過氧化物酶（Peroxidase,POD）是一類廣泛存在于細(xì)菌,真菌,植物和動(dòng)物中的氧化還原酶,可利用過氧化氫來介導(dǎo)多種無機(jī)和有機(jī)底物的氧化。大多POD是單一多肽鏈與含F(xiàn)e（Ⅲ）-原卟啉IX輔基構(gòu)成的血紅素蛋白,多肽鏈分子須與血紅素結(jié)合才構(gòu)成全酶,血紅素輔基是POD電子傳遞的載體。III類POD是來源于植物的分泌型過氧化物酶,在胞質(zhì)中合成后可以轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞壁或液泡,參與多種生理功能,如機(jī)體內(nèi)毒性過氧化物的清除,細(xì)胞壁的合成,傷口愈合,生長(zhǎng)素合成及代謝等。已報(bào)道含血紅素輔基的蛋白（肌紅蛋白,細(xì)胞色素c等）可以在H₂O₂存在的條件下對(duì)DNA進(jìn)行氧化斷裂。PmPOD是來源于黍子中的一種含血紅素輔基的陽離子過氧化物酶,可以誘導(dǎo)結(jié)直腸癌細(xì)胞發(fā)生壞死性凋亡（Necroptosis）,PmPOD誘導(dǎo)的壞死性凋亡與PmPOD造成DNA的斷裂有關(guān)。因此本論文將著重研究PmPOD對(duì)DNA的斷裂及其機(jī)制。本研究首先利用瓊脂糖凝膠電泳技術(shù),以pBR322,pUC18和pGEM-T為底物,并結(jié)合DTT,NaN₃,以及二價(jià)金屬離子等試劑初步研究PmP... 

【文章來源】：山西大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

PmPOD的SDS-PAGE分析

圖 2.2 緩沖液 pH 值對(duì) PmPOD 切割 DNA 的影響cts of pH Buffers on DNA cleavage by PmPOD. PmPOD (3 pM) in different pH buffers at 37 °C fo% agarose gel electrophoresis. Plasmid DNA was used asent supercoiled circular, nicked circular, and liner f對(duì) PmPOD 切割 DNA 的影響 Tris-HCl（20 mM, pH 8.0）的緩沖液中研究了作用溫影響。結(jié)果如圖 2.3 所示，DNA 單獨(dú)在不同溫度下孵育加入 PmPOD 后，與對(duì)照組相比，隨著作用溫度的升高，呈現(xiàn)出溫度依賴性。考慮到 PmPOD 在抗腫瘤及其實(shí)驗(yàn)溫度。

圖 2.2 緩沖液 pH 值對(duì) PmPOD 切割 DNA 的影響ffects of pH Buffers on DNA cleavage by PmPOD. pGwith PmPOD (3 pM) in different pH buffers at 37 °C for 3by 1% agarose gel electrophoresis. Plasmid DNA was used as conresent supercoiled circular, nicked circular, and liner formy.溫度對(duì) PmPOD 切割 DNA 的影響在 Tris-HCl（20 mM, pH 8.0）的緩沖液中研究了作用溫度對(duì)A 的影響。結(jié)果如圖 2.3 所示，DNA 單獨(dú)在不同溫度下孵育不是加入 PmPOD 后，與對(duì)照組相比，隨著作用溫度的升高，P越強(qiáng)，呈現(xiàn)出溫度依賴性�？紤]到 PmPOD 在抗腫瘤及其它方作為實(shí)驗(yàn)溫度。


本文編號(hào)：3277131