截止2019年,我國寵物貓數(shù)量已達(dá)到7000多萬只,寵物貓疫病防控面臨了極大的挑戰(zhàn)。臨床上,以貓泛白細(xì)胞減少癥病毒（FPV）引起的貓泛白細(xì)胞減少癥和貓杯狀病毒（FCV）引起的貓傳染性鼻結(jié)膜炎最為流行。盡管對兩種病毒病原學(xué)研究已經(jīng)數(shù)十年。但它們對宿主天然免疫應(yīng)答的影響卻研究甚少。在本研究中,我們首先利用建立的貓干擾素信號通路研究平臺(tái)證明了 FPV感染不能夠激活宿主細(xì)胞Ⅰ型干擾素轉(zhuǎn)錄,并且可以拮抗仙臺(tái)病毒（SeV）對宿主細(xì)胞Ⅰ型干擾素轉(zhuǎn)錄的激活作用。隨后通過篩選FPV病毒蛋白,發(fā)現(xiàn)只有FPV NS2蛋白能夠抑制宿主Ⅰ型干擾素的轉(zhuǎn)錄,并證明了 FPV NS2蛋白通過阻斷IRF3信號通路抑制SeV誘導(dǎo)的IFN-β的產(chǎn)生。進(jìn)一步研究表明FPV感染細(xì)胞后NS2蛋白通過結(jié)合宿主TBK1分子,抑制其被STING分子招募,從而阻止STING介導(dǎo)的TBK1對IRF3的磷酸化,達(dá)到抑制IRF3通路對I型干擾素轉(zhuǎn)錄激活的目的。在FCV的研究中,我們發(fā)現(xiàn)FCV 2280株具有拮抗IFN-β的抗病毒作用。FCV 2280感染抑制了 IFN誘導(dǎo)的ISRE啟動(dòng)子的激活和ISGs的轉(zhuǎn)錄。機(jī)理分析表明,FCV 2280感... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．２直徑２５ｎｍ無囊膜的ＦＰＶ衣殼原子模型問

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院博士后出站報(bào)告?第一章緒論??Ｉ?，?．１??圖１．３?ＦＣＶ病毒電鏡觀察圖片和粒子模式圖??Ｆｉｇ．?１．３?Ｔｈｅ?ｅｌｅｃｔｒｏｎ?ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ?ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＦＣＶ?ａｎｄ?ｔｈｅ?ｄｉａｇｒａｍ?ｐａｒｔｉｃｌｅ?ｍｏｄｅｌ．??１．２．２貓杯狀病毒基因結(jié)構(gòu)??ＦＣＶ的基因組為一條單股正鏈不分節(jié)段的ＲＮＡ分子，大小在７．７ｋｂ??左右，在其５’端結(jié)合有基因組鏈接蛋白ＶＰｇ，ＶＰｇ之后是５’ＵＴＲ，隨后??是三個(gè)開放閱讀框（Ｏｐｅｎ?Ｒｅａｄｉｎｇ?Ｆｒａｍｅ，〇ＲＦ），分別為０ＲＦ１、ＯＲＦ２??和０ＲＦ３。ＦＣＶ的ＯＲＦ１位于基因組ＲＮＡ的５’端，起始位點(diǎn)是從第２０??位到第５３１１位核苷酸，是位于５’１７０１后的第一個(gè)０１１？，０１１？１編碼？（＾／??的非結(jié)構(gòu)蛋白，ＯＲＦ１首先翻譯出一個(gè)２００?ｋＤａ的多聚蛋白，隨后在蛋??白酶聚合酶（Ｐｒｏｔｅａｓｅ?Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ，ＰＰ）的作用下能夠?qū)⒍嗑鄣鞍浊懈??成單獨(dú)非結(jié)構(gòu)蛋白，ＦＣＶ共有６個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白，依次為５．６?ｋＤａ的ｐ５．６、??３２?ｋＤａ?的?ｐ３２、３８．９?ｋＤａ?的?ｐ３９?（ＮＴＰａｓｅ）、３０．１?ｋＤ?的?ｐ３０、１２．７?ｋＤａ??的?ＶＰｇ?和?７５．７?ｋＤａ?的?ｐ７６?（Ｐｒｏ－Ｐｏｌ）?［２９－３Ｑ］。ＦＣＶ?的?ＯＲＦ２?和?ＯＲＦ３?分??別編碼主要結(jié)構(gòu)蛋白ＶＰ１和次要結(jié)構(gòu)蛋白ＶＰ２。ＶＰ１和ＶＰ２是經(jīng)一條??亞基因組基因翻譯得到的。ＯＲＦ２編碼的衣殼蛋白前體大小約為７３?ｋＤａ，??被ＰＰ切割成一個(gè)１４ｋＤａ大小的衣殼蛋白前導(dǎo)區(qū)和衣殼蛋白成熟區(qū)ＶＰ１，??大量成熟的ＶＰ１加

擾素刺??激應(yīng)答元件（ＩＳＲＥ）結(jié)合從而誘導(dǎo)千擾素刺激基因（ＩＳＧ）來源的幾百??個(gè)基因的表達(dá)，使細(xì)胞建立起抗病毒免疫反應(yīng)［７５］。??廣?４。??、、、??／?Ｉ叫Ｏ?蠢、、??廣——??（／?Ｙ?ｆ?ｄ？ＲＮＡ?＾??Ｓ?丨曬祕ＴＬＲ３＆＾?：?－＾－Ｌ｜?｝?ｏｇ?〇??香?ｉ?＾?／?ｉ＾ｉｉＳ?務(wù)?４?°??ＩｔＲＡｊ）?１?ｉｉ＾?ｐｉｗＳｉｌ?１１＃?１?！?＜ｇＳｉｐＳ）?Ｂａ—／?／??ｉｌＫＫｏｉｌ?ｈｌＫ沿紙?Ｉ?廣?，??圖１．４?Ｉ型干擾素信號通路模式圖??Ｆｉｇ．?１．４?Ｔｈｅ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ＩＦＮ－Ｉ?ｓｉｇｎａｌ?ｐａｔｈｗａｙ［７６］．??１．４病毒逃逸宿主Ｉ型干擾素應(yīng)答策略??鑒于Ｉ型干擾素強(qiáng)大的抗病毒作用，在病毒和宿主共進(jìn)化的過程中，??病毒要生存就必須編碼一些組分抑制宿主干擾素信號通路的激活。其??中，抑制干擾素轉(zhuǎn)錄是病毒逃逸Ｉ型干擾素的常用伎倆，如流感病毒編??碼的非結(jié)構(gòu)蛋白ＮＳ１、埃博拉病毒編碼的ＶＰ３５和丙型肝炎病毒編碼的??１３??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]貓杯狀病毒的分離鑒定及其對理化因素抵抗力的研究[J]. 黃倩倩,劉家森,田進(jìn),孔德生,曲連東.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2015(04)
[2]貓杯狀病毒分子生物學(xué)特征及研究進(jìn)展[J]. 謝守玉,張健騑,吳健敏,白安斌,向華.  中國動(dòng)物傳染病學(xué)報(bào). 2010(06)
[3]消毒劑滅活貓杯狀病毒中和劑鑒定試驗(yàn)方法[J]. 薄玉霞,Syed A.Sattar.  中國消毒學(xué)雜志. 2008(05)
[4]犬細(xì)小病毒病的病原學(xué)研究進(jìn)展[J]. 顏文卿,吳德峰,戴亞東,林永利.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2006(01)

碩士論文
[1]貓杯狀病毒蛋白酶-聚合酶蛋白關(guān)閉宿主基因表達(dá)機(jī)制的研究[D]. 黃佳培.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2020
[2]嵌合貓杯狀病毒F9株反向遺傳系統(tǒng)的建立及復(fù)制差異基因的篩選[D]. 左智敏.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 2019
[3]貓杯狀病毒2280毒株反向遺傳系統(tǒng)的建立及初步應(yīng)用[D]. 祖少坡.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[4]犬細(xì)小病毒四川株的分離鑒定與VP2結(jié)構(gòu)蛋白基因變異性研究[D]. 戈銳.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



本文編號：3290727