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中國水仙NtTFL1-1和NtTFL1-2基因的克隆和表達

發(fā)布時間:2021-07-04 04:16
  中國水仙(Narcissus tazetta var. chinensis)是十大傳統(tǒng)名花之一,一般在冬季開花,為典型的年宵花卉,開花時間的局限使其應(yīng)用價值受到一定限制.水仙花球在夏季的休眠期進行花芽分化,是花期調(diào)控研究的重點階段,但目前對其開花機制和調(diào)控的研究尚處于起步階段. TFL1(TERMINAL FLOWER 1)是植物重要的開花相關(guān)基因,為了解該基因在中國水仙花芽分化和開花過程中的作用,以中國水仙‘金盞銀臺’為材料,利用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR,Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction)技術(shù)克隆中國水仙的TFL1基因NtTFL1-1和NtTFL1-2,對獲得的基因序列進行相關(guān)生物信息學(xué)分析,對該基因編碼蛋白進行亞細胞定位;利用熒光定量PCR技術(shù)對其在中國水仙花芽分化不同時期、不同器官類型中的差異表達情況進行測定.結(jié)果顯示NtTFL1-1開放閱讀框(open reading frame,ORF)共501個堿基對(bp,base pair),編碼166個氨基酸,NtTFL1-2的ORF共525 bp,編碼174個氨... 

【文章來源】:應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報. 2020,26(02)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:8 頁

【部分圖文】:

中國水仙NtTFL1-1和NtTFL1-2基因的克隆和表達


Nt TFL1-1和Nt TFL1-2基因擴增結(jié)果.

序列,水仙,植物,蛋白


將構(gòu)建好的p CAMBIA1302-Nt TFL1-1和p CAMBIA1302-N t T F L1-2重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌,經(jīng)菌液P C R驗證后挑選陽性克隆測序,結(jié)果顯示p CAMBIA1302-Nt TFL1-1和p CAMBIA1302-Nt TFL1-2載體成功構(gòu)建.將構(gòu)建好的p CAMBIA1302-Nt TFL1-1和p CAMBIA1302-Nt TFL1-2融合表達載體瞬時轉(zhuǎn)化到洋蔥內(nèi)表皮細胞中,通過激光共聚焦顯微鏡觀察它們的定位情況,結(jié)果發(fā)現(xiàn),Nt TFL1-1和Nt TFL1-2都定位在細胞質(zhì)中(圖4),與POSTR在線分析軟件預(yù)測的結(jié)果一致.圖3 中國水仙Nt TFL1-1和Nt TFL1-2的系統(tǒng)進化樹.

細胞,水仙,進化樹,器官


圖3 中國水仙Nt TFL1-1和Nt TFL1-2的系統(tǒng)進化樹.2.5 中國水仙Nt TFL1-1和Nt TFL1-2在不同分化時期的主芽和不同器官中的表達

【參考文獻】:
期刊論文
[1]甜橙成花關(guān)鍵基因CsFT的克隆分析與表達載體構(gòu)建[J]. 郭鑫躍,陳偉,楊小慧,劉勇,楊莉.  分子植物育種. 2019(02)
[2]中國水仙DFR基因啟動子的克隆及功能[J]. 姚紅,周平,范雨昕,孫瑞琦,Muhammad Anwar,曾黎輝.  應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報. 2019(04)
[3]高等植物成花誘導(dǎo)的分子機理研究進展[J]. 周琴,張思思,包滿珠,劉國鋒.  分子植物育種. 2018(11)
[4]龍眼TFL1基因的克隆與表達[J]. 林知寶,樊正炎,董妙霞,魏丹楓,曾黎輝.  福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2016(03)
[5]蜻蜓鳳梨TERMINAL FLOWER 1基因的克隆及組織表達分析[J]. 雷明,李志英,王之,徐立.  分子植物育種. 2016(01)
[6]中國水仙花芽分化觀察及儲藏條件對花芽數(shù)的影響研究[J]. 張曉晴,高健,彭鎮(zhèn)華.  植物研究. 2012(05)
[7]蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能中的位點氨基酸[J]. 秦濤.  生命科學(xué)儀器. 2011(02)

博士論文
[1]甘藍型油菜花序生長調(diào)節(jié)因子基因BnTFL1的功能分析及遺傳轉(zhuǎn)化的優(yōu)化[D]. 廖志強.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015

碩士論文
[1]龍眼ELF4和TFL1同源基因的表達與功能研究[D]. 付志遠.福建農(nóng)林大學(xué) 2018
[2]融安金柑開花關(guān)鍵基因FT/TFL1同源基因克隆及其功能初步研究[D]. 張奕.廣西大學(xué) 2016
[3]月季TFL1和SOC1基因的克隆及載體構(gòu)建[D]. 周權(quán).山西農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[4]花生MFT基因的克隆與功能驗證[D]. 朱巖.山東師范大學(xué) 2013
[5]中國水仙花芽分化及胚胎學(xué)研究[D]. 陳靜.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012



本文編號:3264014

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