本實驗室前期研究中,以不同光周期處理的馬鈴薯葉片為材料,利用轉(zhuǎn)錄組測序等方法,識別了包括StYABBY1在內(nèi)的光周期響應(yīng)基因。轉(zhuǎn)錄因子YABBY廣泛參與植物不同器官的形成,但其作用機(jī)制研究報道有限。本研究通過抑制YABBY1基因表達(dá),觀察和測定YABBY1抑制株系的蛋白質(zhì)組和生理表型變化,探索StYABBY1參與調(diào)控的代謝途徑,具體研究結(jié)果如下:（1）通過分子克隆途徑,在pC1305-35S載體多克隆位點插入StYABBY1反義cDNA序列,構(gòu)建了抑制YABBY1基因表達(dá)的重組載體,轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌GV3101,篩選獲得陽性重組農(nóng)桿菌菌株GV3101-pC-35S-StYABBY1。利用根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化方法,將重組基因轉(zhuǎn)化馬鈴薯和本氏煙,篩選得到Y(jié)ABBY1抑制表達(dá)的本氏煙陽性株系yab-11和yab-14。（2）形態(tài)觀察和生理表型測定結(jié)果顯示,對照和陽性株系苗期無可見形態(tài)表型差異,陽性株系土培60 d株高高出對照近1/3;抑制YABBY1表達(dá)陽性株系葉綠素和赤霉素含量分別高于對照29%和22倍,YABBY1抑制表達(dá)株系的凈光合速率是對照的4.1倍。結(jié)果表明,抑制YABBY1表達(dá)增強(qiáng)了葉綠... 

【文章來源】：寧夏大學(xué)寧夏回族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－】光合作用的兩個階段［４２】??Ｆｉｇｕｒｅ?１－１?Ｔｗｏ?ｓｔａｇｅｓ?ｏｆ?ｐｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ??所以研究光合作用，了解參與調(diào)節(jié)光合作用的基因，對植物生長發(fā)育的過程提供了理??

一■…??圖２－１?６ＶＫ４＾ｒｉ基因ｃＤＮＡ的ＲＴ－ＰＣＲ產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳圖??Ｆｉｇｕｒｅ?２－１?Ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｃＤＮＡ?ｏｆ?ＳｔＹＡＢＢＹｌ?ｇｅｎｅ?ｂｙ?ＲＴ－ＰＣＲ??（Ｍ為ＤＬ２０００的ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ；?ＣＫ為陰性對照；泳道１－４為引物ＹＡＢ－Ｆ／Ｒ的ＲＴ－ＰＣＲ產(chǎn)物）??２．３．２目的片段及載體的雙酶切??用Ｓｂｃ／和．Ｗｏ／雙酶切ｐＣ１３０５－３５Ｓ和＆Ｋ４５ＢＦ１基因ｃＤＮＡ，所有目的條帶大小與預(yù)期??結(jié)果一致，測定回收ＤＮＡ的濃度，ＯＤ２６＿〇和ＯＤ；：？＾。的值，其ＤＮＡ濃度和ＯＤ２６〇＿和??ＯＤ２６（？３〇的值均在正常范圍之內(nèi)（１．８￡〇Ｄ２６〇／ＯＤ２８ｃ６２．０），結(jié)果表明無蛋白質(zhì)及鹽離子的污??染，回收產(chǎn)物可用于連接轉(zhuǎn)化ＤＨ５ａ感受態(tài)細(xì)胞。??２．３．３重組菌落陽性鑒定??對連接后轉(zhuǎn)化大腸桿菌ＤＨ５ａ的單克隆陽性菌進(jìn)行ＰＣＲ鑒定，結(jié)果圖２－２：??Ｍ?ＣＫ＋?ＣＫ－?１?２?３?４?Ｍ??！〇〇〇＿??：５�！�??ｉ〇〇?－?＇士‘?＾??圖２－２重組ＤＨ５ａ－＆；Ｋ碰ＦＩ菌落ＰＣＲ產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳圖??Ｆｉｇｕｒｅ?２－２?Ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ?Ｙｙ＼＼５ａ－ＳｔＹＡＢＢＹ＼?ｃｏｌｏｎｙ?ＰＣＲ?ｐｒｏｄｕｃｔ??（Ｍ為ＤＬ２０００的ＤＮＡＭａｒｋｅｒ；?ＣＫ－為陰性對照；ＣＫ＋為陽性對照：泳道１－４為

回收產(chǎn)物可用于連接轉(zhuǎn)化ＤＨ５ａ感受態(tài)細(xì)胞。??２．３．３重組菌落陽性鑒定??對連接后轉(zhuǎn)化大腸桿菌ＤＨ５ａ的單克隆陽性菌進(jìn)行ＰＣＲ鑒定，結(jié)果圖２－２：??Ｍ?ＣＫ＋?ＣＫ－?１?２?３?４?Ｍ??！〇〇〇＿??：５�！�??ｉ〇〇?－?＇士‘?＾??圖２－２重組ＤＨ５ａ－＆；Ｋ碰ＦＩ菌落ＰＣＲ產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳圖??Ｆｉｇｕｒｅ?２－２?Ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ?Ｙｙ＼＼５ａ－ＳｔＹＡＢＢＹ＼?ｃｏｌｏｎｙ?ＰＣＲ?ｐｒｏｄｕｃｔ??（Ｍ為ＤＬ２０００的ＤＮＡＭａｒｋｅｒ；?ＣＫ－為陰性對照；ＣＫ＋為陽性對照：泳道１－４為引物ＹＡＢＢＹ－Ｆ／Ｒ的重組??ＤＨ５ｃｔ－Ｍ：獅：Ｈ菌落ＰＣＲ產(chǎn)物）??－１２－??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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