(duì)Ｃａｃｏ－２細(xì)胞增殖的影響??Ｆｉｇｕｒｅ?２．１?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ＳＬＰ?ｏｎ?Ｃａｃｏ－２?ｃｅｌｌｓ?ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ．??２．４．２表面蛋白抑制單核增生李斯特菌內(nèi)化Ｃａｃｏ－２細(xì)胞??為了研究ＳＬＰ對(duì)內(nèi)化Ｃａｃｏ－２細(xì)胞的影響，采用競(jìng)爭(zhēng)、排斥和替換實(shí)驗(yàn)??進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果如圖２．２所示，ＳＬＰ僅在排斥實(shí)驗(yàn)中顯著拮抗內(nèi)化Ｃａｃｏ－２細(xì)??胞，減少胞內(nèi)單核增生李斯特菌數(shù)量（尸＜０．０５）。??虧６１??彡??—聞上?—險(xiǎn)?ｈ?二?ｊ�。�?＾２?Ｃｏｎｔｒｏｌ??Ｓ?４■目圈■?蘭聞?＿?＝?：；：?Ｈ?Ｓ?Ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｏｎ?ａｓｓａｙ??Ｔ?三?ｒａ?■?三尚■?＝?Ｈ?ＫＢｉ?Ｄｉｓｐｌａｃｅｍｅｎｔ?ａｓｓａｙ??§?＝?ｍ?Ｈ?三會(huì)：■■?Ｅｘｃｌｕｓｉｏｎ?ａｓｓａｙ??�。誓_丨ｉｉ，Ｕ?ｋｉ，＿＿??５０?＾ｉｇ

圖２．４單核增生李斯特菌相關(guān)毒力因子轉(zhuǎn)錄水平變化；??（Ａ）?ｉｎｉ?Ａ＼?ｉＢ）?ｉｎｉ?Ｂ；?ＣＣ）?ａｃｔ?Ａ；?（Ｄ）?ｐｒｆＡ＼?（Ｅ）?ｐｉｃ?Ａ；?（Ｆ）?ｐｉｃ?Ｂ；??圖中沒有共同字母的組別顯著不同，尸＜０．０５??Ｆｉｇｕｒｅ?２．４?

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]屎腸球菌WEFA23拮抗單核增生李斯特菌黏附定植的作用研究[D]. 許雄鵬.南昌大學(xué) 2018



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